丙型肝炎病毒核心蛋白基因的表达载体构建及在酵母中的表达

目的 :为探讨丙型肝炎病毒 (HCV)核心 (core)蛋白的功能 ,在真核生物酵母细胞中表达HCV核心蛋白基因。方法 :用多聚酶链反应 (PCR)的方法在HCV全长质粒 pBRTM HCV为膜板扩增HCV核心蛋白基因 ,克隆到pGEM T载体中 ,双酶切后回收连接到酵母表达质粒 pGBKT7中表达。提取酵母蛋白质 ,进行十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和Western免疫印迹分析。结果 :成功构建HCV核心蛋白基因酵母表达载体 ,Western免疫印迹显示了HCV核心蛋白在酵母细胞中表达。表达产物在胞内存在 ,分子量 2 2 0 0 0ku左右。结论 :HCV核心蛋白在酵母中表达成功。

丙型肝炎病毒核心蛋白反式激活基因TAHCCP1的克隆化研究

目的 筛选并克隆丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白 (core)反式激活的新型靶基因。方法 以HCV核心蛋白表达质粒pcD NA3 1(- ) core转染HepG2细胞 ,以空载体 pcDNA3 1(- )为平行对照 ,提取mRNA并进行抑制性消减杂交分析。分析筛选出来的基因 ,其中之一与GenBank中注册的已知功能基因序列没有同源性。通过序列同源性搜索比对及电子拼接 ,根据基因起始密码子的Kozak规则和终止密码子下游保守的多聚腺苷酸信号序列 ,确定新型基因序列。从转染 pcDNA3 1(- ) core的HepG2细胞提取总RNA ,以RT PCR技术扩增获得该新基因的全长序列 ,并对克隆的基因及其编码产物的序列进行分析。结果 该新基因的编码序列全长为 2 0 0 1nt,编码产物由 6 6 7aa组成 ,并测序证实 ,命名为TAHCCP1,在GenBank中注册 ,注册号为AY0 3835 9。结论 发现并鉴定、克隆了HCV核心蛋白反式激活作用的新型靶基因TAHCCP1。

丙型肝炎病毒核心蛋白的研究进展

肝细胞癌（HCC）自上世纪90年代已成为我国仅次于肺癌位列第二位的癌症杀手,而丙型肝炎病毒（HCV）携带的慢性感染则成为产生HC的主要危险因素之一[1].统计发现,高达80％的急性HCV患者会最终转化为慢性肝炎,进而恶变成肝硬化,致肝癌的几率明显上升.HCV属黄病毒科丙型肝炎病毒属,由宿主和病毒的信号肽酶剪接成3个结构蛋白和6个非结构蛋白,其中3个结构蛋白为HCV核心蛋白.有大量研究证实,核心蛋白潜在癌基因是HVV形成的重要促进因素.由于癌基因变异积累是导致肝癌发生的必要条件,而核心蛋白的独特结构可略去中间过程直接诱发肝细胞癌发生.因此HCV核心蛋白,尤其是其具有的致癌机制成了国内外临床界研究的重点,本文对此作了综述.

丙型病毒性肝炎及其检测研究进展

丙型肝炎属黄病毒科丙型肝炎病毒属，其基本结构与人类黄病毒如黄热病病毒、登革热病毒和乙型脑炎病毒相似，由结构蛋白和非结构蛋白组成。丙型肝炎病毒的基因分为6个型和100多个亚型，基因1型呈全球分布，占70％；1b占中国感染率的80％。不同基因型对治疗的反应性不同，感染1型和4型HCV患者对干扰素的反应性较低。

血液透析患者丙型肝炎病毒感染的危险因素及交互作用

目的 了解维持性血液透析（MHD）患者HCV感染的危险因素及其交互作用.方法 采用多中心整群抽样方法,面对面询问,收集435例MHD患者的人口学,以及与HCV感染发生可能相关的行为因素等资料,同时检测抗-HCV和HCV RNA水平.采用非条件Logistic回归方法计算OR值和95％CI,并进行单因素和调整可能混杂因素的多因素回归分析.结果 MHD患者抗-HCV阳性30例,其中5例HCV RNA阳性,HCV感染率为6.9％.持续透析时间和HCV感染呈正相关趋势（x^2 =30.89,P＜0.01）.多因素Logistic回归分析结果显示,HBV感染、长期使用免疫抑制剂和持续透析时间≥3年是HCV感染的独立危险因素（OR值分别为2.71、4.03和5.84,P值分别为0.026、0.006和0.001）.HBV感染与透析时间≥3年,既存在相加交互作用,其超额相对危险度（RERI）、交互作用归因比（AP）和交互作用指数（S）分别为10.72、0.60和2.74,同时又存在相乘交互作用（OR=6.26,95％CI：2.25～17.44）.结论 长期使用免疫抑制剂和持续透析时间≥3年可能是HCV感染的危险因素,同时,HBV感染和透析时间≥3年间存在相加和相乘交互作用.

中国46株丙型肝炎病毒多聚蛋白核苷酸序列特征分析

丙型肝炎病毒（hepatitis Cvirus，HCV）属于黄病毒科丙型肝炎病毒属，其基因组为单股正链RNA，全长约9．6kb。基因组编码一个多聚蛋白，通过酶解可将该多聚蛋白裂解为10种功能蛋向，包括位于氨基端的3种结构蛋白：

丙型肝炎病毒5’端非编码区的结构与功能研究进展

丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）为单股正链有包膜RNA病毒，为黄病毒科丙型肝炎病毒属成员，基因组长约9．6kb，5’端和3’端分别有一个非编码区（NCR），中间的编码区含有一个单一的长开放读码框架（ORF），转译出一条约3011个氨基酸残基的聚蛋白前体。该聚蛋白前体被宿主细胞信号肽酶和病毒蛋白酶水解加工成为至少十种成熟的功能蛋白，其排列顺序为：NH2一核心蛋白C-包膜蛋白E1-E2／NS1-非结构蛋白P7-NS2-NS3-NS4A—NS4B—NS5A-NS5B-COOH。 HCVORF的翻译是由其5’NCR指导的，该序列可作为一个内部核糖体起始位点（internal ribosome entry site，IRES），被小核糖体亚基（40S）和真核起始因子3（eukaryotic initiation factor3，eIF3）特异识别，允许ORF起始密码子近端与核糖体直接结合，使得病毒聚蛋白的翻译以非帽子（7-甲基鸟苷酸）依赖机制进行。由于宿主细胞mRNAs主要以帽子依赖机制起始翻译，因此IRES的功能特点使得5’NCR成为抗病毒作用研究和研制药物评价系统的理想靶位点，而5’NCR的结构及其IRES元件起始聚蛋白合成的机制也成为近年来的研究热点。本文将就这些方面的研究进展作一综述。

丙型肝炎病毒分类和宿主动物的研究进展

丙型病毒肝炎(Hepatitis C virus,HCV)属于黄病赤科(Flaviviridae),丙肝病毒属(Hepacivirus,HEPV)。长期以来,该属病毒只有HCV一个种,且在自然情况下,HCV只感染人和黑猩猩,由于缺乏合适的动物模型,使HCV致病机理及疫苗的研究受到阻碍。随着DNA高通量测序技术的广泛应用,自2011年以来,HEPV中多种病毒相继被发现,该属病毒已经增加到14种:犬、马、牛、鼠、蝙蝠和疣猴等哺乳动物可以作为HEPV的宿主。本文就HEPV的基因组结构、病毒蛋白功能、同源病毒及自然宿主分类进行了简娶的综述.

自然杀伤细胞在慢性丙型肝炎病毒感染中的抗病毒作用研究进展

HCV于1989年由Choo等分离鉴定，属于黄病毒科丙型肝炎病毒属，为有包膜的单股正链RNA病毒。目前，HCV感染已成为全球重要的公共卫生问题，是导致慢性肝病的重要病原体。据统计，全球HCV感染者超过1．7亿人。HCV感染易导致慢性化，55％～85％的成人急性感染后可发展为慢性丙型肝炎（chronichepatitisC，CHC）。

荧光定量聚合酶链反应检测库存血浆HBV-DNA及HCV-RNA

目的 调查库存血中HBV-DNA及HCV-RNA的阳性率。方法 采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法,对合格库存血浆进行微量汇集池标本(10份×50μl汇集)中的HBV-DNA和HCV-RNA测定,再对阳性汇集池中的标本进行单份检测。结果 250份(分25个汇集池)受检血浆中HCV-RNA阳性1份(0.4％),HBV-DNA阳性2份(0.8％)。结论 荧光定量PCR检测微量血浆汇集池标本法筛查血液病毒核酸是提高输血安全性的一种先进方法。

某劳教所488名吸毒人员HIV和HCV及梅毒感染状况分析

目的通过对连云港市某劳教所吸毒人员HIV、HCV和梅毒感染状况的监测分析,了解吸毒人群经血液传播疾病的危险因素,为开展干预工作、预防控制相关疾病在该类人群中流行提供依据。方法对连云港市某劳教所2007年新入所的488名吸毒人员进行HIV、HCV和梅毒抗体检测,并对结果进行统计分析。结果连云港市某劳教所吸毒人员HIV感染率为0.61%(3/488),HCV感染率为82.17%(401/488),梅毒感染率为6.76%(33/488)。HIV、HCV的感染途径以共用注射器或针头吸毒为主。结论吸毒人员中存在血源性疾病传播和流行的危险因素,应采取加强对吸毒人群的监测,广泛开展针对性防病知识的宣传教育和行为干预,加强戒毒人员出所后的管理等综合性防控措施,以控制艾滋病等血源性传染病的传播和蔓延。

HIV和HCV混合感染及其治疗的研究进展

人类免疫缺陷病毒（HIV）属于逆转录病毒科慢病毒属,是人类获得性免疫缺陷综合征（AIDS）的致病因子。丙型肝炎病毒（HCV）属于黄病毒科丙型肝炎病毒属,是丙型肝炎的致病因子。HIV和HCV混合感染感染已成为全球性的公共卫生问题。

Does Fasciola hepatica infection modify the response of acute hepatitis C virus infection to IFN-α treatment?

Immunologic response to acute hepatitis C is mainly a Th1 response, whereas fasciolopsiasis is associated with a diverse T-cell response. Interferon-alpha has immunomodulatory effects and enhances Th1 immune response. Fasciola infection could theoretically interfere with the Th1 immune response, even when acquired after an initial response to interferon-alpha treatment for acute hepatitis C virus （HCV） infection. We report here the case of a male patient who acquired Fasciola hepatica infection after an initial response to IFN-alpha therapy with a favorable outcome.