梨多倍体化对离体叶片不定梢再生能力的影响

以源于二倍体梨品种Fertility(Pyrus communis L.)通过秋水仙碱离体诱变体细胞染色体加倍获得的不同同源多倍体无性系为试材,以离体叶片为外植体,观察研究了不同倍性无性系叶片的不定梢再生能力。结果表明,多倍体的不定梢再生率显著低于二倍体的再生率。不同多倍体无性系的不定梢再生能力也存在显著差异。三倍体无性系3x-3和四倍体无性系4x-4不能诱导产生不定梢。表明器官发生能力下降或植物细胞全能性的丧失与细胞染色体多倍体化有关。

γ-射线对苹果和梨离体叶片不定梢再生及芽生长的影响

用γ-射线照射苹果和梨的无根无菌苗,研究其对叶片不定梢再生及芽生长的影响。对照射最敏感的器官是叶片,其次是未萌发的侧芽,第三是正在生长的顶芽。叶片不定梢再生的半致死剂量为20-30 Gy,苹果侧芽萌发的半致死剂量为30 Gy,梨为30 Gy以上。照射剂量在10-30 Gy时,抑制顶芽的伸长生长,但不引起致死或其他不良生长症状。

金花梨子叶不定梢再生研究

以金花梨花后65 d的成熟胚子叶为外植体,研究了不同培养基、BA浓度、暗培养条件及AgNO3浓度对子叶不定梢再生的影响.结果表明:梨成熟胚子叶在适宜培养条件下能发生大量不定梢,培养15 d为初发生期,25～30d为高峰期,40 d后结束发生.暗培养预处理有利于提高子叶再生频率、再生不定梢数和不定梢质量.在NN69+BA3.0mg/L+NAA 0.2mg/L培养基上,暗培养3周后转光下培养获得了85.2%不定梢再生率,平均再生不定梢44个.培养基中加入0～4mg/LAgNO3对梨子叶不定梢再生有促进作用,但浓度大于4mg/L时抑制子叶不定梢再生.

培养条件对酸枣叶片不定梢再生率的影响

以酸枣无菌苗叶片为外植体,选用基本培养基NN69和wPM.外源激素包括TDZ、IAA、IBA和NAA.暗培养时间为2、3、4周.采用正交实验设计方法,研究了基本培养基、外源激素及暗培养时间对叶片不定梢再生的影响.结果表明在附加TDZ 1～3 mg/L的WPM和NN69上都可诱导不定梢再生,但WPM比NN69更有效.暗培养时间对不定梢再生也有影响,暗培养3周比2、4周更有利于提高叶片的不定梢再生率.在附加TDZ 1 mg/L、IAA0.1 mg/L的WPM培养基上,暗培养3周后转到光下培养.获得的不定梢再生率达87.5%.

影响梨叶片高频不定梢再生因素的研究

研究了基因型、基本培养基、植物生长物质、叶片接种方法及光、暗培养条件等因素对梨叶片不定梢再生的影响。基因型对叶片不定梢再生影响最大,安久和丰水的再生率最高,可达100%,其次为鸭梨,为80%,黄金梨的再生率最低,仅为27.3%。不同基因型其获得最高不定梢再生率所需附加的植物生长物质不同。TDZ比BA更有利于鸭梨叶片的高频不定梢再生,而BA更有利于西洋梨和砂梨叶片的不定梢再生。暗培养3周后再转光下培养比直接光培养有利于不定梢的再生,叶片接种方法对再生率无明显影响。

大鸭梨叶片高频率不定梢再生诱导研究

以白梨 (PyrusbretschneideriRehd )鸭梨的芽变大鸭梨试管苗为试材 ,试管苗幼叶为外植体 ,研究了培养基的基本元素组成、外源激素及接种叶片的放置方向对叶片不定梢再生的影响。结果表明 ,培养基的基本元素组成是影响叶片能否获得再生不定梢成功的关键因素 ;外源激素直接影响叶片的不定梢再生频率 ;叶片的接种放置方向影响单位叶片的再生不定梢数。诱导大鸭梨叶片获得高频率不定梢再生的最佳培养基为基本培养基NN6 9附加激素TDZ和IBA。叶片远轴面接触培养基 ,平均单位叶片产生的不定梢数量最多。

西洋梨品种‘红考密斯’的组织培养及离体叶片不定梢再生

以西洋梨(Pyrus communis L.)品种‘红考密斯’新生长的半木质化嫩枝茎段为外植体,促使腋芽萌发获得无菌试管苗;以试管苗为试材,研究基本培养基、外源植物生长物质对增殖和生根的影响;以试管苗的离体叶片为外植体,研究植物生长物质的种类和浓度对叶片不定梢再生的影响。结果表明,试管苗适宜的增殖培养基为MS+0. 5 mg·L^(-1)6-BA+0. 1 mg·L^(-1)TDZ+0. 3 mg·L^(-1)IBA;适宜的壮苗培养基为MS+0. 1mg·L^(-1)TDZ+0. 3 mg·L^(-1)IBA;适宜的生根培养基为1/2MS(仅MS大量元素减半)+0. 3 mg·L^(-1)NAA+20 g·L^(-1)蔗糖,生根率为82. 2%,平均单株根数为3. 3条;叶片不定梢再生的最佳培养基为:NN69+2 mg·L^(-1)6-BA+0. 3 mg·L^(-1)IBA,不定梢再生率为76. 8%,平均每叶不定梢数为1. 2个。

西洋梨“丰产”叶片不定梢再生

以西洋梨品种“丰产”试管苗叶片为外植体，研究了不同培养基及乙烯抑制剂ＡｇＮＯ３ 对叶片不定梢再生的影响。在ＮＮ６９ ＋ ＢＡ５ｍｇ／Ｌ＋ ＩＡＡ０ ．３ｍｇ／Ｌ 培养基上，暗培养３ 周转光下培养，获得了最高不定梢再生率，达１００ ％ 。ＡｇＮＯ３ 对叶片不定梢再生也表现出促进作用。在不加ＡｇＮＯ３ 的ＭＳ＋ ＢＡ５ ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０ ．３ ｍｇ／Ｌ 培养基上暗培养３ 周，再生率仅为２０ ％ ，附加ＡｇＮＯ３ ０ ．１ｍｇ／Ｌ，再生率可达６０ ％

苹果砧木新品种鲁砧1号离体叶片高效不定植株再生

【目的】建立苹果半矮化砧木新品种鲁砧1号离体叶片高效不定梢再生技术体系,为该砧木快繁和遗传改良奠定技术基础。【方法】以鲁砧1号无菌苗离体叶片为外植体,研究碳源、细胞分裂素种类和质量浓度对叶片不定梢再生的影响;以不定梢为试材,研究基本培养基、蔗糖质量浓度对不定梢生根的影响。【结果】MS添加较低质量浓度(0.6 mg·L^(-1))细胞分裂素(TDZ)时,碳源物质为D-山梨醇的叶片不定梢再生率显著高于蔗糖;其他激素处理下,D-山梨醇和蔗糖之间叶片不定梢再生率无显著差异。两种碳源上的平均每叶不定芽(梢)数,都表现较高细胞分裂素质量浓度处理高于或显著高于较低细胞分裂素质量浓度处理,以TDZ质量浓度为1 mg·L^(-1)时产生的不定芽数最多,平均每叶不定芽数为3.8~4个。在不定芽诱导培养基上,6-苄基氨基嘌呤(BA)比TDZ更容易诱导产生直接伸长生长的不定梢。不定梢生根率和平均每株生根条数,两种基本培养基及两个蔗糖质量浓度之间都表现差异不显著,但以1/4MS基本培养基和20 g·L^(-1)蔗糖组合的生根培养基上获得的生根率和单株生根条数最高,分别超过93%和5.8。【结论】鲁砧1号离体叶片容易诱导再生不定芽和不定梢生根,诱导叶片不定芽再生最佳培养基为MS添加1 mg·L^(-1)TDZ、0.3 mg·L^(-1)IBA和30 g·L^(-1)蔗糖,最佳生根培养基为1/4MS添加0.3~0.5 mg·L^(-1)IBA和20 g·L^(-1)蔗糖。

苹果矮化砧木‘JM7’的组织培养及其离体叶片不定梢再生

以苹果优良矮化砧木‘JM7’(Malus prunifolia×M.pumila‘Malling 9’)为试材,研究了基本培养基对试管苗增殖生长的影响、蔗糖浓度对试管苗生根的影响及基本培养基、细胞分裂素种类和浓度对离体叶片不定梢再生的影响。结果表明:基本培养基MS比QL显著提高增殖梢数,但QL比MS更有利于获得健壮生长的绿苗。3%蔗糖浓度比2%的不定根发生速度快。叶片不定梢再生最适宜的基本培养基是QL。在QL培养基上,6-BA和TDZ对离体叶片不定梢再生率的影响无显著差异,但6-BA诱导产生的不定芽在不定梢诱导培养基上可直接伸长生长形成不定梢,而TDZ诱导产生的不定芽需转移到不加TDZ而加低浓度6-BA的培养基上形成伸长生长的不定梢。

苹果抗寒半矮化砧木‘54-118’的组织培养及其离体叶片不定梢再生

本文以苹果抗寒半矮化砧木‘54-118’为试材,研究基本培养基及植物生长调节物质对无菌苗增殖和生根的影响;并以无菌苗离体叶片为外植体,研究基本培养基、植物生长调节物质及碳源对叶片不定梢再生的影响。结果表明,无菌苗的适宜增殖培养基为QL+1 mg·L^(-1)6-BA+0.3 mg·L^(-1)IBA+30 g·L^(-1)蔗糖,增殖系数为5.1。适宜的生根培养基为1/4MS+0.5 mg·L^(-1)IBA+20 g·L^(-1)蔗糖,生根率为77.9%,平均每株根数为3.5。离体叶片不定梢再生的最佳培养基为改良MS(NM)+3 mg·L^(-1)6-BA+0.3 mg·L^(-1)IBA+30 g·L^(-1)D-山梨醇,再生率为85.6%。

红色西洋梨品种‘红星’的组织培养及离体叶片不定梢再生

以优良红色西洋梨(Pyrus communis)品种‘红星’为试材,研究了基本培养基和外源植物生长调节物质对试管苗增殖和生根的影响,并以离体材料叶片为外植体,研究了植物生长调节物质和碳源对叶片不定梢再生能力的影响。结果表明,细胞分裂素6-苄氨基嘌呤(BA)可促进试管苗腋芽的增殖,但常伴有绿梢顶端肥胖或顶端枯死等生理异常现象;噻苯隆(TDZ)可促进无菌苗的伸长生长及叶片的伸展增大,绿苗生长健壮,但增殖率低。BA和TDZ组合使用可诱导无菌苗既有良好的增殖生长又有较好的状苗生长。最佳继代增殖培养基为添加0.5mg·L^-1 BA、0.2 mg·L^-1 TDZ和0.2 mg·L^-1吲哚丁酸(IBA)的QL培养基。相比蔗糖, d-山梨醇做碳源能显著提高离体叶片不定梢再生率。TDZ和BA对不定梢再生的影响因碳源的不同表现出差异,碳源为蔗糖时,不定梢再生率在不同TDZ和BA浓度下均无显著差异;碳源为d-山梨醇时,不定梢再生率在不同TDZ浓度下明显高于不同BA浓度下,但在不同TDZ浓度之间或不同BA浓度之间无显著差异。相比1/4MS无机盐基本培养基,1/2MS无机盐基本培养基能显著提高试管苗生根率;在添加0.3 mg·L^-1萘乙酸(NAA)的1/2MS无机盐培养基上生根率最高,达91.0%。

甜樱桃品种吉列玛叶片再生不定梢的研究

在基本培养基NN69或WPM上附加BA和低浓度的NAA ,IAA ,IBA作培养基 ,诱导甜樱桃品种吉列玛试管苗的叶片产生了不定梢。以WPM附加BA 3mg/L和IAA 0 .3mg/L的处理 ,不定梢再生率最高 ,为 33.3%。

李胚轴和子叶再生不定梢观察

以红美丽李成熟果实的胚为试材，研究了胚轴和子叶的不定梢再生。结果表明：在附加ＢＡ５ｍｇ／Ｌ，ＩＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ的ＬＳ培养基上，胚轴和子叶的再生率分别是２２．２％、４６．２％。附加ＡｇＮＯ３４ｍｇ／Ｌ对子叶的不定梢再生有促进作用。

乙烯抑制剂AgNO_3对梨叶片再生不定梢的促进作用

该实验研究了乙烯抑制剂ＡｇＮＯ３对梨叶片再生不定梢的促进作用。ＡｇＮＯ３浓度在０．１～８ｍｇ／Ｌ范围内对叶片再生不定梢都有明显的促进作用。添加ＡｇＮＯ３２ｍｇ／Ｌ的培养基上，叶片不定梢再生率最高，达７５％，而不加ＡｇＮＯ３的对照培养基上，再生率仅为１５％。

苹果抗寒矮化砧木‘BP-176’的组织培养及其叶片不定梢诱导

【目的】建立苹果抗寒矮化砧木‘BP-176’的组织培养快繁技术体系及其离体叶片不定梢再生技术体系,为工厂化生产优质苗木及利用生物技术手段改良品种奠定技术基础。【方法】以苹果抗寒矮化砧木‘BP-176’的半木质化新梢为试材,建立初代无菌试管苗。以试管苗为试材,研究了基本培养基、植物生长调节物质对试管苗继代生长及生根的影响。以离体叶片为外植体,研究了细胞分裂素种类和浓度及碳源对不定梢再生的影响。【结果】半木质化新梢在芽启动培养基上的腋芽萌发率达85%以上。在基本培养基MS和QL上,试管苗的增殖没有显著差异,但生长表现不同,QL培养基上的增殖苗表现出该品种田间生长的红色特征。当细胞分裂素为BA时,蔗糖比D-山梨醇易诱导出叶片不定梢;当细胞分裂素为TDZ并且浓度较高时,D-山梨醇比蔗糖易诱导出叶片不定梢。以添加3 mg·L-1BA和30 g·L-1蔗糖处理获得的不定梢再生率最高,为71.6%。生根诱导,基本培养基1/2MS比1/4MS有效,生长素IBA比NAA有利于提高生根率。【结论】苹果砧木‘BP-176’试管苗适宜的继代增殖培养基为添加1.0 mg·L-1BA和0.1 mg·L-1IBA的QL培养基;最佳不定梢再生培养基为:NM+3 mg·L-1BA+0.3 mg·L-1IBA+30 g·L-1蔗糖;最佳生根培养基为1/2MS+0.3 mg·L-1IBA+20 g·L-1蔗糖,最高生根率为69.8%。

几种抗生素对梨叶片愈伤组织和不定梢诱导的影响

研究了氨苄青霉素(Amp)、羧苄青霉素(Carb)、头孢霉素(Cef)和卡那霉素(Km)对梨叶片愈伤组织和不定梢诱导的影响。结果表明,Amp对巴梨叶片分化影响较小,当浓度达500mg/L时,其出愈率和不定梢再生率分别为96.48%和56.17%,与对照差异不显著;Cef浓度在50-300mg/L时对巴梨和身不知叶片再生均无显著影响,只有当Cef浓度高于400mg/L时,巴梨的不定梢再生率才受到显著抑制;巴梨和身不知叶片对Carb的反应不相同,低浓度(≤200mg/L)的Carb对巴梨的出愈率和不定梢再生率影响较小,却显著抑制身不知的不定梢再生率,高浓度(≥300mg/L)的Carb不仅极显著抑制巴梨和身不知的出愈率,而且完全抑制了2者的不定梢再生;Km浓度大于10mg/L时,明显抑制愈伤组织的生长,且随着浓度的增加,死亡率逐渐增大,当Km浓度达100mg/L时,巴梨和身不知叶片死亡率达100%和96.30%。

抗生素对‘考密斯’梨叶片不定梢诱导的影响

研究了氨苄青霉素(Amp)、羧苄青霉素(Carb)、头孢霉素(Cef)、卡那霉素(Km)和新霉素(Nm)对‘考密斯’叶片愈伤组织和不定梢诱导的影响。结果表明,Cef对‘考密斯’叶片分化影响较小,当浓度达500mg/L时,出愈率和不定梢再生率分别为93.33%的51.48%,与对照差异不显著;Amp浓度在50～100mg/L时,对‘考密斯’叶片再生无显著影响,只有当Amp浓度高于100mg/L时,‘考密斯’的不定梢再生率才受到显著抑制;‘考密斯’对Carb的发应较为敏感,其浓度为50mg/L时,出愈率和不定梢再生率已降低到85.56%和25.00%,与对照差异极显著,浓度为200mg/L时,完全抑制了‘考密斯‘的不定梢再生;Km浓度为10mg/L时,已完全抑制了不定梢的再生,当Km浓度增加到60mg/L时,‘考密斯’叶片全部白化死亡;Nm浓度为10mg/L时,极显著的抑制了‘考密斯’叶片再生,当浓度达40mg/L时,已无不定梢发生。

梨成熟胚子叶不定梢诱导

获得了白梨（PyrusbretschneideriRehd．）中鸭梨和砂梨中晚三吉梨成熟胚子叶的再生不定梢。2个品种达到最高不定梢再生率的培养基都是1／4MS大量元素，附加生长调节剂5mg·L-1BA和0．5mg·L-1NAA，再生率分别达到93．3％和100％。

金花梨叶片不定梢诱导研究

以金花梨 (PyruspyrifoliaNak .cv .Jinhua)试管苗叶片为试材获得了再生不定梢。在培养基NN69+BA 3mg/L +IAA 0 .3mg/L +蔗糖 3 %上 ,先暗培养 3周后转光下培养 ,不定梢再生率最高 ,达 1 0 0 %。