反复不明原因自然流产孕妇外周血单核细胞中lncRNASNHG5、KLF4表达及临床意义

目的:探讨反复不明原因自然流产(URSA)孕妇外周血单核细胞中长链非编码RNA(lncRNA)SNHG5、KLF4表达水平及临床意义。方法:选取2018年4月-2019年12月本院收治的URSA孕妇40例为流产组,正常妊娠要求人工流产孕妇40例为早孕组,健康非孕妇女40例为非孕组。测定外周血单核细胞中lncRNA SNHG5、KLF4表达水平,血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素4(IL-4)、IL-12水平。采用多因素logistic回归模型分析URSA发生相关因素。结果:非孕组、早孕组、流产组外周血单核细胞中lncRNA SNHG5 mRNA、KLF4 mRNA和蛋白表达,血清TNF-α、IL-4、IL-12水平均依次升高(均P<0.05)。外周血单核细胞中lncRNA SNHG5 mRNA、KLF4 mRNA和蛋白表达与血清TNF-α、IL-4、IL-12均呈正相关(均P<0.05)。异常高水平lncRNA SNHG5 mRNA、KLF4 mRNA和蛋白均为URSA发生的相关因素(P<0.05)。结论:URSA孕妇外周血单核细胞中lncRNA SNHG5、KLF4表达水平异常升高,且是URSA发生的影响因素。

氧化应激在早期不明原因自然流产中的作用

氧化应激是指活性氧生成和抗氧化防御系统之间的不平衡状态[1]。这种不平衡状态可在活性氧的生成超过抗氧化防御系统时或者在抗氧化剂活性降低或减少时发生。目前有研究表明妊娠是胎盘线粒体活性增强及活性氧增多所产生的氧化应激状态[2]。正常情况下,胚胎自身可以应付氧化应激[3]。

不明原因自然流产患者蜕膜巨噬细胞抗原递呈功能的改变及意义

目的:探讨不明原因自然流产患者(USA)蜕膜巨噬细胞抗原递呈功能的改变及意义。方法:选取有卡介苗接种史的30例USA患者作为研究对象,以孕龄相当的正常妊娠人工流产妇女作为对照。通过淋巴细胞体外抗原特异性转化实验,分别以不同浓度的实验组及对照组蜕膜巨噬细胞作为抗原递呈细胞,相应的外周血T细胞作为反应细胞,以PPD、USA组(U-Ag)及对照组滋养细胞抗原(N-Ag)作为抗原,MTT法检测T细胞增殖的情况,以刺激指数(SI)反应T细胞增殖强度。流式细胞仪检测HLA-DR在巨噬细胞上的表达。结果:USA组在PPD、U-Ag和N-Ag这3种抗原分别诱导下,T细胞的刺激指数(SI)在巨噬细胞8×105/ml和16×105/ml浓度时均明显高于2×105/ml和4×105/ml,差异有显著性(P<0.05);对照组在这3种抗原诱导下,T细胞的SI在各浓度巨噬细胞组间比较,差异无显著性(P>0.05);两组在相同抗原和相同细胞浓度下,当巨噬细胞浓度为2×105/ml时,T细胞的SI比较差异无显著性(P>0.05)外,其余各浓度USA组的T细胞SI均高于对照组,差异均有显著性(P<0.05)。HLA-DR在USA组蜕膜巨噬细胞上的表达为87.5±25.6%,而对照组为84.2±30.3%,两者比较差异无显著性(P>0.05)。结论:USA组的蜕膜巨噬细胞具有抗原递呈功能,滋养细胞抗原通过蜕膜局部的巨噬细胞递呈给母体免疫系统使T细胞激活,这很有可能是导致USA的重要机制。

CD147在不明原因自然流产患者绒毛组织的表达

目的:分析CD147在不明原因自然流产患者绒毛组织中的表达水平,并探讨其生物学功能。方法:收集人早孕期正常和不明原因自然流产妇女的绒毛组织,采用免疫组织化学、RT-PCR和Western blotting法检测CD147的表达,比较CD147在正常早孕与不明原因自然流产妇女绒毛组织的表达差异。体外分离纯化获得正常人早孕期滋养细胞,采用免疫细胞化学验证CD147在滋养细胞的表达,引入抗CD147中和性抗体处理人滋养细胞,采用Brd U增殖实验和Transwell侵袭实验分析滋养细胞增殖和侵袭能力的变化。结果:正常早孕期绒毛组织和滋养细胞高表达CD147,不明原因自然流产绒毛组织CD147的mRNA和蛋白表达水平均低于正常早孕期绒毛组织。抗CD147中和性抗体处理原代人滋养细胞后,滋养细胞的增殖能力未发生明显变化,侵袭能力下降。结论:人绒毛组织CD147的异常低表达可能与不明原因早期妊娠失败相关,CD147通过调控滋养细胞的侵袭能力参与正常妊娠的维持。

反复不明原因自然流产患者血清、绒毛和蜕膜中miR-129-5p表达水平及临床意义

目的:探讨反复不明原因自然流产患者血清、绒毛和蜕膜中miR-129-5p表达水平及临床意义.方法:选择2018年10月-2021年9月本院收治的148例反复不明原因自然流产患者为流产组,正常早期妊娠人工流产者80例为对照组,检测两组血清、绒毛和蜕膜中miR-129-5p表达水平并分析与血清孕酮(P)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)、白介素2(IL-2)、血管内皮生长因子(VEGF)水平的相关性,及对反复不明原因自然流产患者的诊断价值.结果:流产组血清(0.33±0.04)、绒毛(0.30±0.03)和蜕膜(0.28±0.02)miR-129-5p表达水平均低于对照组(1.12±0.11、1.35±0.13、1.13±0.12),血清P、hCG、VEGF水平均低于对照组,IL-2水平高于对照组(均P<0.05).Pearson相关分析显示,流产组血清、绒毛和蜕膜miR-129-5p表达水平与血清P、hCG、VEGF均呈正相关,与IL-2水平呈负相关(均P<0.05).受试者工作特征曲线分析显示,血清、绒毛、蜕膜miR-129-5p诊断反复不明原因自然流产的曲线下面积分别为0.820、0.912、0.856,截断值分别为0.60、0.83、0.72,敏感度分别为74.8%、81.0%、71.6%,特异度分别为81.2%、89.6%、91.7%.结论:反复不明原因自然流产患者血清、绒毛和蜕膜中miR-129-5p表达水平均异常降低,且与炎症反应、抑制血管生成指标相关,对诊断反复不明原因自然流产有一定临床价值.

反复不明原因自然流产孕妇外周血单个核细胞中lncRNANEAT1和TLR2表达

目的:探讨反复不明原因自然流产孕妇外周血单个核细胞(PBMC)中lncRNA NEAT1和TLR2表达。方法:回顾性收集2016年5月-2018年3月本院就诊的孕妇临床资料,选取97例不明原因自然流产患者(自然流产组)、50例正常妊娠要求人工流产孕妇(正常早孕组)、54例健康非孕妇女(健康非孕组),检测外周血PBMC中lncRNA NEAT1和TLR2mRNA表达水平,TLR2蛋白表达,血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平。Pearson相关性分析反复自然流产患者lncRNA NEAT1与TLR2 mRNA、TNF-α、IL-1β、IL-6相关性,ROC曲线分析lncRNA NEAT1与TLR2mRNA对反复自然流产的诊断价值,logisitic回归分析反复不明原因自然流产的影响因素。结果:与健康非孕组和正常早孕组比,自然流产组患者外周血PBMC中lncRNA NEAT1、TLR2mRNA和蛋白、血清TNF-α(19.73±4.47pg/ml、9.31±2.57pg/ml、10.24±3.15pg/ml)、IL-1β(7.51±1.01pg/ml、2.39±0.54pg/ml、2.58±0.59pg/ml)和IL-6表达水平(25.39±5.47pg/ml、12.15±3.54pg/ml、13.52±3.76pg/ml)均升高(P<0.05)。反复自然流产患者lncRNA NEAT1与TLR2mRNA、TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平均呈正相关(P<0.05)。lncRNA NEAT1和TLR2均是反复不明原因自然流产的影响因素,联合诊断时灵敏度(93.6%)、特异度(90.4%)和曲线下面积(0.906)最高(P<0.05)。结论:lncRNA NEAT1可能通过调控TLR2信号通路下游相关炎性因子表达参与反复不明原因自然流产的发生,可能成为潜在的治疗靶点。

反复不明原因自然流产孕妇外周血CD4^+CD25^+ T细胞比例的变化

目的:研究反复不明原因自然流产孕妇外周血中CD4+CD25+T细胞的比例变化,探讨CD4+CD25+T细胞在妊娠免疫中的作用。方法:应用流式细胞技术检测孕妇外周血CD4+CD25+T细胞的比例变化。结果:反复不明原因自然流产孕妇外周血中CD4+CD25+T细胞比例为(1.53±0.95)%,低于同孕期正常妊娠组的(6.56±0.44)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CD4+CD25+T细胞在反复不明原因自然流产的发生发展中发挥一定作用。

硒与不明原因自然流产的关系

目的:探讨缺硒与不明原因自然流产之间的关系。方法:检测329例不明原因自然流产者与437例正常孕妇的血硒,并对其结果进行比较、分析。结果:不明原因自然流产者与正常孕妇的血硒含量分别为(69.4±43.6)μg/L、(104.4±40.1)μg/L,经统计学处理得u值为5.507,两组之间血硒含量有显著性差异。结论:孕妇缺硒是引起不明原因自然流产的原因之一。孕妇适当补硒,有利于避免不明原因自然流产的发生。

低密度中性粒细胞及其表面主要免疫表型分子与不明原因早期自然流产的相关性研究

目的:探讨低密度中性粒细胞(LDGs)比例及其表面主要免疫表型分子与不明原因早期自然流产的相关性。方法:选取2022-09-2024-07江西省妇幼保健院医院收治的不明原因早期自然流产患者59例,其中不明原因早期首发自然流产患者30例(设为UESA组),不明原因早期复发性自然流产患者29例(设为URSA组)。同时选取同期、同年龄段的正常早孕女性30例作为对照组(设为HC组)。运用流式细胞术对各研究对象外周血单个核细胞(PBMCs)中LDGs的比例及其表面主要免疫表型分子(包括氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)和CD16的表达水平进行检测,此外,对外周血T淋巴细胞亚群、调节性T细胞(Treg)的水平也一并检测,采用Logistic回归分析LDGs比例及其表面主要免疫表型分子与孕妇早期不明原因自然流产的相关性。结果:与HC组比较,不明原因早期自然流产患者外周血LDGs的水平显著升高,且URSA组又显著高于UESA组(P<0.05)。URSA组患者和UESA组患者LOX-1和CD16表达水平明显高于HC组(P<0.05)。UESE组患者PD-L1水平高于HC组(P<0.05)。组间对比分析结果显示,URSA组总T淋巴细胞计数、CD8^(+)T细胞低于HC组(P均<0.05),CD4^(+)T/CD8^(+)T细胞高于HC组。URSA组Treg细胞和总T淋巴细胞计数低于UESA组和HC组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示LDGs为不明原因早期自然流产的独立危险因素。结论:LDGs细胞可能通过影响母体免疫状态参与并维持了不明原因早期自然流产的反复发生,是不明原因早期自然流产的独立危险因素。

不明原因反复胚胎种植失败和不明原因反复自然流产的临床治疗策略比较

胚胎种植失败和流产均属于妊娠丢失的范畴,但它们发生在不同的生理阶段。部分患者出现反复胚胎种植失败(RIF)或反复自然流产(RSA),常规检查未能发现明确病因,临床上难以对这些情况进行针对性的诊治,经验性用药往往缺乏循证医学依据。本文就不明原因反复胚胎种植失败(URIF)和不明原因反复自然流产(URSA)两者的诊断及不同临床治疗策略之间疗效的区别等内容展开综述。

精液质量、精子DNA碎片指数与不明原因性自然流产风险的相关性分析

目的分析精液质量、精子DNA碎片指数与不明原因性自然流产的相关性。方法选取2020年1月至2021年12月在我院门诊就诊的配偶患有不明原因自然流产的男性101例作为病例组,选取同时期在我院进行健康体检的正常生育的男性80例作为对照组,比较两组研究对象的一般资料(包括年龄、吸烟、饮酒)、精液质量相关指标(包括:精子浓度、精子活率、精子畸形率)、精子DNA碎片指数,采用相关性分析法分析病例组中女方流产次数与年龄、吸烟、饮酒、精子浓度、精子活率、精子畸形率、精子DNA碎片指数的相关性。结果病例组男性的年龄显著高于对照组(P<0.05),病例组男性的吸烟率、饮酒率显著高于对照组(P<0.05),两组研究对象的精子浓度、精子活率、精子畸形率差异不显著(P>0.05),病例组男性的精子DNA碎片指数更高(P<0.05),相关性分析结果为:病例组中女性自然流产次数与男性年龄、吸烟量、饮酒量、精子DNA碎片指数呈正相关(P<0.05),病例组中女性自然流产次数与男性精子浓度、精子活率、精子畸形率无相关性(P>0.05)。结论男性年龄、吸烟、饮酒、精子DNA碎片指数是导致不明原因性自然流产的风险因素,精液常规质量指标与不明原因性自然流产之间无相关性。

不明原因复发性自然流产患者炎症及免疫平衡变化的临床意义

目的:探讨不明原因复发性自然流产(URSA)患者炎症及免疫平衡变化的临床意义。方法:回顾性分析2019年8月至2022年9月我院收治的86例URSA患者(URSA组)、同期产检的59例健康孕妇(早孕组)及56例健康体检未孕妇女(未孕组)一般临床资料,分析不同组别间炎症及免疫平衡指标差异,探讨炎症及免疫平衡指标在URSA患者中的表达情况。结果:URSA组患者流产史次数高于早孕组、未孕组(P<0.05),但早孕组、未孕组流产史次数比较差异无统计学意义(P>0.05)。URSA组患者白细胞介素(IL)-6、IL-17、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平均高于早孕组、未孕组,IL-10水平低于早孕组、未孕组(P<0.05),但早孕组、未孕组IL-6、IL-17、TNF-α、hs-CRP、IL-10水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。URSA组患者T辅助细胞(Th17)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)水平均高于早孕组、未孕组,调节性T细胞(Treg)水平低于早孕组、未孕组(P<0.05),但早孕组、未孕组Th17、IgA、IgG、IgM、Treg水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。URSA组患者IL-6、IL-17、TNF-α、hs-CRP水平与Th17、IgA、IgG、IgM水平呈正相关,与Treg指标呈负相关(P<0.05);URSA组患者IL-10水平与Th17、IgA、IgG、IgM水平呈负相关,与Treg指标呈正相关(P<0.05)。结论:炎症因子的异常表达及免疫失衡可能参与URSA的发生。

丙种球蛋白被动免疫治疗原因不明性反复自然流产研究

目的:探讨静脉点滴丙种球蛋白治疗原因不明性反复自然流产(URSA)的疗效及治疗前后机体封闭抗体、T细胞亚群、胞内Th1/Th2细胞因子及外周血NK细胞含量的变化,以期初步阐明其治疗机理。方法:URSA患者治疗前均检测封闭抗体,对于封闭抗体阴性的患者给予每2周静脉点滴10g国产丙种球蛋白,连续4次治疗后再次检测封闭抗体。怀孕后改为每3周同剂量加强免疫一次,至怀孕26～30周。应用FACSCalibur流式细胞仪分析25例患者治疗前后外周血T淋巴细胞亚群、胞内Th1/Th2细胞因子及NK细胞的变化,并选择20例正常妊娠并选择人工流产者作为对照组。结果:25例URSA经4次被动免疫治疗后有19例封闭抗体转阳性。21例能正常怀孕并成功分娩,4例流产,成功率84%。治疗后CD3+T细胞百分比略升高但无显著性差异;CD8+T细胞百分比有明显升高;而CD4+T细胞百分比明显下降;CD4+/CD8+比率也明显下降。胞内Th2型细胞因子IL-10含量显著性升高;胞内Th1型细胞因子IFN-γ和外周血NK细胞含量明显下降。结论:静脉点滴丙种球蛋白治疗URSA具有较好疗效。治疗后机体免疫保护作用明显增强,可能是丙种球蛋白促进妊娠发展的原因之一。

原因不明反复自然流产患者外周血TLR2、TLR4表达及CD4^+CD25^+Treg细胞的变化

目的探讨原因不明反复自然流产(URSA)患者外周血TLR2、TLR4的表达及CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞变化的关系。方法用实时荧光定量PCR及流式细胞术检测35例URSA患者、24例妊娠孕妇外周血单个核细胞(PBMC)中TLR2、TLR4mRNA及其蛋白质的表达;流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞的比例,并分析表达TLR2、TLR4蛋白与CD4+CD25+Treg细胞的相关性。结果 URSA组PBMC中TLR2、TLR4 mRNA分别为0.52±0.04、3.26±1.37;表达TLR2、TLR4蛋白的PBMC比例分别为(32.36±4.18)%、(41.29±3.67)%;与妊娠对照组相比,URSA组外周血TLR4 mRNA及表达TLR4蛋白的PBMC比例差异显著(t分别为19.84和21.85,P均<0.05);URSA组CD4+CD25+Treg细胞的比例为(2.75±0.62)%,显著低于妊娠对照组的(5.17±0.65)%,差异有统计学意义(t=48.40,P<0.01);URSA患者表达TLR4蛋白的PBMC与CD4+CD25+Treg细胞的比例降低呈显著相关(r=0.724,P<0.05)。结论 URSA患者外周血中低表达的CD4+CD25+Treg细胞、高表达的TLR4可能参与了URSA的发生。

芳香烃受体与原因不明自然流产关系的初步研究

目的初步探讨早孕蜕膜和绒毛组织中芳香烃受体(AhR)的表达及其与原因不明自然流产的关系。方法采用Real-Time PCR和Western blotting技术检测34例原因不明自然流产患者(流产组)蜕膜和绒毛组织中AhR的mRNA和蛋白表达水平;以38例正常孕早期妇女作为对照(对照组)。结果对照组和流产组绒毛组织AhR mRNA和蛋白表达水平均高于蜕膜组织(P<0.01,P<0.05);流产组蜕膜组织中AhR mRNA和蛋白表达均高于对照组(P<0.01,P<0.05);流产组绒毛组织中AhRmRNA和蛋白表达均高于对照组(P<0.01,P<0.05)。结论早孕绒毛组织中AhR mRNA和蛋白的表达水平均明显高于蜕膜组织,其表达上调可能与原因不明自然流产的发生和发展有关。

不明原因反复自然流产患者免疫治疗前后外周血CD4^+CD25^+CD127^(low)T细胞百分率的分析

目的探讨不明原因反复自然流产(URSA)患者外周血调节性T细胞(Treg)中CD4^+CD25^+CD127^(low)T细胞的表达情况及经配偶淋巴细胞免疫治疗后的妊娠结局改变,判断其作为流产指标的可能性。方法用流式细胞术检测73例URSA患者治疗前、76例正常早孕者(正常早孕组)及69名正常未孕体检者(正常未孕组)外周血中CD4^+CD25^+CD127^(low)T细胞百分率,分析经配偶淋巴细胞免疫方法治疗2~3个疗程后的51例URSA患者外周血CD4^+CD25^+CD127^(low)T细胞百分率的变化情况。结果 URSA组治疗前外周血CD4^+CD25^+CD127^(low)T细胞百分率(2.73%±0.56%)明显低于正常未孕组(2.93%±0.60%)和正常早孕组(4.36%±1.07%)(P<0.05)。51例URSA患者治疗后外周血CD4^+CD25^+CD127^(low)T细胞百分率(3.72%±1.15%)明显高于治疗前(P<0.05),其中42例患者治疗后妊娠结局较好,有9例失败。结论 URSA患者外周血CD4^+CD25^+CD127^(low)T细胞表达明显降低,其有可能作为判断URSA的指标之一。体外配偶淋巴细胞免疫治疗与妊娠结局改善有关。

免疫治疗不明原因反复自然流产患者群体反应抗体、TGF-β和nTreg表达变化的研究

目的:探讨不明原因反复自然流产(URSA)患者经免疫治疗后其血清群体反应抗体(PRA)、转化生长因子β(TGF-β)和外周血单个核细胞(PBMC)中转录调节因子3(FOXP3)阳性的天然调节性T细胞(n Treg,CD4+CD25+FOXP3+)表达的变化及临床意义。方法:应用酶联免疫及流式分析方法,分别检测正常妊娠组及URSA患者免疫治疗后未孕组和妊娠组血清PRA、TGF-β含量及外周血单个核细胞n Treg表达率。结果:RSA患者经免疫治疗后未孕组血清PRA、TGF-β中位数较免疫治疗后妊娠组中位数降低(27.5%、107.7 pg/L vs 68.75%、189.9 pg/L,P<0.01);未孕组n Treg表达率中位数也较妊娠组低(5.05%vs 8.05%,P<0.01)。结论:URSA患者经免疫治疗后其血清PRA的产生及TGF-β含量增加和n Treg的诱导性升高是RSA患者经免疫治疗后成功妊娠的重要因素,PRA、TGF-β及n Treg的检测对RSA患者的免疫治疗方案的确定和疗效判断有重要的临床意义。

探讨 BA，EMAb 及 ACA与不明原因复发性自然流产的相关性

目的：探讨封闭抗体（BA），抗子宫磷脂抗体（EMAb）及抗心磷脂抗体（ACA）联合检测与不明原因复发性自然流产（UPSA）的相关性。方法选取不明原因复发性自然流产144例，偶发性自然流产166例和正常体检孕妇188例，检测其 BA，EMAb 和 ACA 并行统计学分析。结果 URSA 组分别与偶发性自然流产组及对照组相比较，BA 阴性率（74.31％，25.30％和50.53％），EMAb 阳性率（35.42％，7.23％和6.91％）和 ACA 阳性率（26.39％，5.42％和5.32％）差异均有统计学意义（χ2＝19.344～74.180，P 值均＜0.05；χ2＝37.837～42.586，P 值均＜0.05；χ2＝26.355～29.270，P 值均＜0.05）。URSA 组的 BA，EMAb 和 ACA 联合检测阳性率（84.72％）明显高于偶发性自然流产组及对照组（χ2＝35.532～93.076，P 值均＜0.05）。结论BA 的缺乏，EMAb 和 ACA 的产生与不明原因复发性自然流产存在密切的关系，联合检测对辅助诊断 URSA 及其预后判断具有重要的临床指导意义。