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题名蒺藜苜蓿酵母杂交cDNA文库的构建与分析
被引量:7
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作者
李舒文
董笛
李殷睿智
王梦迪
韩烈保
张铁军
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机构
北京林业大学草业与草原学院
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出处
《分子植物育种》
CAS
北大核心
2021年第23期7861-7866,共6页
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基金
国家自然科学基金面上项目(31772656)资助。
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文摘
酵母双杂交和单杂交技术是筛选蛋白质互作或蛋白质与DNA互作的一种高效分子生物学技术,是生物大分子互作和调控的重要的手段。为了获得高容量的蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)基因文库,为后续深入挖掘蒺藜苜蓿相关基因,改善蒺藜苜蓿品质提供基础。本研究选取了不同组织来源的蒺藜苜蓿,并对蒺藜苜蓿进行不同的激素诱导或胁迫处理,利用SMART技术成功构建高容量的蒺藜苜蓿酵母杂交cDNA文库。文库质量检测结果表明:文库滴定数为5×10^(7)CFU/m L,文库库容量为1.28×10^(7)CFU,平均插入片段长度大于1000 bp,24个克隆全部能够扩增出条带,c DNA片段重组率为100%。该文库质量较高,所包含的遗传信息完整,符合酵母杂交筛选试验要求,可应用于蒺藜苜蓿基因表达调控的研究和互作蛋白的筛选试验。
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关键词
蒺藜苜蓿
酵母杂交cDNA文库
SMART技术
不同组织来源
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Keywords
Medicago truncatula
Yeast hybridization cDNA library
SMART technology
Different organizational sources
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分类号
Q943.2
[生物学—植物学]
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