山西黑猪不同器官组织乳酸脱氢酶同工酶活性分析

为了探究哺乳动物中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的种类及不同器官组织中LDH同工酶的活性及相对含量,试验以山西黑猪为试验材料,利用紫外分光光度计和聚丙烯酰胺凝胶电泳对不同器官组织中LDH活性和同工酶谱带进行检测和分离。结果表明:不同器官组织中LDH的活性存在明显区别,不同器官组织中所含LDH同工酶的种类和相对含量各不相同,不同器官组织中相同LDH同工酶的相对迁移率差异不大。说明动物机体中同工酶的保守性较高。

HSPA2在牦牛不同组织器官中的表达差异

【目的】探索热休克蛋白70-2(heat shock 70kD protein-2,HSPA2)在牦牛不同组织器官中的表达差异。【方法】选取3头1岁龄的健康青海高原雄性牦牛为研究对象,在正常生理条件下,于2013年9月中旬采集不同组织器官(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑和睾丸)样本。(1)从牦牛不同组织器官中提取RNA,将RNA反转录成第一链cDNA,参照牦牛HSPA2和β-actin基因序列(登录号为KC790105.1和DQ838049.1)设计特异性引物,首先采用RT-PCR来验证实时荧光定量PCR(RT-qPCR)是否能应用于牦牛不同组织器官中HSPA2表达差异的测定;然后采用RT-qPCR测定牦牛不同组织器官中HSPA2相对表达量的差异。(2)将牦牛不同组织器官样本4%多聚甲醛固定,制成石蜡切片,免疫组织化学法测定HSPA2在不同组织器官中的分布。采用Image-Pro Plus 6.0软件进行免疫组化图像分析,测定HSPA2阳性反应物的积分光密度,进行吸光度分析;通过SPSS 19.0统计软件,用单因素方差分析进行差异显著性测定。【结果】(1)RT-PCR结果表明RT-qPCR法可用于牦牛不同组织器官中HSPA2表达差异的测定。实时荧光定量PCR结果表明,HSPA2在睾丸中的相对表达量,分别是在脑、肾脏、心脏、脾脏、肺脏和肝脏中的83.33、97.09、111.11、133.33、222.22和285.71倍。(2)免疫组织化学结果显示,牦牛睾丸、肾脏、脑、心脏、肺脏、肝脏和脾脏中均有HSPA2的阳性表达。其中,在牦牛肾脏皮质肾小管、髓质肾小管,大脑皮质海马CA1区、小脑皮质,心肌细胞,肺泡上皮细胞,肝细胞,脾脏边缘区和红髓中有HSPA2阳性反应,着色深浅不等,大部分阳性反应位于细胞质,细胞核阳性反应极少;而在睾丸曲精小管中生精细胞细胞质和细胞核中均有HSPA2阳性反应,着色深浅不等;阴性对照组未观察到阳性反应。根据积分光密度值比较得出,HSPA2蛋白的阳性表达量在睾丸中最高,脑、肾脏、心脏、肺脏和肝脏次之,脾脏最少。【结论】通过基因水平和蛋白水平两个层面的研究,发现HSPA2在牦牛各组织器官中存在表达差异;睾丸中HSPA2基因和蛋白表达量均高于脑、肾脏、心脏、脾脏、肺脏和肝脏,提示HSPA2可能与睾丸的生殖功能密切相关。

花期和幼果期‘燕山早丰’板栗不同组织或器官矿质元素含量的变化

【目的】探明板栗矿质元素在不同组织或器官中的分配规律。【方法】以板栗‘燕山早丰’(Castanea mollissima‘Yanshanzaofeng’)为试材,研究了板栗花期和幼果期主要矿质元素(N、P、K、Ca、Mg、Cu、Mn、Fe、B)在结果枝不同组织或器官中的含量。【结果】花期N、P、K、和B元素在板栗雌花序中含量最多,Fe、Mn、Mg元素在叶片中含量最多,Ca元素分配在枝条中居多,Cu和Mg元素的含量在雌花序和雄花序中的含量无显著差异。幼果期N、P、Ca和Cu元素在板栗子房中的含量最多,B、Fe、Mn在叶片中的含量最高,而Mg则主要分布在枝条中,K含量在子房和刺苞中相差不大。同时,叶片中除N、K含量与花期相比分别降低了94.01%和33.91%,其余元素与花期相比均有所提高,P、Ca、B、Mg、Fe、Mn、Cu元素的含量分别提高了37.43%、76.22%、25.99%、19.73%、33.68%、18.89%和66.21%。【结论】依据板栗花期和幼果期各组织或器官对矿质元素的需求,应在花期适当追施N、P、K、B和Cu肥,在幼果期补施Ca肥,以利于板栗后续的生长发育需求。

食物中毒马不同组织器官中TLR3、TLR7、TLR8和TLR9 mRNA转录水平的研究

为了探讨食物中毒马不同组织器官中TLR3、TLR7、TLR8和TLR9基因的表达情况,试验采用SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法检测食物中毒马和健康马(对照组)胃、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、十二指肠、盲肠和骨髓中TLRs基因的转录水平。结果表明:在食物中毒马胃、肝脏和十二指肠中的TLR3、TLR7、TLR8、TLR9基因相对表达量均显著高于对照组(P<0.05),在所检测的食物中毒马的9个组织器官中(除肺脏外)TLR9基因表达量与对照组相比差异显著(P<0.05)。说明食物中毒可引起马胃、肝脏和十二指肠的变化,推测TLR9基因在机体抵御食物中毒中发挥着重要作用。

黄蜀葵花期不同组织器官中多类型资源性化学成分的分析与利用价值挖掘

对锦葵科植物黄蜀葵Abelmoschus manihot采收药用部位花冠过程中产生的不同组织器官(根、茎、叶和花)中的主要资源性化学成分进行分析评价,为其资源化利用提供支撑。分别采用高效液相色谱法(HPLC)、超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法(UPLC-TQ/MS)分析黄蜀葵不同组织器官中黄酮类、核苷类及氨基酸类资源性化学成分组成及其含量;分别采用紫外-可见分光光度法、粗纤维测定法(Weende)分析黄蜀葵不同组织器官中可溶性多糖类及总纤维含量。结果显示,黄蜀葵花中富含黄酮类资源性化学成分,主要组成为金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷、杨梅素、槲皮素-3'-O-葡萄糖苷、芦丁和槲皮素,总量为25.450 mg·g^(-1),叶片亦有少量黄酮类资源性化学成分分布。黄蜀葵不同组织器官均富含可溶性多糖类组分和总纤维,其中茎中总多糖量较高,达19.76%,根中总纤维量较高,可达29.88%。在黄蜀葵植物中共检出21种氨基酸类和9种核苷类资源性化学成分,其中花中氨基酸类化学成分种类及含量较为丰富,达4.737 mg·g^(-1);叶中核苷类化学成分含量较为丰富,为1.474 mg·g^(-1)。黄蜀葵植物中含有丰富的资源性化学成分,且不同组织器官中所含成分的组成和含量有所差异,研究结果为黄蜀葵植物采收花后不同组织器官的精细化利用与产业化开发提供了科学依据。

国槐不同组织器官中多成分分析及抗氧化活性研究

目的通过对国槐Sophora japonica不同组织器官进行综合评价,为其资源合理利用提供依据。方法采用高效液相色谱(HPLC)法、电感耦合等离子体发射光谱(ICP-OES)法、比色法检测样品中芦丁、水仙苷、槲皮素、异鼠李素、重金属含量以及Fe3+还原能力、DPPH自由基(DPPH·)、ABTS自由基(ABTS·+)清除能力和总抗氧化能力(FRAP)。运用SPSS20.0软件对结果进行聚类分析和主成分分析。结果国槐不同组织器官中4种黄酮类成分总含量为花蕾>花>花轴>叶>枝条;抗氧化能力依次为花蕾>花>花轴>叶>枝条,与黄酮类成分总量呈正相关。花和花蕾中5种重金属含量均符合《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》,部分叶、花轴和枝条中Cd超标。聚类分析将花和花蕾聚为一类,花轴、叶和枝条聚为另一类;主成分分析将8个变量提取为2个主成分(PC1和PC2),不同组织器官间PC1值有明显差异,不同批次间表现在PC2值上有差异。结论国槐花及花蕾中重金属含量低,黄酮类成分含量高,抗氧化活性强,品质优良;花轴及叶也含有较高的黄酮类成分及较强的抗氧化能力,具有进一步开发利用的价值。

MRFs家族基因在翘嘴鳜成体不同组织及器官中的表达特征

生肌调节因子(MRFs)家族成员包括MRF4、Myf5、Myogenin和MyoD,是肌肉形成的关键控制因素,其作为一种转录因子在肌肉的发育分化过程中发挥重要作用。本研究通过RT-qPCR方法分析MRFs家族基因在翘嘴鳜成体中不同组织及器官的表达情况,阐明其在肌肉组织中的特异性表达。结果显示:MRFs家族基因在成体翘嘴鳜肌肉、心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肠道和脑组织及器官中均检测到表达,且在肌肉中的表达量显著高于其他组织及器官中的表达量(p<0.05)。为研究生肌调节因子在翘嘴鳜肌肉发育过程中的作用提供了基础资料。