尖孢镰刀菌亚麻专化型FolGLS2基因功能分析

亚麻是我国主要的油料作物,且长期受亚麻枯萎病的侵害。β-1,3-葡聚糖合酶的催化亚基FKS/GLS为细胞壁合成所必需,本研究为鉴定尖孢镰刀菌亚麻专化型FolGLS2的功能,进行了FolGLS2基因的克隆、敲除以及敲除突变体表型和致病力的测定等试验。结果显示,FolGLS2基因全长5947 bp,cDNA开放阅读框为5847 bp,编码1948个氨基酸。表型观察发现,敲除突变体菌落小而紧实,生长速率明显降低;菌丝缩短、增粗且无法产生分生孢子;菌丝细胞壁对于常规原生质释放酶液具有抗性,无法释放原生质体;感染试验显示,突变体致病力明显减弱。上述结果表明,FolGLS2基因编码β-1,3-葡聚糖合成酶催化亚基,对菌丝营养生长、菌落形态、分生孢子发生、细胞壁组成及致病性具有调控作用。

尖孢镰刀菌亚麻专化型Folcdc15基因参与调控分生孢子发生和菌丝生长

通过对尖孢镰刀菌亚麻专化型Folcdc15基因敲除及敲除突变体互补试验,探究该基因在尖孢镰刀菌亚麻专化型中的功能。对Folcdc15基因进行DNA测序后,使用Split-Marker技术,构建含有潮霉素抗性基因(hph)缺失盒。通过PEG介导法转入野生型原生质体,在含有潮霉素的选择培养基上进行转化子筛选,通过PCR正负筛选确定敲除突变体。利用pZWH1载体构建含有Folcdc15的互补载体pZLY1,将其转入敲除突变体中进行互补测验。与野生型hm相比,敲除突变体ko1菌落生长速率下降了73%,菌丝形态发生了显著改变,菌丝变短且分叉变多,分生孢子隔膜数量增多长度增加,分生孢子数量显著减少。亚麻侵染试验表明,ko1的致病力显著降低。通过互补测验发现,回复突变株ca1恢复了Folcdc15基因缺失带来的分生孢子产量及形态、菌落生长和形态及致病力的缺陷。Folcdc15参与调控尖孢镰刀菌亚麻专化型的分生孢子发生及菌丝生长。

三裂叶豚草锈菌寄主专化性的研究

三裂叶豚草锈菌的寄主范围测定结果表明,该锈菌只侵染三裂叶豚草,对其它农作物及经济和观赏植物不侵染,具备寄主专一、病害流行速度快等特点,可用来控制三裂叶豚草。

汉语的“专化现象”与对外汉语教学初探

现代汉语词义存在大量的"专化现象",现有的词典和教材对此缺乏必要的注释,对外汉语课堂教学对此也有所忽视,以致在跨文化交际和外国人的汉语习得中出现许多误解和误用。鉴于此,我们应该加强对外汉语教学中"专化"问题的研究。

1991～1996年我国小麦条锈菌生理专化研究

本文报道了对１９９１～１９９６年采自我国１６个省和自治区的５６０６份小麦条锈菌标样的研究结果，基本反映了这期间我国小麦条锈菌生理小种的变化情况。１９９１～１９９５年，条中２９号出现频率为１３．６％～３２．２％，居于首位，但已呈下降趋势，到１９９６年出现频率仅为５．２％，名列第８；１９９１～１９９２年条中２５号居第２位（３．６％～８．４％）；１９９３～１９９５年新命名的条中３１号（６．６％～１６．７％）和条中３０号（５．７％～７．９％）分别上升为第２和第３位，特别是条中３１号到１９９６年已跃居首位（１３．０％）。条中２１、２２、２３、２６、２８号等小种出现频率均较低，且有逐年下降趋势。１９９４～１９９６年Ｈｙｂｒｉｄ４６和水源１１致病类群的出现频率逐年上升，前者３年分别为１９．６％、３４．８％和３８．２％，后者３年分别为１２．２％、２０．９％和４６．６％。这２个致病类群内分化加剧，到１９９６年已分别分化为９和１２个类型。条锈菌已进入以条中３０号和３１号为代表的Ｈｙｂｒｉｄ４６和水源１１致病类群占优势的新时期。

脑态的专化演变及效应——信态、脑态理论(Ⅱ)

文章论述脑态演化过程和脑态效应两方面内容;这些现象和效应,按照文中提供的方法和条件,是可以被重现和证实的。第一方面论述脑态演化过程:(1)专化过程:一个不专向任何科目的天然平均脑态者,每天用4~6小时学习一门科目,在此期间不学习其它科目,以避免其它科目的脑态对这科目脑态的干扰;如此坚持几年,在不断学习过程中,随着时间的推移,此人的脑态(包括物质结构的状态、能量运动和信息通道等)越来越趋向这科目;最终经过3~5年单一学习此科目后,此人的脑态已经完全专向这科目了,即他整个脑态在这个科目得到了极大的强化,而在其它科目上他的脑态被弱化(甚至显现比一般人更弱的状态)。(2)向非专化发展的退化过程:已专化于某科目的专化脑态者,开始每天用大量时间去学习多个科目,而且这些科目的信态相差很大。这样以来,他的脑态就摆布于这多个科目中,随着时间的推移(几年后),他原来专化科目的脑态就越来越被消减。如此坚持学习多科2~3年,他的专化态就完全消失,而新形成的脑态平均分布于各科,即多重平均脑态。天然平均脑态和多重平均脑态都属于非专化脑态。第二方面论述脑态现象及其影响效应:在上述漫长的脑态演化旅程中,脑态旅行者会遇到许多令人惊讶、令人感叹和奇异的脑态现象。(1)当专化脑态形成后,脑态旅行者在所专化的科目上的思维运动强度、理解深度、记忆能力、逻辑推理演绎能力、创新能力、持续学习时间耐受力、综合感悟力等各个方面,产生质的飞跃(与非专脑态相比,具有极大的提高);同时专化脑态也会影响脑态旅行者对整个人生世事的感觉,会影响他的性格和气质等。同时,在某个学科科目的脑态专化者,有些科目的信态与其所专化的科目的信态非常相近的,则他对这些科目表现天然的某种程度的专化水平,并且信态越相近专化程度越高;相反地,有些科目的信态与其所专化科目的信态相差很大,则他在这些科目上的思维运动能力甚至比不过一个天然平均脑态者或者多重平均脑态者,并且信态相差越远表现的思维能力越差。(2)当脑态旅行者由专化态演变退化到多重平均态后,他在先前所专化科目上的强烈思维能力就消失了,他的脑态为平均化状态,在各个科目上的思维能力比较平均,没有专化,与天然平均脑态者差不多。

西瓜、水稻根分泌物及酚酸类物质对西瓜专化型尖孢镰刀菌的影响

【目的】探讨西瓜、水稻根分泌物及其中的酚酸类物质对西瓜专化型尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum,FON)的影响,阐释西瓜枯萎病的发生和西瓜/旱作水稻间作系统改善西瓜连作枯萎病的机理。【方法】营养液培养法收集西瓜根分泌物(REW)和水稻根分泌物(RER),研究其对FON生长的影响;HPLC法分离鉴定REW和RER中的酚酸类物质,并通过外源添加法研究该类物质对FON生长的影响。【结果】REW能显著促进FON孢子萌发和产孢,与对照相比,1.0 mL和5.0 mL的REW对FON孢子萌发的促进率分别为46.9%和59.2%;在0.1 mL至2.0 mL范围内,REW对FON产孢的促进率从10.8%逐渐增加到84.6%;而RER能显著抑制FON孢子萌发和产孢,1.0 mL和5.0 mL RER对FON孢子萌发抑制率分别为14.3%和6.1%;并在0.1 mL至2.0 mL范围内,对该菌产孢的抑制率由4.6%增至37.5%。在REW和RER中同时检测到水杨酸、对羟基苯甲酸和邻苯二甲酸,而阿魏酸和香豆酸分别单独存在于REW和RER中;且RER中以香豆酸含量最高(占总量的37.9%);其酚酸总量是REW的1.4倍。综合FON孢子萌发、产孢能力和菌丝生长三项测定指标,香豆酸的抑菌效果最显著,抑制率分别为9.1%—70.5%、24.1%—100.0%和2.5%—47.5%,其次是水杨酸;而阿魏酸、对羟基苯甲酸、邻苯二甲酸对FON孢子萌发、产孢有不同程度的促进作用,以阿魏酸最为突出,浓度为40—160 mg.L-1时促进率分别为28.6%—114.3%和17.7%—54.8%。【结论】西瓜根分泌物对FON有刺激作用而水稻根分泌物对FON却具有抑制作用,这为阐释西瓜/旱作水稻间作系统改善西瓜连作枯萎病提供了理论依据。

2004—2009年甘肃省小麦条锈菌生理专化研究

小麦条锈菌新毒性小种的产生和发展是造成条锈病大流行及品种抗锈性丧失的主导因素。通过常规监测、致病性测定、毒谱分析等方法对2004—2009年采自甘肃省不同麦区1966份小麦条锈菌标样进行系统研究,共监测到37个小种和致病类型,基本反映了这期间甘肃省小麦条锈菌优势致病类群及生理小种的消长变化情况。除2005年‘条中32号’、‘条中33号’并列第1位外,出现频率为24.1%,2004、2006—2009年‘条中33号’均占居首位,出现频率分别为29.3%、26.2%、33.5%、37.6%、21.5%,‘条中32号’2004、2006—2008年为第2位,这2个小种总出现频率一直波动在37.5%～57.1%之间,第3、4位感小)种、‘2水00源4—1210-70’6,年20为0‘8年水为源‘1条1-中4’、‘33水’(源F.抗11)-、‘7’水、‘源水1源1-141’-,5出’及现‘频条率中在314号.1%’,～21010.76%年之为‘间水。源而1210-079’(年尤‘条Ⅱ中33’(F.抗)已上升为第2位,出现频率达18.9%,‘水源11-4’(F.抗)占据第4位,其他小种类型出现频率均比较低。Hybrid46致病类群和水源11致病类群出现总频率已由2004年的93.1%上升到2008年的99.4%。条锈菌已进入以‘条中33号’、‘条中32号’为代表的Hybrid46和水源11致病类群占优势的新阶段,‘条中32号’、‘条中33号’、VYr9、VYr3b+4b、VYrSu为危害中国小麦生产的主要流行小种及致病基因,这将对全国小麦条锈菌群体组成产生重要影响,为小麦抗锈育种及锈病治理提供科学依据。

蚜虫寄主专化型及其成因

综述了蚜虫寄主专化型产生的可能原因。蚜虫寄主专化型的形成在生态学水平上主要与蚜虫对寄主的选择识别能力、天敌作用、其他共生 (共存 )生物作用、抗药性等有关 ;并且具有一定的遗传基础 ,主要表现在蚜虫体内酶系的变化、染色体变异、有性繁殖中同型交配行为及种群的遗传分化上。但是对某种寄主专化型蚜虫而言 。

棉蚜寄主专化型及其形成的行为机理

通过生活在甜瓜和棉花上的棉蚜AphisgossypiiGlover的行为 ,研究棉蚜的寄主专化型及其形成的行为机理。生物学观察显示 :两类棉蚜在寄主植物相互交换以后 ,定居数显著减少 ,棉花蚜型棉蚜的繁殖系数及若虫存活率显著下降 ,说明棉蚜存在甜瓜蚜型和棉花蚜型两种寄主专化型。通过刺探电位技术研究棉蚜的取食行为 ,以探索其寄主专化型形成的行为机理。结果表明 :甜瓜蚜型棉蚜在棉花上的取食行为容易被中断 ,但其口针定位韧皮部的能力并没有显著削弱 ;而棉花蚜型棉蚜在甜瓜上的取食行为受到更大的影响 ,口针无法顺利定位至韧皮部 ,并在 2h内根本无法在筛管内取食。生物学观察和EPG取食行为分析都显示 :与甜瓜蚜型棉蚜相比 ,棉花蚜型棉蚜对寄主的要求更严格———寄主专化程度更高 。

甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)专化型的初步研究

本研究获得的甜瓜枯萎病病株9株分离物(南通市6株,新疆3株),经PDA培养性状发现,其在菌落颜色、质地和生长速率方面存在差异,大型分生孢子的大小为(19.54～41.11)μm×(4.90～8.16)μm,与西瓜枯萎病菌的大型分生孢子有较大差异。胚根法成株期致病性测定结果发现,本研究的甜瓜枯萎病菌分离物在不同鉴别寄主和鉴别品种上致病性存在专化型和生理小种方面的差异,但分离物中不存在西瓜枯萎病菌。利用核糖体转录间隔区保守序列设计引物,PCR检测也证明本研究甜瓜枯萎病菌不同分离物中不存在西瓜枯萎病菌。

新疆棉蚜食物专化型的形态测量分析

温室内接种试验表明，吐鲁番瓜类（西瓜、甜瓜、黄瓜）和棉花上的棉蚜AphisgossypiiGlover在以上两类作物之间相互移植不能存活，由此确立为不同的食物专化型──瓜蚜型和棉花蚜型。选择25个形态特征进行测量，对测量数据进行了变异分析和显著性测验。采用Fisher准则下的二类判别分析法对样本进行归类，明确地划归为瓜蚜型和棉花蚜型。依据判别系数筛选出6个对划归类群贡献最大的特征。

南京地区棉蚜寄主专化型及其成因研究

研究了南京地区棉蚜在不同寄主间的适合度。结果表明 ,木槿上的干雌蚜和有翅蚜转接到棉花上能正常存活、繁殖后代和建立种群 ;转接到甜瓜上第一、二代存活率低 ,但能建立种群 ;而转接到黄瓜和西瓜上所产仔蚜仅能存活 1～ 4d ,不能延续后代建立种群。黄瓜和甜瓜上的棉蚜不能在棉花上建立种群 ;反之 ,棉花上的棉蚜也不能在黄瓜和甜瓜上建立种群。不同寄主上棉蚜的口针长度表现为棉花、黄瓜 >甜瓜、木槿 ,棉花和黄瓜上棉蚜不能相互转接不是由于棉蚜口针长度差异所致。木槿上棉蚜在棉花、黄瓜、西瓜和甜瓜上口针取食时的行为表现为 ,黄瓜上棉蚜口针难以达到韧皮部筛管吸取植株养分 ,而在棉花、西瓜和甜瓜上均可 ;在甜瓜上棉蚜吸取养分前可不分泌水溶性唾液直接吸食。

尖孢镰刀菌亚麻专化型生物学特性研究

文章旨在研究尖孢镰刀菌亚麻专化型病原体的生物学特性。探索温度、pH、光照、培养基、碳源及氮源等条件对该病原体菌丝生长、分生孢子产生和萌发的影响。结果表明,该菌菌丝分别在30℃、pH 7、8条件下生长最快;持续黑暗及PDA培养基上生长状况最好;可有效利用多种碳、氮源,其中以淀粉、氯化铵最适。分生孢子的产量及萌发率分别在25、30℃,pH 7、8条件下最高;光照亦利于孢子的产生和萌发;PSA培养基适于产孢,PDA培养基适于孢子萌发;所试条件的产孢及孢子萌发最适碳源分别为乳糖、果糖,氮源为氯化铵及L-半胱氨酸。系统掌握了该病原体的生物学特性,为亚麻田间病害防治提供了理论依据。

安阳棉蚜寄主专化型及其形成机制初步分析

为了解安阳地区棉蚜寄主专化型情况,进行了棉蚜不同寄主转接的适合度测定。结果显示,棉花上与黄瓜上的棉蚜相互转接后其存活率及繁殖力均明显下降,不能建立种群;棉花上的棉蚜转接到西葫芦上时,其存活率及繁殖力与其原寄主无显著差异;黄瓜上的棉蚜转接到西葫芦上时,其净增殖率及内禀增长率均显著地高于其原寄主;黄瓜上棉蚜对西葫芦的适应性比棉花上棉蚜强。表明安阳地区棉蚜存在黄瓜和棉花两种寄主专化型,且都可以利用西葫芦。进一步对3种植物苗期叶片游离氨基酸进行测定,结果显示,游离氨基酸种类及总量均在西葫芦中最多,棉花中次之,黄瓜中最少。寄主植物游离氨基酸种类及含量的多少会影响棉蚜的生长与繁殖,可能是棉蚜寄主专化型形成的影响因素之一。

瓜类枯萎病菌尖镰孢专化型研究初报

１９８９年在郑州、开封两市郊区采集黄瓜、西瓜、瓠瓜和冬瓜枯萎病株，经分离鉴定，其病菌都是尖镰孢（ＦｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍＳｃｈｌ．）。用１０种瓜类作物鉴别寄主鉴定，瓜类枯萎病菌，可分为４个专化型：黄瓜枯萎病菌属尖镰孢黄瓜专化型（Ｆ．ｏｘｙsｐｏｒｕｍＳｃｈｌ．ｆ．ｓｐ．ｃｕｃｕｍｅｒｉｎｕｍＯｗｅｎ）；西瓜枯萎病菌属尖镰孢西瓜专化型（Ｆ．ｏｘｙｓｐｏｒｕｍＳｃｈｌ．ｆ．ｓｐ．ｎｉｖｅｕｍ（Ｅ．Ｆ．Ｓｍｉｔｈ）ＳｎｙｄｅｒａｎｄＨａｎｓｅｎ）；瓠瓜枯萎病菌属尖镰孢葫芦专化型（Ｆ．ｏｘｙｓｐｏｒｕｍＳｃｈｌ．ｆ．ｓｐ．ｌａｇｅｎａｒｉａｅＭａｔｕｏａｎｄＹａｍａｍｏｔｏ）；冬瓜枯萎病菌是一个新的专化型，定名为尖镰孢冬瓜专化型（Ｆ．ｏｘｙｓ－ｐｏｒｕｍＳｃｈｌ．ｆ．ｓｐ．ｂｅｎｉｎｃａｓａｅＳ．Ｚ．ＷａｎｇａｎｄＹ．Ｃ．Ｗｕｆ．ｓｐ．ｎｏｖ．）。尖镰孢酯酶同工酶酶谱测定结果表明，４个专化型的酶谱明显不同。

几种瓜类枯萎病菌专化型的AFLP分析

利用AFLP分子标记技术对西瓜、冬瓜、黄瓜和甜瓜4个不同专化型的10个菌株进行了分析,结果表明10对引物对供试菌株扩增出550条带,其中多态性带175条,占总带数的31.8%。对供试菌株的AFLP指纹图谱聚类分析,可将其划分为FOGI、FOGII、FOGIII和FOGIV 4个类群(FOGs),分别为西瓜专化型菌株、冬瓜专化型菌株、黄瓜专化型菌株和甜瓜专化型菌株,聚类结果与菌株的专化型间存在明显的对应关系。

尖孢镰刀菌甜瓜专化型基因组规模分泌蛋白的预测与分析

利用Signal P、Wo LF PSORT、TMHMM、big-PI Predictor、Target P和Secretome P等软件,对尖孢镰刀菌甜瓜专化型（Fusarium oxysporum f.sp.melonis,FOM）全基因组26 811条蛋白质氨基酸序列进行了分泌蛋白的预测分析。结果表明,FOM全基因组编码蛋白中有1 145个经典分泌蛋白,占编码蛋白总数的4.3%;有8 471个非经典分泌蛋白,占编码蛋白总数的31.6%。对经典分泌蛋白特征进行分析,发现其氨基酸长度集中在100~600个氨基酸,信号肽长度集中在17~22个氨基酸。对经典分泌蛋白的功能预测分析表明,有605个分泌蛋白获得了注释,主要涉及糖代谢、转运过程、过氧化氢代谢和生物合成等。对碳水化合物酶类（CAZymes）进行分析,结果表明有277个分泌蛋白为CAZymes,占经典分泌蛋白总数的24.2%。

GFP标记的尖孢镰刀菌西瓜专化型侵染西瓜过程观察

将绿色荧光蛋白基因转入西瓜尖孢镰刀菌FON中,并利用荧光共聚焦显微镜观察GFP标记菌株侵染西瓜的过程。结果显示,转化子连续转接4代能够稳定遗传,荧光强度良好,PCR验证gfp基因已转入菌株FON中;利用GFP标记菌株在荧光共聚焦显微镜下观察其侵染西瓜苗的过程,发现在1/2 MS培养的西瓜苗中,FON经过48 h侵染即可进入西瓜的根维管束,第3天便进入茎维管束,第4天进入叶维管束(包括叶柄和叶脉);在土壤盆栽条件下,侵染后2 d FON进入西瓜的根维管束,第9天进入茎维管束,第11天进入叶维管束。培养基培养与土壤盆栽相比,培养基栽培FON侵染的速度更快。

尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种fpd1基因敲除与表型分析

为了研究尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种fpd1基因的功能,构建了该基因敲除突变体并对其表型特征进行了分析。结果表明,与野生型菌株相比,fpd1基因敲除突变体生长减慢,产孢量显著降低,对巴西蕉的致病性明显减弱;fpd1基因可能在尖孢镰刀菌古巴专化型的产孢、生长发育和致病性等方面具有重要作用。本研究结果为进一步研究fpd1基因的功能和尖孢镰刀菌的致病机理奠定了基础。