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猪大肠杆菌不耐热肠毒素基因的PCR检测
被引量:
1
1
作者
陈芳
池仕红
+5 位作者
陈汉林
杨林
刘为民
张浩吉
王政富
马春全
《广东畜牧兽医科技》
2007年第6期32-33,共2页
以产肠毒素性大肠埃希氏菌(ETEC)不耐热肠毒素(LT)保守序列为靶序列,设计合成了一对可扩增336 bp目的片段的引物,建立了检测ETEC不耐热肠毒素(LT)基因的PCR方法。该方法对987p+、鼠伤寒沙门氏杆菌、猪肺疫巴氏杆菌和链球菌的检测结果均...
以产肠毒素性大肠埃希氏菌(ETEC)不耐热肠毒素(LT)保守序列为靶序列,设计合成了一对可扩增336 bp目的片段的引物,建立了检测ETEC不耐热肠毒素(LT)基因的PCR方法。该方法对987p+、鼠伤寒沙门氏杆菌、猪肺疫巴氏杆菌和链球菌的检测结果均为阴性。对15株分离自腹泻仔猪的待检菌株进行检测,有3株LT基因阳性。结果表明:该方法的特异性和敏感性较高,可用于ETEC的临床快速诊断和流行病学调查。
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关键词
产
肠毒素
性大肠埃希氏菌(ETEC)
不耐热肠毒素基因
(LT)
PCR
下载PDF
职称材料
肠毒性大肠埃希菌肠毒素LTa基因特异性EMA-PCR检测方法的建立
2
作者
赵素君
曹冶
+6 位作者
谢晶
李江凌
王秋实
叶勇刚
罗丹丹
叶健强
廖党金
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2012年第11期8-11,共4页
由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,为避免因样品中含有死细菌而造成的假阳性检测结果,本研究根据肠毒性大肠埃希菌(ETEC)不耐热肠毒素LTa基因设计特异性引物,利用叠氮溴乙锭(EMA)处理菌液,沸水浴法制备细菌裂解液,优化PC...
由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,为避免因样品中含有死细菌而造成的假阳性检测结果,本研究根据肠毒性大肠埃希菌(ETEC)不耐热肠毒素LTa基因设计特异性引物,利用叠氮溴乙锭(EMA)处理菌液,沸水浴法制备细菌裂解液,优化PCR条件,建立一种检测肠毒性大肠埃希菌活菌肠毒素基因的EMA-PCR方法。肠毒性大肠埃希菌CVCC196、CVCC197、CVCC200均能扩增出大小为438bp的特异性条带,而其他对照菌株未扩增出条带。经EMA处理,除了完全死菌组外,含有10mL/L~1 000mL/L活菌的混合悬液均可扩增出目的片段。因此,成功建立了一种快速、有效的检测肠毒性大肠埃希菌活菌肠毒素基因的EMA-PCR方法,该方法较传统PCR大大提高了检测的准确性,灵敏度可达19cfu/mL。
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关键词
肠毒性大肠埃希菌
不耐热肠毒素基因
叠氮溴乙锭-聚合酶链反应
检测
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职称材料
猪大肠埃希菌肠毒素基因的多重PCR检测
被引量:
1
3
作者
陈芳
王丙云
+3 位作者
杨林
黄良宗
刘为民
马春全
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期122-124,共3页
以产肠毒素性大肠埃希菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)耐热肠毒素(STa、STb)基因和不耐热肠毒素(LT)基因保守序列为靶序列,设计合成了3对可扩增目的片段为182、108和336 bp的引物,建立了检测ETEC耐热肠毒素基因和不耐热肠毒...
以产肠毒素性大肠埃希菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)耐热肠毒素(STa、STb)基因和不耐热肠毒素(LT)基因保守序列为靶序列,设计合成了3对可扩增目的片段为182、108和336 bp的引物,建立了检测ETEC耐热肠毒素基因和不耐热肠毒素基因的多重PCR方法.该方法对肠出血性大肠埃希菌(EHEC)EDL933、猪链球菌Streptcoccus、鼠伤寒沙门氏杆菌Salmonella typhimrium和猪肺疫巴氏杆菌Pasteurella pneumotropic的检测结果均为阴性,并且能检测到102cfu/mL稀释度的标准菌.对11株分离自广东佛山地区腹泻仔猪的待检菌株进行检测,结果为:含STa基因的菌株为5株;含STb基因为2株;含LT基因为3株,其中2株同时具有STb和LT基因.结果表明:该方法的特异性和敏感性较高,可用于ETEC的临床快速诊断和流行病学调查.
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关键词
产
肠毒素
性大肠埃希菌(ETEC)
耐热
肠毒素
(STa
STb)
基因
不耐热
肠毒素
(LT)
基因
多重PCR
猪
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职称材料
LAMP技术检测食品中产肠毒素大肠埃希氏菌
被引量:
4
4
作者
孟兆祥
马晓燕
+1 位作者
张会彦
张伟
《食品科技》
CAS
北大核心
2011年第9期340-342,346,共4页
产肠毒素大肠埃希氏菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是一种重要的引起人畜共患病的致病菌,能引起水样便及酸中毒,建立快速、准确的检测方法对预防和控制产肠毒素大肠埃希氏菌的感染具有重要意义。基于ETEC不耐热肠毒素LT基...
产肠毒素大肠埃希氏菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是一种重要的引起人畜共患病的致病菌,能引起水样便及酸中毒,建立快速、准确的检测方法对预防和控制产肠毒素大肠埃希氏菌的感染具有重要意义。基于ETEC不耐热肠毒素LT基因序列,设计LAMP引物检测产肠毒素大肠埃希氏菌。结果表明:LAMP检测产肠毒素大肠埃希氏菌的检出限为32.9cfu/mL,人工污染生猪肉的检出限为55cfu/g。LAMP将可以成为替代PCR的核酸扩增新技术,为快速检测产肠毒素大肠埃希氏菌构建了一个技术平台。
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关键词
环介导等温扩增
产
肠毒素
大肠埃希氏菌(ETEC)
不耐热
肠毒素
(LT)
基因
原文传递
题名
猪大肠杆菌不耐热肠毒素基因的PCR检测
被引量:
1
1
作者
陈芳
池仕红
陈汉林
杨林
刘为民
张浩吉
王政富
马春全
机构
佛山科技学院生科院动医系
熊集农业技术服务中心
出处
《广东畜牧兽医科技》
2007年第6期32-33,共2页
基金
广东省科技厅项目(2005B20201015)
佛山市科技发展专项资金(03020011)
佛山科技学院生科院校级重点课题
文摘
以产肠毒素性大肠埃希氏菌(ETEC)不耐热肠毒素(LT)保守序列为靶序列,设计合成了一对可扩增336 bp目的片段的引物,建立了检测ETEC不耐热肠毒素(LT)基因的PCR方法。该方法对987p+、鼠伤寒沙门氏杆菌、猪肺疫巴氏杆菌和链球菌的检测结果均为阴性。对15株分离自腹泻仔猪的待检菌株进行检测,有3株LT基因阳性。结果表明:该方法的特异性和敏感性较高,可用于ETEC的临床快速诊断和流行病学调查。
关键词
产
肠毒素
性大肠埃希氏菌(ETEC)
不耐热肠毒素基因
(LT)
PCR
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
肠毒性大肠埃希菌肠毒素LTa基因特异性EMA-PCR检测方法的建立
2
作者
赵素君
曹冶
谢晶
李江凌
王秋实
叶勇刚
罗丹丹
叶健强
廖党金
机构
四川省畜牧科学研究院
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2012年第11期8-11,共4页
基金
国家科技支撑计划项目(2006BAD04A17
2012BAD12B03)
四川省科技支撑计划项目(2010NZ0106)
文摘
由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,为避免因样品中含有死细菌而造成的假阳性检测结果,本研究根据肠毒性大肠埃希菌(ETEC)不耐热肠毒素LTa基因设计特异性引物,利用叠氮溴乙锭(EMA)处理菌液,沸水浴法制备细菌裂解液,优化PCR条件,建立一种检测肠毒性大肠埃希菌活菌肠毒素基因的EMA-PCR方法。肠毒性大肠埃希菌CVCC196、CVCC197、CVCC200均能扩增出大小为438bp的特异性条带,而其他对照菌株未扩增出条带。经EMA处理,除了完全死菌组外,含有10mL/L~1 000mL/L活菌的混合悬液均可扩增出目的片段。因此,成功建立了一种快速、有效的检测肠毒性大肠埃希菌活菌肠毒素基因的EMA-PCR方法,该方法较传统PCR大大提高了检测的准确性,灵敏度可达19cfu/mL。
关键词
肠毒性大肠埃希菌
不耐热肠毒素基因
叠氮溴乙锭-聚合酶链反应
检测
Keywords
ETEC
LTa gene
EMA-PCR
detection
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
猪大肠埃希菌肠毒素基因的多重PCR检测
被引量:
1
3
作者
陈芳
王丙云
杨林
黄良宗
刘为民
马春全
机构
佛山科学技术学院动物医学系
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期122-124,共3页
基金
广东省科技计划项目(2005B20201015)
佛山市科技发展专项资金(03020011)
佛山科学技术学院重点课题
文摘
以产肠毒素性大肠埃希菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)耐热肠毒素(STa、STb)基因和不耐热肠毒素(LT)基因保守序列为靶序列,设计合成了3对可扩增目的片段为182、108和336 bp的引物,建立了检测ETEC耐热肠毒素基因和不耐热肠毒素基因的多重PCR方法.该方法对肠出血性大肠埃希菌(EHEC)EDL933、猪链球菌Streptcoccus、鼠伤寒沙门氏杆菌Salmonella typhimrium和猪肺疫巴氏杆菌Pasteurella pneumotropic的检测结果均为阴性,并且能检测到102cfu/mL稀释度的标准菌.对11株分离自广东佛山地区腹泻仔猪的待检菌株进行检测,结果为:含STa基因的菌株为5株;含STb基因为2株;含LT基因为3株,其中2株同时具有STb和LT基因.结果表明:该方法的特异性和敏感性较高,可用于ETEC的临床快速诊断和流行病学调查.
关键词
产
肠毒素
性大肠埃希菌(ETEC)
耐热
肠毒素
(STa
STb)
基因
不耐热
肠毒素
(LT)
基因
多重PCR
猪
Keywords
enterotoxigenic Escherichia coli ( ETEC )
heat-stable enterotoxins ( STa and STb) genes
heat-labile enterotoxin (LT) gene
multiplex-PCR
swine
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
LAMP技术检测食品中产肠毒素大肠埃希氏菌
被引量:
4
4
作者
孟兆祥
马晓燕
张会彦
张伟
机构
河北农业大学食品科技学院
出处
《食品科技》
CAS
北大核心
2011年第9期340-342,346,共4页
基金
河北省自然科学基金项目(C2008000216)
文摘
产肠毒素大肠埃希氏菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是一种重要的引起人畜共患病的致病菌,能引起水样便及酸中毒,建立快速、准确的检测方法对预防和控制产肠毒素大肠埃希氏菌的感染具有重要意义。基于ETEC不耐热肠毒素LT基因序列,设计LAMP引物检测产肠毒素大肠埃希氏菌。结果表明:LAMP检测产肠毒素大肠埃希氏菌的检出限为32.9cfu/mL,人工污染生猪肉的检出限为55cfu/g。LAMP将可以成为替代PCR的核酸扩增新技术,为快速检测产肠毒素大肠埃希氏菌构建了一个技术平台。
关键词
环介导等温扩增
产
肠毒素
大肠埃希氏菌(ETEC)
不耐热
肠毒素
(LT)
基因
Keywords
loop-mediated isothermal amplification
Enterotoxigenic Escherichia coli
heat-labile enterotoxin(LT) gene
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪大肠杆菌不耐热肠毒素基因的PCR检测
陈芳
池仕红
陈汉林
杨林
刘为民
张浩吉
王政富
马春全
《广东畜牧兽医科技》
2007
1
下载PDF
职称材料
2
肠毒性大肠埃希菌肠毒素LTa基因特异性EMA-PCR检测方法的建立
赵素君
曹冶
谢晶
李江凌
王秋实
叶勇刚
罗丹丹
叶健强
廖党金
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2012
0
下载PDF
职称材料
3
猪大肠埃希菌肠毒素基因的多重PCR检测
陈芳
王丙云
杨林
黄良宗
刘为民
马春全
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
下载PDF
职称材料
4
LAMP技术检测食品中产肠毒素大肠埃希氏菌
孟兆祥
马晓燕
张会彦
张伟
《食品科技》
CAS
北大核心
2011
4
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