蝴蝶兰不同部位CymMV和ORSV同步检测及含量比较研究

为探究建兰花叶病毒(cymbidium mosaic virus,CymMV)和齿兰环斑病毒(odontoglossum ringspot virus,ORSV)在蝴蝶兰不同部位的RNA质量及带毒量,以携带2种病毒的植株为试验材料,采用基于TaqMan探针双重实时荧光定量PCR法检测蝴蝶兰的蕊柱、唇瓣、萼片、花梗(韧皮部)、叶片、气生根和地下根7个部位,并采用基因芯片法对带毒量进行复检验证。结果表明,蝴蝶兰不同部位的RNA提取效果存在差异,蕊柱的浓度最高,其次是唇瓣和气生根,地下根的浓度最低。双重实时荧光定量PCR检测结果表明,CymMV和ORSV在唇瓣和气生根中载量最高,在蕊柱和花梗中载量最低,2种病毒在不同部位的病毒载量变化趋势一致。本研究为蝴蝶兰病毒监测样本采集的部位选择提供了一定的理论指导。

小叶黄杨TLC鉴别及不同部位中紫丁香苷和香草酸HPLC测定

目的:建立小叶黄杨中紫丁香苷和香草酸的TLC鉴别和HPLC含量测定方法,研究药材中不同部位紫丁香苷和香草酸的含量差异。方法:TLC鉴别法,使用硅胶GF254薄层板,以三氯甲烷-甲醇-甲酸(8∶1.2∶0.5)作为展开剂;HPLC法,使用Xbridge C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.2%磷酸水溶液(17∶83)为流动相,流速1 m L·min^(-1),检测波长264 nm,柱温35℃。结果:TLC法操作简便,准确,斑点清晰,专属性好。紫丁香苷、香草酸质量浓度分别在3.36~302.4和0.55~695.5μg·m L^(-1)(r=0.999 5)范围内线性关系良好,3种浓度水品平均回收率分别在99.8%~103.0%和98.4%~101.1%范围内。小叶黄杨不同部位中紫丁香苷和香草酸的含量存在差异,紫丁香苷在粗茎、细枝、叶和地上部分中的含量分别为0.030~0.324、0.002~0.518、0.013~0.907和0.010~0.667 mg·g^(-1),香草酸在粗茎、细枝、叶和地上部分中的含量分别为0.025~0.077、0.021~0.087、0.012~0.132和0.020~0.123 mg·g^(-1)。结论:该方法能鉴别小叶黄杨,准确测定紫丁香苷和香草酸的含量,为开发利用小叶黄杨资源提供了科学依据。

高效液相色谱法同时测定怀山药中4个山药素化合物

目的：建立HPLC法同时测定怀山药不同部位（块茎、皮、茎叶、零余子）中4个山药素化合物（山药素Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ）的含量。方法：采用Aglient HC-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,以甲醇（A）-水（B）为流动相,洗脱梯度（0~20 min,50%A;20~65 min,50%A→65%A）,流速1.0 m L·min-1,检测波长274 nm,柱温30℃,进样量20μL。结果：4个山药素化合物在60 min内得到良好的分离,在给定的浓度范围内,4个山药素化合物呈现良好的线性（r≥0.999 9）、精密度（RSD≤0.93%）、稳定性（RSD≤0.62%）和重复性（RSD≤3.2%）,回收率在91%~102%之间。其中怀山药的零余子和茎叶中均含有4个山药素化合物,山药皮中含有3个山药素化合物（山药素Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ）,块茎中含有2个山药素化合物（山药素Ⅰ、Ⅲ）。结论：经方法学验证,本文建立的方法为怀山药质量标准研究、产品质量控制以及山药素类化合物的化感研究打下了基础。