声带癌前病变组织中基质金属蛋白酶抑制剂-1、果蝇母亲DDP同源物4表达水平与术后复发和恶变的相关性研究

目的探讨声带癌前病变组织中基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinases 1,TIMP-1)、果蝇母亲DDP同源物4(drosophila mothers against DDP homolog 4,Smad4)表达水平与术后复发和恶变的相关性。方法回顾性分析2018年8月~2021年8月郑州大学第一附属医院收治的162例声带癌前病变患者的临床和病理资料,收集手术切除癌前病变组织(癌前病变组)及病变旁正常黏膜组织(对照组),采用免疫组织化学法检测组织中TIMP-1、Smad4表达情况。分析TIMP-1、Smad4阳性率与临床病理特征的关系,并采用Kaplan-Meier法和Cox回归分析法分析其对术后复发和恶变的影响。结果与对照组正常黏膜组织比较,癌前病变组的TIMP-1阳性率较高,Smad4阳性率较低(P<0.05)。不同病变范围、是否累及前连合、不同程度上皮异常增生患者的TIMP-1、Smad4阳性率存在差异(P<0.05)。术后随访时间24~60个月,中位随访时间36个月,随访期间失访患者6例,随访率96.30%(156/162),随访期间术后复发35例(21.60%),术后恶变16例(9.88%);Kaplan-Meier生存分析显示,TIMP-1阳性患者术后复发率和恶变率高于TIMP-1阴性患者(P<0.05);Smad4阴性患者术后复发率和恶变率高于Smad4阳性患者(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,喉咽反流、病变范围>1/2、中/重度异型增生、TIMP-1阳性、Smad4阴性是复发的独立危险因素(P<0.05),年龄>60岁、累及前连合、TIMP-1阳性、Smad4阴性是恶变的独立危险因素(P<0.05)。结论声带癌前病变组织中TIMP-1高表达、Smad4低表达,且TIMP-1阳性、Smad4阴性表达者术后复发和恶变风险较高。

白花蛇舌草醇提物对矽肺大鼠肺组织TGF-β1、Smad、MMP-2表达的影响

目的探究白花蛇舌草醇提物对矽肺大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、母亲DPP同源物(Smad)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响。方法以气管内滴注二氧化硅混悬液的方法构建矽肺大鼠模型60只,随机分为模型组、白花蛇舌草醇提物低(1.5 g/kg)、中(3 g/kg)、高(6 g/kg)剂量组、吡非尼酮(100 mg/kg)组,每组12只,另选取12只大鼠气管内滴注等剂量生理盐水作为对照组。采用药物干预后,检测大鼠肺功能,比较其指标:每分通气量(MV)、呼气峰流值(PEF)、吸气阻力(Ri);检测各组大鼠双肺质量及其脏器系数;免疫组织化学染色检测各组大鼠肺组织淋巴细胞浸润情况,比较各组淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)阳性细胞比例;天狼星红染色检测各组大鼠肺组织胶原沉积及纤维化变性情况,比较胶原容积分数(CVF);采用试剂盒检测大鼠血清白细胞介素-18(IL-18)、环氧化酶-2(COX-2)、TGF-β1水平;蛋白免疫印迹法检测大鼠肺组织TGF-β1、Smad、MMP-2蛋白表达情况。结果与对照组相比,模型组大鼠MV、PEF显著降低,Ri、双肺质量及其脏器系数、肺组织LFA-1阳性细胞比例、CVF、血清IL-18、COX-2及TGF-β1水平、肺组织TGF-β1、Smad及MMP-2蛋白表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,白花蛇舌草醇提物低、中、高剂量组和吡非尼酮组大鼠MV、PEF均升高,Ri、双肺质量及其脏器系数、肺组织LFA-1阳性细胞比例、CVF、血清IL-18、COX-2及TGF-β1水平、肺组织TGF-β1、Smad及MMP-2蛋白表达水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05),且白花蛇舌草醇提物随剂量升高而作用增强并呈剂量依赖性(P<0.05)。白花蛇舌草醇提物高剂量组与吡非尼酮组相比,大鼠各指标水平无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论白花蛇舌草醇提物可抑制肺组织TGF-β1、Smad、MMP-2表达,降低矽肺大鼠炎性因子水平,减轻肺组织炎症反应损伤和纤维化变性,修复肺功能。

过表达MiR-381调控LRH-1-MMP-2通路抑制卵巢癌细胞转移的机制

目的探讨人卵巢癌组织中miR-381的表达及对卵巢癌细胞迁移和侵袭的影响。方法聚合酶链反应(PCR)检测卵巢癌组织中miR-381表达水平;慢病毒转染卵巢癌SKVO3细胞构建miR-381稳定过表达细胞株;通过划痕愈合试验、Transwell侵袭小室检测细胞迁移及侵袭情况,通过裸鼠尾静脉注射肿瘤细胞建立肿瘤肺转移模型,检测过表达miR-381对肿瘤细胞体内转移的影响;PCR及Western印迹法检测miR-381潜在靶点肝受体同源物(LRH)-1的表达变化。结果 miR-381在卵巢癌组织中表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05);上调miR-381的表达能够抑制卵巢癌SKVO3细胞体外迁移(P<0.05)及侵袭能力(P<0.05);在体内,上调miR-381的表达对SKVO3细胞裸鼠肺转移瘤的形成具有抑制效应(P<0.05);机制上,过表达miR-381后显著抑制LRH-1在SKVO3细胞内的表达水平(P<0.05),并抑制了基质金属蛋白酶(MMP)-2表达水平(P<0.05)。结论 miR-381在卵巢细胞癌中表达降低,上调miR-381能够通过抑制LRH-1的表达进而抑制MMP-2表达而发挥抗肿瘤转移作用。

SHH、Gli-1、MMP-2在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨胃癌组织中刺猬信号通路(Hedgehog signaling pathway,Hh)中的音猬因子(Sonic hedgehog,Shh)和胶质瘤相关癌基因同源物-1(Glioma-associated oncogene homolog-1,Gli-1)与金属基质蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达和临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测40例人胃癌组织、人胃息肉组织和40例正常胃黏膜组织中音猬因子、胶质瘤相关癌基因同源物-1、金属基质蛋白酶-2蛋白的表达。结果胃癌组织中音猬因子、胶质瘤相关癌基因同源物-1、金属基质蛋白酶-2的阳性表达率分别为62.5%、67.5%、72.5%,高于胃息肉组织(阳性表达率分别为27.5%、37.5%、32.5%)和正常胃黏膜组织(阳性表达率分别为22.5%、17.5%、12.5%)(P<0.05);以上三者的表达与患者性别、年龄、组织学类型无关(P>0.05);而与分化程度、浸润深度、淋巴结转移相关(P<0.05);音猬因子、胶质瘤相关癌基因同源物-1、金属基质蛋白酶-2表达呈正相关。结论刺猬信号通路可能通过某些机制可上调金属基质蛋白酶-2的表达,从而增强胃癌的侵袭性。联合检测胃癌组织中音猬因子、胶质瘤相关癌基因同源物-1、金属基质蛋白酶-2的表达水平在一定程度上可以作为胃癌预后的客观参考指标。

孕早期血清MMP-1、PTEN检测预测妊娠期糖尿病孕妇孕中晚期骨质疏松症的价值研究

目的探究孕早期血清基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)、第10号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin hmmlogydeleted on ten,PTEN)检测预测妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)孕妇孕中晚期骨质疏松症(osteoporosis,OP)的价值。方法回顾性收集2019年9月至2023年2月临沂市人民医院收治的218例GDM孕妇的临床资料,将其纳入GDM组;另选取同期体检的健康妊娠女性98例作为对照组。比较两组年龄、身体质量指数(body mass index,BMI)、血糖相关指标及血清MMP-1、PTEN水平。并根据孕中晚期骨质疏松症发生情况将GDM组患者分为OP组和非OP组。应用Logistic回归分析探究GDM孕妇孕中晚期OP发生的影响因素;绘制ROC曲线分析血清MMP-1、PTEN水平对GDM孕妇孕中晚期发生骨质疏松的预测价值。结果GDM组BMI、空腹血糖、糖化血红蛋白及血清MMP-1、PTEN水平均高于对照组,BUA、SOS、SI等骨密度测定结果低于对照组(t=6.18、12.68、9.91、11.42、7.70、5.63、5.76、9.84,P均<0.05)。218例GDM孕妇中有29例发生OP,189例患者未出现OP。两组空腹血糖、糖化血红蛋白、血钙、血镁、血磷等资料比较,差异无统计学意义(统计值:0.96、0.86、1.35、1.06、0.49,P>0.05)。Logistic回归分析结果显示,年龄、MMP-1、PTEN水平异常升高是GDM孕妇孕中晚期发生OP的独立危险因素[OR(95%CI)=1.260(1.103~1.440)、1.075(1.031~1.120)、1.055(1.023~1.089),P均<0.05]。ROC曲线显示,MMP-1、PTEN指标预测GDM孕妇孕中晚期发生OP的AUC分别为0.824、0.777。二者联合预测GDM孕妇孕中晚期发生OP的AUC为0.933,特异度及敏感度分别为83.04%、93.48%,均高于单独检测。结论孕早期血清MMP-1、PTEN检测在GDM孕妇孕中晚期OP的预测中发挥潜在优势,密切监测二者水平变化,为OP高风险患者的临床诊治提供新思路。

长链非编码RNA-UBC1对膀胱癌细胞生物学功能的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)-尿路上皮癌相关基因1(UBC1)对膀胱癌细胞增殖、凋亡和侵袭转移的作用及其可能的机制。方法采用siRNA干扰技术沉默膀胱癌细胞系T24细胞的lncRNA-UBC1,设置阴性对照组,CCK-8检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,Western blot印迹法检测与转移相关的基质金属蛋白2(MMP-2)与zeste基因增强子同源2(EZH2)。结果 lncRNA-UBC1在T24细胞株中表达明显高于人胚胎膀胱组织来源细胞;与阴性对照组和空白对照组相比,沉默UBC1后,UBC1沉默组膀胱癌细胞增殖速率慢于对照组,UBC1沉默组膀胱癌细胞凋亡细胞比例高于阴性对照组[(18.72±7.79)%vs.(13.09±5.66)%,P<0.05],UBC1沉默组细胞侵袭能力受到抑制,T24细胞MMP-2与EZH2表达降低。结论沉默lncRNA-UBC1可抑制T24细胞增殖、凋亡及侵袭能力,其机制可能是通过MMP-2与EZH2途径。

肝癌细胞外泌体诱导单核细胞代谢重编程的机制研究

目的探讨缺氧环境下肝癌细胞外泌体诱导单核细胞代谢重编程的潜在机制。方法缺氧环境下,正常肝细胞LO2外泌体或肝癌细胞HepG2外泌体处理,检测单核细胞代谢关键指标葡萄糖摄取和乳酸产生水平。miRNA-seq检测miRNA表达水平并筛选以鉴定诱导单核细胞代谢重编程的关键miRNA。通过HumanTargetScan在线分析预测以及遗传学筛选鉴定miRNA的靶标。结果缺氧环境下,肝癌细胞外泌体单核细胞葡萄糖摄取和乳酸产生(分别为34856±2944、174±16)高于正常肝细胞外泌体(分别为23454±2194、135±12)(P<0.05)。过表达miR-34b-3p、OMA1及敲低PHB2能够促进单核细胞葡萄糖摄取和乳酸产生(分别为22287±2207与36399±3123;121±10与158±17;22972±2330与32099±2017;121±11与161±16;24020±2156与37901±3084;110±10与151±16,均P<0.05);敲低miR-34b-3p、OMA1及过表达PHB2能够抑制单核细胞葡萄糖摄取和乳酸产生(分别为22287±2207与17541±1716;121±10与92±9;23827±2184与18891±1623;113±10与84±8;22469±2361与18801±1595;132±11与88±8,均P<0.05)。过表达miR-34b-3p能够降低PHB2的mRNA和蛋白表达水平(分别为0.22±0.03与0.05±0.01,P<0.05);敲低miR-34b-3p能够提升PHB2的mRNA和蛋白表达水平(分别为0.22±0.03与0.49±0.05,P<0.05)。敲低PHB2及过表达miR-34b-3p后,发现OMA1的表达水平上升(P<0.05);过表达PHB2及敲低miR-34b-3p后,发现OMA1的表达水平下降(P<0.05)。结论肝癌细胞外泌体中miR-34b-3p通过PHB2/OMA1轴促进单核细胞葡萄糖摄取和乳酸产生,诱导了单核细胞代谢重编程。

SUMO蛋白酶与肿瘤关系的研究进展

SUMO（small ubiquitin-related modifier protein）是一种类泛素蛋白,它通过与底物蛋白的共价连接,调节靶蛋白的定位与功能。SUMO修饰的逆反应即去SUMO化,是由一组SUMO特异性蛋白酶（SUMO-specific proteases,SENPs）家族来完成的[1]。哺乳动物细胞中的SENPs家族共有6个成员,根据其序列同源性、细胞内定位和底物特异性可分为3组。其中SENP1和SENP2为第一组,第二组为SENP3和SENP5,第三组为SENP6和SENP7。有研究表明,

卵巢癌组织中EZH2蛋白表达与临床病理特征及预后的关系

[目的]检测果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在卵巢癌组织中表达情况及与临床病理特征预后的关系,分析EZH2检测的临床意义。[方法 ]采用免疫组织化学法(SP法)检测85例卵巢癌、30例卵巢良性肿瘤、30例正常卵巢组织中EZH2、Cyclin D1及MMP-9蛋白表达情况。[结果]EZH2蛋白在卵巢癌组织中的阳性表达率为72.9%(62/85),较卵巢良性肿瘤组20.0%(6/30)和对照组10.0%(3/30)显著增高(P<0.05);Cyclin D1蛋白在卵巢癌组织中的阳性表达率为60.0%(51/85),较卵巢良性肿瘤组13.3%(4/30)和对照组10.0%(3/30)显著增高(P<0.05);MMP-9蛋白在卵巢癌组织中的阳性表达率为90.6%(77/85),较卵巢良性肿瘤组23.3%(7/30)和对照组6.7%(2/30)显著增高(P<0.05)。EZH2、Cyclin D1及MMP-9蛋白表达与卵巢癌分化程度、FIGO临床分期、淋巴结转移、脉管瘤栓有明显相关性(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明,卵巢癌EZH2蛋白表达阳性患者的生存期短于阴性表达者(P<0.05),经相关性分析发现,EZH2与Cyclin D1及MMP-9蛋白表达呈正相关(r=0.314,0.298;均P<0.01)。[结论]EZH2参与卵巢癌的发生发展,可能与Cyclin D1、MMP-9协同促进卵巢癌的恶性增殖与转移,是卵巢癌预后的危险因素。

电磁场干预对异位骨化大鼠模型的抗异位骨化效应及机制探讨

目的观察电磁场干预对异位骨化(HO)大鼠模型的抗异位骨化效应并探讨相关作用机制。方法采用随机数字表法将72只雄性SD大鼠分为对照组、模型组及观察组。采用钳夹、切断跟腱等方式将模型组、观察组大鼠制成HO动物模型,对照组术中仅暴露跟腱组织,未给予钳夹、切断处理。观察组大鼠于制模后每天给予2次50 Hz、1 mT正弦交变电磁场暴露干预,每次持续2 h。于术后3 d、14 d、1个月及3个月时每组各取6只大鼠,提取跟腱组织进行大体、组织学及免疫组化染色观察,并采用Western blot或RT-PCR方法检测标本中母亲DPP同源物7(Smad7)、母亲DPP同源物3(Smad3)、磷酸化母亲DPP同源物3(p-Smad3)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)等蛋白或基因表达情况;于术后1个月、3个月时对各组大鼠患肢跟腱部位进行X线检查以了解异位骨化形成情况。结果术后各时间点对照组大鼠各项检测指标(包括跟腱大体外观、HE染色、免疫组化染色以及X线检查等)均无明显变化;与模型组比较,观察组异位骨化形成被明显抑制。模型组及观察组MMP-9基因表达量均显著高于对照组(P<0.05),且随时间延长呈上升趋势;TIMP-1基因表达量均显著低于对照组(P<0.05),且随时间延长呈下降趋势。与模型组比较,观察组术后各时间点MMP-9表达量均明显降低(P<0.05),TIMP-1表达量均明显升高(P<0.05)。与模型组比较,观察组术后各时间点Smad7蛋白含量均明显增加,p-Smad3蛋白含量均明显减少。结论50 Hz、1 mT正弦交变电磁场干预对HO大鼠模型具有明确的抗异位骨化效应,其作用机制可能与促进Smad7表达,阻止Smad3磷酸化,从而抑制转化生长因子-β(TGF-β)/Smad信号转导通路,促进MMP-9/TIMP-1重新恢复动态平衡有关。