福氏不完全佐剂与pristane在腹水型单抗制备中的联合应用

为提高腹水型单抗的产量 ,在采用 pristane常规致敏BALB/c小鼠的基础上 ,于注射杂交瘤细胞的同时 ,再少量注入福氏不完全佐剂 (IncompleteFreund’Adjuvant ,IFA) ,7～ 10d后收获腹水 ;ProteinG免疫亲和层析法及紫外分光光度法对腹水型单抗进行纯化及蛋白定量 ;间接免疫荧光法对纯化的抗体蛋白进行效价分析。实验结果表明 :腹水形成的阳性率为 80 % ,腹水的平均收获量为 6.2ml/只小鼠。纯化后腹水中抗体蛋白的含量为 2 .5～ 5mg/ml ,纯化的抗体蛋白用于间接免疫荧光分析的用量为每 5× 10 5 个细胞 0 .5～ 1.0 μg。结果表明 。

不完全佐剂与降植烷在生产单克隆抗体腹水中的对比研究

按常规方法用降植烷(Pristane)作为生产单克隆抗体(McAb)腹水的诱发剂，由于降植烷需要进口、有致癌作用．而且诱生腹水的能力也不够理想，为此，作者寻找其它诱生剂以代替降植烷，经过初选之后，确定用不完全佐剂(IFA)与降植烷进行对比研究。现将结果报告如下：

不完全佐剂与降植烷在产生McAb腹水作用的比较

本文报道用降植烷和不完全佐剂(Incomplete freund's adjuvant,IFA)为诱导剂,刺激BALB/C小鼠产生McAb腹水。实验结果表明,不完全佐剂明显优于降植烷,而且毒性小,无致癌作用,故可大力推广。另外,本文还探讨了腹水量与小鼠的体重及存活时间的关系。

不完全弗氏佐剂诱导的髓样细胞抑制T细胞活性

目的:在肿瘤免疫治疗方法中,肿瘤疫苗前景广阔。在设计肿瘤疫苗时,由于许多肿瘤抗原的免疫原性弱,必须加入一些佐剂才能诱导出机体免疫应答。不完全弗氏佐剂(IFA)是目前肿瘤疫苗研究动物实验中最常用的佐剂之一,已知它能够有效诱导产生高滴度抗体。然而,实验发现,应用含有弗氏佐剂的肿瘤疫苗治疗肿瘤时并未出现期望的结果,原因仍不清楚。方法:BALB/c小鼠接受单次剂量的IFA注射,观察脾脏中CD11b+细胞的比例。使用MTT法检测CD11b+细胞对T细胞增殖的影响和γ干扰素(IFN-γ)分泌能力的影响。结果:IFA可诱导机体产生一群CD11b+细胞,其能抑制T细胞的增殖和IFN-γ分泌。结论:CD11b+细胞可能是导致含有IFA肿瘤疫苗临床效果不佳的原因之一,佐剂的选择会影响肿瘤疫苗的疗效。

磷酸钙及不完全弗氏佐剂与乙肝核酸疫苗混合免疫小鼠的研究

目的：观察磷酸钙与不完全弗氏佐剂混合作为乙肝核酸疫苗的佐剂能否提高乙肝核酸疫苗的免疫效果。方法：将乙肝核酸疫苗与磷酸钙形成共沉物，再与不完全弗氏佐剂混合免疫小鼠，不同时间内观察小鼠外周血中ＨＢｓＡｇ与抗一ＨＢＳ的变化，从而观察小鼠的免疫应答。结果：两种佐剂能提高乙肝核酸疫苗的免疫效果。结论：核酸疫苗免疫中使用佐剂值得进一步研究。

乳剂类免疫佐剂研究进展

乳剂类免疫佐剂又称为油类佐剂,是将抗原包裹在各种油相中,以实现为抗原提供贮存库,并通过将抗原靶向递呈给免疫细胞以增强机体对抗原的特异性免疫应答反应的一类免疫佐剂。自1916年首次报道乳剂类佐剂的应用至今,一百多年来乳剂类佐剂已成为疫苗研制与开发中不可缺少的重要因素,为应对人类和动物各种传染病提供更安全有效的疫苗提供了物质保障。随着现代疫苗学不断的发展,新型疫苗的研制和开发对佐剂提出了更高的要求,了解佐剂的组成成分、有效性和安全性的免疫作用机理是佐剂应用于疫苗研制和开发的前提。因此本文选择了白油佐剂、完全弗氏佐剂(Complete Freund’s Adjuvant,CFA)、不完全弗氏佐剂(Incomplete Freund’s adjuvant,IFA)、MF59®、AS(Adjuvant systems,AS)系列和Montanides系列等目前常用和商品化的乳剂类免疫佐剂,对其佐剂组成成分、免疫作用机理和临床应用情况等进行综述,以期为乳剂类免疫佐剂的临床使用提供一定的理论参考。

新佐剂——Montanide ISA 50V2在马免疫中的应用研究

目的研究新佐剂-Montanide ISA 50V2在马免疫中的应用,制定合理的免疫程序,提高马免疫血清效价。方法用Montanide ISA 50V2乳化A型和F型肉毒类毒素制备成油乳抗原,免疫家兔和马,并与福氏不完全佐剂进行对比。结果在马免疫程序中,Montanide ISA 50V2与福氏不完全佐剂交替使用效果更好,免疫效价较高。结论在进一步试验确证后,将Montanide ISA 50V2作为佐剂应用于马免疫中,以获得更高的免疫血清的效价。

佐剂性关节炎大鼠模型的实验研究

目的 :改进大鼠佐剂性关节炎 ( AA)模型制作的实验设计 ,提高造模成功率。方法 :选择影响造模成功率较大的因素 ,如弗氏完全佐剂 ( FCA)中的卡介苗 ( BCG)浓度、FCA注射量、FCA体内注射部位作为研究对象。结果 :不同 BCG浓度下的最高成功率为 78.5 % ;不同注射量最高成功率为 71.9% ;不同注射部位最高成功率为 70 .0 %。结论 :用含 2 0mg/ ml BCG浓度的 FCA 0 .1ml注射量 ,后肢足跖皮内注射能明显提高 AA大鼠造模的成功率。较以前文献报道的含 10mg/ ml BCG浓度的 FCA 0 .0 5 ml注射量 ,背部多点注射法等有较大的改进。

旋转振荡法配制IFA抗原及其在TAT生产中的应用

建立了旋转振荡法配制弗氏不完全佐荆(IFA)抗原,并在精制破伤风抗毒素(TAT)生产中,与传统方法配制的IFA抗原进行比较。随机抽出40匹生产马(骡)分为两组,每组20匹,分别采用两方法配制的抗原实施免疫。于免疫第6程开始,两组再随机抽出10匹作为各自的实验组,辅以静脉注射小牛胸腺肤以提高其免疫血浆效价。结果:四组在小牛胸腺肽应用前的第5程,其免疫血浆效价比较(F=0.35,P>0.05)。至第11程四组比较(F=9.16,P<0.01)。提示:两方法在免疫及提高血浆效价方面,效果一致。本研究为实验室、尤其是临床血清生产中IFA抗原的制奋以及其他水油乳剂的乳化,提供了简便、快速,且能大量配制的可靠而有效的方法。

六种肝纤维化-肝硬化模型的复制及应用

研究肝纤维化-肝硬化的病理生理及其防治必须建立合适的模型,这里介绍6种制作方法供选用。1.牛血清白蛋白 (BSA)复制肝纤维化模型Wistar大白鼠,雌性,体重120g左右。将BSA用生理盐水稀释成18mg/ml BSA溶液,以等量弗氏不完全佐剂乳化。以9mg/ml BSA弗氏不完全佐剂混悬液0.5ml/次/只,小剂量多部位皮下注射以致敏动物,共5次。第1、2次间隔2周,其余各次间隔1周。末次致敏注射后1周,球后静脉丛采血。

Ⅱ型猪圆环病毒高免血清及IgG的制备

猪圆环病毒（PCV）是迄今发现的一种最小的动物病毒,已知PCV有2个血清型,即PCV-1和PCV-2。PCV-1为非致病性的病毒,PCV-2为致病性的病毒[1-2]。PCV-2是断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的主要病原,多发于5~16周龄猪[3]。该病最早发现于加拿大,很快在欧美及亚洲一些国家（包括中国）发生和流行,除PMWS外。

软肝冲剂抗肝纤维化的实验和临床研究(摘要)

目的:探讨中药软肝冲剂对大鼠实验性肝纤维化的防治作用及对慢性肝炎(中、重度)、肝硬变代偿期患者的临床疗效。方法:①实验研究:将20只Wistar大鼠分成造模组和软肝组,每组10只。均用人血清白蛋白与弗氏不完全佐剂等量混合的乳化液造模,在两组大鼠皮下多处注射乳化液0.5ml/次,共5次,前2次间隔时间为14天,后3次间隔7天。

FCA和FICA可增强淋巴滤泡捕捉抗原的能力

目的 探讨向体内注入非抗原类物质能否引起反应性淋巴滤泡形成 ,观察体内注入FCA(完全弗式佐剂 )、FICA(不完全弗式佐剂 )对滤泡树突状细胞 (FDC)捕捉抗原的能力有无影响。方法 将FCA、FI CA分别注入小鼠足底 ,数日后取出腘淋巴结 ,应用PNA B法及PAP免疫组化法染色 ,采取三维重塑方法 ,统计淋巴滤泡、FDC细胞群数量。结果 注入FCA、FICA后第 5日出现初级淋巴滤泡 ,第 3 5日数量达到高峰 ,之后逐渐减退。同时 ,滤泡树突状细胞 (FDC)与B细胞聚集同步出现。结论 动物体内注入有丝分裂物质FCA、FICA引起引流淋巴结内次级淋巴滤泡形成 。

细胞工程

910418 标记抗原捕获分析:一种检测抗克隆基因产物单竟隆抗体的方法[英]/Urban,R.G,…∥Anal.Biochem-1990,186(1)-121～126[译自DBA,1990,9(13),90-07780]标记抗原捕获分析(LACA)是一种固相型的放射免疫分析(RIA),它应用噬菌体T7表达系统产生确定的放射标记抗原.

细胞工程

制备了抗黄瓜花叶病毒(c Mv)的单克隆抗体(MAbs).给BALB/c(6一8周龄)小鼠注射在弗氏不完全佐剂中乳化的CMV菌株DF、DPF、D或ToRS.再间隔24小时不用佐剂对小鼠加强注谢(2一3次).

细胞工程

用伍合在弗氏完全佐剂内的半纯乳酸乳杆菌羹汤亚种(Lae才obaeilloslactf:subspct’omo:)Wgz蛋白酶经腹腔注射免疫B人LB/c小鼠。3周后再用o.

细胞工程

902944 特异于高分子置型人类表皮生长因子的单克隆抗体[英]/Koga,J.…//Biochem.Int.-1989,19(2).-445～452[译自 DBA,1990,9(5),90-02827]制备了抗高分子量型人类表皮生长因子的单克隆抗体(MAbs,).用混于弗氏完全佐剂的抗原皮下注射雌性 BALB/c 小鼠.间隔两周后,用混于弗氏不完全佐剂中的抗原加强注射.最后用无佐剂的抗原静脉注射.最后注射三天后。