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RNA结合蛋白NONO通过影响SKP2、E2F8表达调控乳腺癌细胞增殖的研究 被引量:2
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作者 陈景森 熊志毅 +2 位作者 李欢 张文夏 王恩礼 《国际检验医学杂志》 CAS 2022年第7期823-826,共4页
目的探讨不含POU结构域的八聚体核苷酸结合蛋白(NONO)是否通过影响S期激酶相关蛋白2(SKP2)和E2F转录因子8(E2F8)表达从而调控乳腺癌细胞增殖。方法收集2019年6月至2020年6月于该院接受乳腺癌根治术治疗的43例乳腺癌患者的乳腺癌组织及... 目的探讨不含POU结构域的八聚体核苷酸结合蛋白(NONO)是否通过影响S期激酶相关蛋白2(SKP2)和E2F转录因子8(E2F8)表达从而调控乳腺癌细胞增殖。方法收集2019年6月至2020年6月于该院接受乳腺癌根治术治疗的43例乳腺癌患者的乳腺癌组织及癌旁组织石蜡块。采用免疫组织化学SP染色检测NONO、SKP2和E2F8在组织中的表达。将MCF-7细胞分为MCF-7组(无特殊处理)、sh-NC-MCF-7组(加入sh-NC序列正义链的慢病毒LV3液)和sh-NONO-MCF-7组(加入含sh-NONO序列正义链的慢病毒LV3液)。检测sh-NONO的沉默效率,筛选稳定株。分析沉默NONO对乳腺癌细胞增殖能力、细胞周期以及SKP2和E2F8表达的影响。结果乳腺癌组织中NONO、SKP2和E2F8阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05);与MCF-7和sh-NC-MCF-7组比较,sh-NONO-MCF-7组NONO蛋白表达水平降低(P<0.05),提示成功构建NONO沉默MCF-7细胞株;与MCF-7和sh-NC-MCF-7组比较,sh-NONO-MCF-7组增殖能力降低(P<0.05);与MCF-7和sh-NC-MCF-7组比较,sh-NONO-MCF-7组G_(0)/G_(1)期细胞比例显著增加,S期和G_(2)/M期细胞比例显著降低(P<0.05);与MCF-7和sh-NC-MCF-7组比较,sh-NONO-MCF-7组SKP2和E2F8蛋白表达水平以及SKP2和E2F8 mRNA相对表达水平均显著降低(P<0.05)。结论沉默NONO表达可通过下调SKP2和E2F8表达,诱导细胞周期阻滞,从而抑制乳腺癌细胞增殖。 展开更多
关键词 乳腺癌 不含pou结构域的八聚体核苷酸结合蛋白 S期激酶相关蛋白2 E2F转录因子8 细胞增殖 细胞周期
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小鼠海马NONO基因沉默对焦虑样行为的影响
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作者 冯莹 方志成 +1 位作者 陈伟 郑翔 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2022年第3期307-313,共7页
目的:探索小鼠海马区不含POU结构的八聚核苷酸结合蛋白(NONO)基因沉默后突触相关基因的表达及行为学变化。方法:构建并包装表达NONO基因靶向shRNA的重组慢病毒(LV-NONO),海马区显微注射重组慢病毒干扰NONO基因的表达,实验小鼠分为对照组... 目的:探索小鼠海马区不含POU结构的八聚核苷酸结合蛋白(NONO)基因沉默后突触相关基因的表达及行为学变化。方法:构建并包装表达NONO基因靶向shRNA的重组慢病毒(LV-NONO),海马区显微注射重组慢病毒干扰NONO基因的表达,实验小鼠分为对照组(control),对照病毒组(LV-Con)和NONO慢病毒干扰组(LV-NONO)。慢病毒感染5 d检测海马NONO的表达,14 d检测海马γ-氨基丁酸A型受体α2亚基(GABA)和桥尾蛋白(gephyrin)的表达,旷场实验和O迷宫实验检测实验小鼠的行为学变化。结果:LV-NONO组小鼠海马区NONO、GABA和gephyrin的表达显著低于对照组小鼠。旷场实验和O迷宫实验结果显示,LV-NONO组小鼠进入开放臂的次数和中央区(开放臂)停留时间显著低于对照组小鼠。结论:海马区注射NONO干扰病毒抑制NONO基因的表达可以下调GABA和gephyrin的表达,进而增强小鼠焦虑样行为。 展开更多
关键词 不含pou结构的八核苷结合蛋白(NONO) γ-氨基丁A型受α2亚基GABA 桥尾蛋白 焦虑 小鼠
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NONO基因沉默抑制鼻咽癌细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力 被引量:7
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作者 张秀娟 熊薇 +2 位作者 吴嫦丽 陈春玲 周光纪 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期504-511,共8页
目的:研究不含POU结构域的八聚体结合蛋白(non-POU domain containing octamer-binding protein,NONO)基因沉默对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,以期探讨NONO在鼻咽癌进展中的作用。方法 :采用蛋白质印迹法检测正常鼻咽上皮细胞NP-6... 目的:研究不含POU结构域的八聚体结合蛋白(non-POU domain containing octamer-binding protein,NONO)基因沉默对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,以期探讨NONO在鼻咽癌进展中的作用。方法 :采用蛋白质印迹法检测正常鼻咽上皮细胞NP-69以及鼻咽癌细胞CNE1和CNE2中NONO蛋白的表达。用含有靶向人NONO基因的sh RNA重组慢病毒感染鼻咽癌CNE2细胞,嘌呤霉素筛选后,采用蛋白质印迹法检测NONO基因的表达沉默效果。采用CCK-8法、平板克隆形成实验、细胞划痕愈合实验、体外Transwell迁移和侵袭实验分别检测NONO基因沉默对CNE2细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力的影响。结果:鼻咽癌细胞CNE1和CNE2中NONO蛋白表达水平比正常鼻咽上皮细胞NP-69明显升高(P值均<0.05)。感染NONO-sh RNA重组慢病毒后,CNE2细胞中NONO基因沉默效率接近100%。与未感染或感染阴性对照慢病毒的CNE2细胞相比,NONO基因沉默后的CNE2细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力均明显降低(P值均<0.05)。结论 :NONO基因沉默可抑制CNE2细胞的体外增殖、迁移及侵袭,提示NONO可能是一个潜在的促进鼻咽癌发生和发展的重要调控蛋白。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 基因沉默 细胞增殖 细胞运动 不含pou结构域的八结合蛋白
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NONO/p54nrb在肿瘤发生发展中作用的研究进展 被引量:1
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作者 熊薇 张秀娟 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期3680-3685,共6页
不含POU结构域的八聚体核苷酸结合蛋白(non-POU domain-containing octamer-binding protein,NONO)也称54 k D核RNA/DNA结合蛋白(54 k D Nuclear RNA-and DNA-binding protein,p54nrb),是一种能与DNA和RNA结合的多功能核蛋白,参与... 不含POU结构域的八聚体核苷酸结合蛋白(non-POU domain-containing octamer-binding protein,NONO)也称54 k D核RNA/DNA结合蛋白(54 k D Nuclear RNA-and DNA-binding protein,p54nrb),是一种能与DNA和RNA结合的多功能核蛋白,参与多种细胞生物活动,包括转录调节、DNA修复、RNA核保留复制、细胞增殖调控以及形成亚核结构paraspeckle等。当NONO蛋白表达异常时,是否会导致肿瘤的发生呢?现研究表明在多数肿瘤中NONO蛋白表达异常。与鼻咽癌、前列腺癌、膀胱癌、乳头状肾细胞癌、大肠癌、恶性黑色素瘤以及白血病等多种肿瘤发生发展密切相关。本综述就NONO蛋白结构、功能以及在肿瘤发生、发展中的作用予以综述。 展开更多
关键词 不含pou结构域的八聚体核苷酸结合蛋白 54kD核RNA/DNA结合蛋白 肿瘤
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