不同培养条件及其组合对杉木无性系T-c22组培苗不定根诱导的影响

【目的】不定根诱导是杉木优良无性系繁殖的重要手段,杉木组织培养中不定根诱导受到多种因素影响,但起主导作用的关键因素尚不清楚。本研究通过比较不同培养条件对杉木不定根诱导的影响,以期研究出最适宜杉木生根的培养因素,为后续试验和研究奠定基础。【方法】以杉木T-c22无性系为试验材料,通过改变营养物质条件、植物生长调节剂种类及浓度、去除针叶情况、有无活性炭、光照条件以及不同光质等不同培养因素,统计杉木生根的各种指标,研究不同培养因素以及不同因素与光照之间的交互作用对杉木生根的影响。【结果】(1)光照比黑暗显著提高杉木组培苗的株高、生根率、平均根数以及平均根长,显著抑制杉木的根鲜质量。(2)白光和红光均能提高杉木的生根率,生根率达100%;白光能够显著提高杉木的生根数量;红光和蓝光均会显著降低杉木的根长,但能够显著提高杉木无菌苗的株高。(3)添加IBA、NAA等单一植物生长调节剂显著提高杉木的株高、平均生根数量、平均根长、根鲜质量以及根干质量;光照和单一生长调节剂的交互作用显著提高平均根数以及平均根长。(4)培养基中含有适量营养成分会显著提高杉木的生根率、生根数量、平均根长、平均根鲜质量以及平均根干质量;光照和有无营养的交互作用显著提高杉木的株高和平均根长。(5)去针叶显著提高杉木无菌苗株高、根的平均长度及平均干质量;光照和有无去针叶的交互作用对杉木不定根的诱导没有显著的影响。(6)活性炭显著降低杉木无菌苗的生根率、生根数量、根鲜质量以及根干质量;活性炭和光照的交互作用显著降低杉木的生根率以及平均根长。【结论】本研究中影响杉木T-c22无性系生根的因素重要性排序为:营养物质>植物生长调节剂的种类和浓度>不同光质>光照时间以及光照与其他因素的交互作用>有无去针叶和活性炭。最适宜杉木T-c22无性系生根的培养基配方为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L;最适宜杉木生根的培养条件为添加适宜的营养物质、适宜浓度的植物生长调节剂(NAA 0.5 mg/L)、去除部分针叶以及红光(16 h/d)处理。

油菜素内酯对巨桉组培中不定根诱导、苗木生长和茎基部细胞结构的影响

以巨桉优良无性系EG5和GL1组培苗为材料,在生根培养基中分别加入0、0.005、0.01、0.05、0.10、0.20 mg·L^(-1)的油菜素内酯,研究其对桉树组培苗中不定根的诱导、茎的生长以及茎基部细胞分化的影响。结果表明:油菜素内酯对巨桉无性系EG5的生根率和苗高具有显著影响,无性系EG5在含有0.005 mg·L^(-1)油菜素内酯的生根培养基中达到最高为76.6%的生根率,同时组培苗的苗高随着油菜素内酯浓度的增加而呈现出逐渐降低的趋势。对于巨桉无性系GL1,在生根培养基中添加0.05 mg·L^(-1)油菜素内酯达到最高为88.3%的生根率,不同浓度的油菜素内酯对苗高没有显著影响。同时也发现油菜素内酯明显抑制了无性系EG5不定根的根长,随着其浓度的增加根长逐渐变短;而根条数表现为低浓度时无显著影响,在高浓度时显著性降低,且油菜素内酯对侧根的诱导和分化不起作用。另外通过对无性系EG5生根植株基部的组织切片和化学染色分析表明,油菜素内酯在0.10 mg·L^(-1)时能促进桉树基部的形成层和木质部的分化,这可能是抑制不定根诱导和分化的原因之一。

前体物质对雷公藤组织培养不定根诱导及甲素含量的影响

在雷公藤Tripterygium wilfordii组织培养生根培养阶段以柠檬酸、丙酮酸钠、乙酸钠、L-酪氨酸、L-苯丙氨酸、赖氨酸为前体物质,添加到培养基中,培养30 d后,观测外植体生根情况并测定甲素含量。结果表明,丙酮酸钠3.0 mg·L^(-1)在光照条件及乙酸钠1.0 mg·L^(-1)在黑暗条件培养中可获得最大的不定根量,赖氨酸1.0mg·L^(-1)在光照条件及L-酪氨酸1.0 mg·L^(-1)在黑暗条件中培养可获得较高含量甲素。

雪柑试管苗不定根高频率诱导和高效再生体系的建立

以雪柑实生苗上胚轴为材料,建立了高效离体培养再生体系。上胚轴纵切结合前期暗培养,在MS附加6-BA 3mg/L、蔗糖30g/L培养基中,不定芽诱导率为100%,每个外植体平均诱导的不定芽数达33.8;不定芽在1 000mg/L IBA溶液中浸泡10min后,移入1/4MT(大量元素)+1/2MT(其它元素)+10g/L蔗糖的液体培养基中,采用滤纸桥法进行培养,生根率达100%,平均根数2.5条;移苗成活率达100%。

旱生花卉鹅掌柴·月季不定根水培诱导试验

[目的]探索旱生花卉不定根的诱导方法。[方法]以1年生鹅掌柴、月季枝条为材料,以植株生根率、生长状况为指标,以清水为对照,利用植物普遍存在的生态适应性,采用先进的人工环境模拟控制技术,进行水培试验,探讨不同浓度的4种植物生长调节剂对旱生花卉不定根诱导的影响。[结果]各生长调节剂对插穗不定根的诱导均具有促进作用,其中生根灵对鹅掌柴效果较为显著,生根率比对照组和IBA、NAA各浓度激素处理的插穗高30%。而且价格比IBA、NAA便宜,从生产角度上来看,生根灵为首选;5mg/LIBA、NAA和10mg/LIBA对月季的促进作用高于其他激素浓度处理,生根率比对照高出30%。[结论]水培诱导旱生花卉不定根比土培具有明显优势。花卉水培不定根的诱导时间是影响插穗成活和生根的关键因素。

甘薯组织培养中不定根的高频诱导和优化

在甘薯组织培养中获得了不定根的高频诱导,诱导率达95.2%。用正交试验法对影响不定根分化的各种因子进行了研究和优化。结果表明,甘薯不定根诱导和分化的最佳培养基为MS+1.0mg/lNAA;不定根生长的最适培养基为MS+0.1mg/lNAA;茎段是甘薯不定根诱导及生长的最适外植体;外植体类型对不定根分化的影响最大,其次是NAA,而BA影响最弱。

始于不定根诱导的沙氏鹿茸草离体培养和植株再生

1植物名称沙氏鹿茸草（Monochasma savatieri Franch.ex Maxim.）,又名绵毛鹿茸草。2材料类别（1）生长在浙江省磐安县新渥镇东侧山坡上的野生绿色植株,2006年10月带土采掘后植于塑料杯中运回贵阳待用（由贵州宏奇药业有限公司提供）。（2）同年6月采自上述地点的种子（提供者同上）。

蒙古黄芪不定根的诱导

以蒙古黄芪无菌芽的下胚轴、无菌苗的根、茎、叶为外植体,分别接种在不同激素组合的Murashige和Skoog(MS)培养基中,在(25±1)℃条件下暗培养,蔗糖浓度为3.0%,pH值为5.8,琼脂的浓度为0.8%。对蒙古黄芪(Astragalus membranaceusBge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao)进行愈伤组织诱导。结果表明最适合蒙古黄芪下胚轴愈伤组织诱导的激素组合为MS+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)2.0 ml/L+6-苄氨基嘌呤(6-BA)0.5 ml/L和MS+α-奈乙酸(NAA)3.0 mg/L+6-BA0.5 ml/L;最适合作为蒙古黄芪愈伤组织诱导的外植体为叶,最佳培养基为MS+NAA 3.0 mg/L。综合考虑愈伤组织质地以及后期试验目的,最终确定蒙古黄芪愈伤组织诱导和增殖培养基为MS+NAA 3.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L。黄芪愈伤组织生长曲线呈现S型,在d9进入快速增长期,最佳继代时间是在24 d左右。

菜豆不定根的诱导

采用植物生长调节剂萘乙酸处理菜豆芽下胚轴,并用培养皿和滤纸夹层方法培养,诱导下胚轴产生不定根,可较好克服水培法处理实验材料腐烂的问题。

马占相思和大叶相思优树组培不定根诱导研究

以10年生马占相思和大叶相思优良单株为研究对象,其茎段外植体通过初代培养和增殖培养后获得增殖芽,研究了生长素种类及浓度、基本培养基类型、蔗糖浓度和活性炭浓度对增殖芽生根的影响,分析了不同类型增殖培养基多次继代诱导的增殖芽对生根的影响。结果表明:马占相思的最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖,大叶相思最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L IBA+0.25 mg/L NAA+3%蔗糖,二者的生根率均能达到93%以上。以马占相思和大叶相思增殖芽为生根材料,含低浓度细胞分裂素且添加活性炭的增殖培养基诱导时,两种相思的生根率均能达到90%以上,生根率随着继代次数的增加保持稳定,生根苗生长健壮。

党参丛生芽诱导及不定根培养体系研究

目的:建立及优化党参丛生芽及不定根培养体系。方法:以山西壶关党参组培苗为实验材料,以MS为基础培养基,研究6-BA对党参丛生芽及NAA对党参不定根诱导的影响,探索党参丛生芽及不定根生长的最佳条件。结果:在固体MS培养基中6-BA浓度为0.3 mg/L时丛生芽诱导率最高,为90%,但丛生芽矮化现象严重;6-BA浓度为0.5 mg/L时,诱导率虽较低仅为62.5%,但丛生芽粗壮,生长良好;液体1/2 MS培养基中NAA浓度为0.5mg/L时,不定根生物量显著增加;采用液体培养基进行不定根继代培养,培养周期为24 d,较固体培养基的培养周期(49 d)缩短了1/2。结论:建立了党参丛生芽及不定根快繁体系,为党参的良种繁育及生物活性物质合成、分子调控机理研究奠定基础。

温度对马尾松组培单芽不定根发生的影响

马尾松(Pinus massoniana)组织培养生根困难,该研究在严格控制光温条件的光照培养中,以马尾松无性系组培继代芽为材料,分析了在不同温度处理下马尾松组培单芽生根率、生根时间、根系条数和移栽成活率等生根能力指标以及生根解剖构造的变化。所有数据均采用SPSS 19.0统计分析软件,进行单因素分析(ANOVA)的显著性检验及最小显著性差异法(LSD)的多重比较。结果表明:在25℃最适温度培养下,马尾松组培生根效果较佳,移栽成活率最高,可达98.1%。低温处理下,生根时间显著延长,根系条数减少,生根率偏低;高温处理下,根茎愈伤组织明显,移栽成活率显著降低。从生根解剖构造来看,马尾松不定根主要由维管形成层细胞分化而成。与25℃适温处理相比较,在20℃较低温处理下,细胞分裂活动缓慢,不定根原始体诱发较少;而在30℃较高温处理下,细胞活动旺盛,但髓射线与维管组织细胞染色颜色加深、排列紧密,将诱发的不定根原基细胞团区隔成带状或片状。该研究结果探讨了培养环境温度对马尾松组培单芽生根能力的影响,为马尾松组培苗生产提供了参考。

诱导樱桃试管苗生根的研究

以甜樱桃和酸樱桃杂种“S2”的试管苗为试材 ,研究了IBA、蔗糖及暗培养时间对不定根产生的影响。结果表明 ,暗培养对不定根产生有显著影响 ,IBA和蔗糖的影响作用较小 ,获得高生根率的最优组合为1 /2MS +IBA 0 .1mg/L +蔗糖 3 %培养基、暗培养 7天。

北柴胡耐湿害株系HB-1601的生根诱导组织培养条件研究

[目的]探索北柴胡耐湿害新品系HB-1601的不定根诱导适宜培养条件。[方法]以HB-1601无菌苗为外植体对不同种类和不同浓度的生长素进行生根诱导实验,通过柴胡不定根数、根长、鲜重、叶绿素含量及根干重5项数据指标确定适宜HB-1601生根的条件。[结果]诱导HB-1601不定根最佳培养基为MS+IBA 0.5mg/L,诱导不定根数达到10根,根长最长达到3.63cm。[结论]研究结果对HB-1601的种质保存及北柴胡抗逆性改良具有重要意义。

大丽花‘费罗加’组织培养和块根诱导

以大丽花品种‘费罗加’为试材,茎段作为外植体,探讨了不同基本培养基、激素组合、蔗糖浓度、光照时间等对诱导愈伤组织、不定芽、不定根和块根的影响,以期缩短块根生产周期。结果表明:初代培养在MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂6 g·L-1上愈伤组织诱导率为54.9%,褐化率为44.8%,污染率为26.6%,成活率达69.6%。继代增殖培养最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.01 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂6 g·L-1,增殖系数为7.8,愈伤组织诱导率22.9%。生根最佳培养基为WPM+NAA 1.0 mg·L-1+6-BA 0.1 mg·L-1+蔗糖60 g·L-1+琼脂6 g·L-1+炭粉2 g·L-1,最适宜光照时间为6 h,生根率为98.5%,根系密集健壮。块根诱导最适材料为带根瓶苗,出现初步形态的块根,形成块根率达56.8%。

雷公藤不定根培养体系的建立及中试放大研究

以MS为基本培养基,进行雷公藤不定根的诱导研究时发现,不论是以雷公藤幼叶还是以幼叶诱导的愈伤组织为外植体,在添加1.0 mg·L-1IBA的培养基上均可以诱导出不定根并建立良好的不定根培养体系;以雷公藤愈伤组织建立的悬浮细胞在添加2.0~4.0 mg·L-1NAA时,也可以形成不定根并建立稳定的不定根培养体系,雷公藤不定根的3个培养体系中雷公藤甲素含量均超过自然生长的根皮中的含量,其中AR3不定根中雷公藤甲素含量最高,为根皮的5.3倍。在使用5 L发酵罐进行中试放大培养时,与250 m L摇瓶培养相比,每升培养基不定根增长量、次生代谢产物含量差异不大,这为通过组织培养生产雷公藤次生代谢产物奠定了基础。

湿地松组培苗生根的影响因子

以湿地松组培嫩梢为外植体诱导不定根。研究结果表明,基本培养基及其中附加生长素的种类及浓度对不定根的分化有较大影响,改良1/2GD是湿地松嫩梢生根的较优基本培养基,其次为1/2DCR,1/2MS;嫩梢接种在改良1/2GD+IBA2.0的培养基中培养30d后,其不定根诱导率最高达51.6%。在改良1/2GD+NAA0.05的培养基中不定根诱导率最高达59.3%,NAA与IBA组合较单独使用具有更佳的生根效果,嫩梢接种1/2GD+NAA0.05+IBA1.0上30d后最高生根率达81.3%,但NAA与6-BA或活性炭(AC)组合均不利于湿地松嫩梢的生根。生根小植株转移至无激素的改良1/2GD培养基中,不定根伸长较快。在适宜的温湿度条件下,再生植株移栽成活率达85%。

川麦冬组织培养技术研究

以川麦冬根的嫩基部为外植体,研究了消毒时间、培养基、生长调节物质对川麦冬无菌苗的诱导、增殖及不定根的诱导的影响。结果表明,用75%酒精20s+0.1%HgCl210min消毒效果最好。在以MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L的培养基中进行的不定芽诱导生长和继代培养,诱导和增殖效果较好,丛生芽的一代诱导率为80%,二代以后丛生芽诱导率为100%。在继代至第四代时丛生芽的平均数目达到6.24个,完全可以满足快速繁殖的需要。麦冬组培苗不定根的最适培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L,生根率达100%,田间移栽2周后成活率可达到100%,且幼苗生长良好。

抗松材线虫病赤松组培苗的生根与移栽研究

以抗病性较好但不易生根的抗松材线虫病赤松无性系为试验材料,对影响组培苗生根移栽的因素进行了研究。结果表明:将待生根的丛生芽置于17℃条件下处理5 d后,不定根诱导率最高达93%;在生根培养基中添加30～50 mg/L香蕉汁有利于不定根诱导;对移栽基质进行高温灭菌或0.2%高锰酸钾消毒2次的处理均可有效提高组培苗移栽成活率;喷施营养液对组培苗的长势具有促进作用。

石海椒组织培养研究

以石海椒愈伤组织为试材,研究不同培养基和激素配比对不定芽分化和不定根诱导的影响,以建立石海椒快繁体系。结果表明:石海椒愈伤组织不定芽分化最佳配方为MS+1.5mg/L6-BA+0.3mg/L NAA,不定根诱导最佳培养条件为1/2MS+1.5mg/L NAA+0.5mg/L VB1。