高敏丙型肝炎病毒核糖核酸在丙型肝炎中的诊断价值

目的比较高敏丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)与普通HCV-RNA、丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原检测在丙型肝炎临床诊断中的优势,探讨高敏HCV-RNA在临床诊断和病情监测中的应用价值。方法选择48例HCV抗体阳性的门诊及住院患者作为观察组,另选择同期40例HCV抗体阴性的健康体检者作为对照组。采集所有研究对象5 mL空腹静脉血标本,留取血清。高敏HCV-RNA采用赛沛全自动医用聚合酶链反应(PCR)分析系统检测,普通HCV-RNA采用厦门安普利生物技术有限公司Anadas9850全自动核酸提纯系统及荧光定量PCR分析系统及配套试剂检测,HCV抗体及HCV核心抗原检测采用酶联免疫吸附试验。试验前,先对赛沛高敏HCV-RNA检测进行性能验证。结果高敏HCV-RNA检测性能验证准确度、重复性、线性范围和最低检出限符合要求。高敏HCV-RNA诊断丙型肝炎灵敏度明显高于普通HCV-RNA及HCV核心抗原检测。结论高敏HCV-RNA是丙型肝炎诊断的重要指标,并可用于丙型肝炎治疗终点判断和病情监测。

荧光定量PCR法在丙型肝炎病毒核糖核酸检测中的应用

目的：通过与荧光半定量PCR及传统逆转录PCR（RT-PCR）比较,探讨荧光定量PCR（FQ-PCR）在丙型肝炎病毒核糖核酸（HCV RNA）检测中的应用价值。方法：采用FQ-PCR、荧光半定量PCR及RT-PCR三种方法同步检测180例丙型肝炎患者HCV RNA含量,所得结果采用χ^2检验。结果：FQ-PCR在血浆中及单个核细胞中的阳性检出例数最多,分别占78.3%和83.7%。无论是在血浆中或单个核细胞测定,FQ-PCR阳性检出率均明显高于同步检测的荧光半定量PCR及RT-PCR（P〈0.01）。以RT-PCR为标准,当HCV RNA水平在10^3～5copies/ml时,FQ-PCR和荧光半定量PCR阳性检出水平相一致（P〉0.05）,明显高于RT-PCR（P〈0.01）。当HCV RNA水平在10^6～7cop-ies/ml时,3种检测方法的阳性检出率基本相同（P〉0.05）。结论：FQ-PCR检测HCV RNA具有高灵敏度、高特异性,且二次污染的可能性小。

两种核酸提取方法检测血清丙型肝炎病毒核糖核酸的比较

目的比较两种不同核酸提取方法检测血清丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)对临床诊断的应用价值。方法对128份HCV抗体阳性的患者血清,同时用两种实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测HCV-RNA并检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,这两种方法分别是用二氧化硅微粒法提取RNA和纯化柱法提取RNA。结果 128份HCV抗体阳性的血清中二氧化硅微粒法HCV-RNA阳性率41.41%,纯化柱法HCVRNA阳性率59.38%,纯化柱法优于二氧化硅微粒法,差异有统计学意义(χ2=8.27,P<0.05)。49份HCV抗体阳性的血清中ALT异常,且ALT浓度变化与纯化柱法HCV-RNA水平呈正相关性(r=0.95,P<0.05)。结论血清HCV-RNA检测对丙型肝炎诊断和病情监测均有重要的临床意义,采用纯化柱法提取RNA具有更优的临床价值。

血清丙型肝炎病毒核糖核酸二种提取方法的比较

目前，国内大多数聚合酶链反应（PC R ）实验室开始丙肝病毒核糖核酸（HCVRNA ）的检测不多，一是核糖核酸（RN A ）在裂解提取时操作较繁琐，容易降解，二是HCV的感染患者相对乙型肝炎较少，三是 HCV 含量低，需要高敏感度和准确率。本文应用2种HCVRNA裂解提取的方法：柱提取法和二氧化硅吸附法，对抗-HCV 阳性的血清处理，并应用反转录聚合酶链反应（RT-PCR ）的一步法和两步法分别检测HCV-RNA ，以比较2种方法的临床应用价值。

丙型肝炎病毒抗体与丙型肝炎病毒核糖核酸的关系

目的:研究丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)与丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)的关系。方法:对38例抗-HCV阳性的丙型肝炎(HC)病人,用酶标仪测血清抗-HCVOD值,同时用逆转录-套式-聚合酶链反应(RT-nesled-PCR)检测血清HCVRNA。结果:38例抗-HCV阳性的HC病人中23例HCV RNA阳性,即60％的HC病人存在病毒血症;在不同的抗-HCV OD值范围内HCV RNA检出率不等。HCV RNA检出率随抗-HCV OD值增高而增加(P<0.01)。结论:①血清抗-HCV与血清HCV RNA之间有较好的一致性;②抗-HCV OD检测对HC的诊断及判断HC病人是否存在病毒血症有一定价值。

血清丙氨酸氨基转移酶、谷氨酰转肽酶、铁蛋白、丙型肝炎病毒核糖核酸定量对聚乙二醇干扰素抗病毒疗效的影响

目的探讨血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷氨酰转肽酶(GGT)、血清铁蛋白(SF)、丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)定量对聚乙二醇干扰素抗病毒疗效的影响。方法选取四川省自贡市第一人民医院2014年1—6月收治的慢性丙型病毒性肝炎患者51例,以ALT值达100 IU/L、GGT值达50 IU/L、SF值达400 ng/ml、HCV-RNA定量达106copies/ml为界将患者分为低ALT、GGT、SF、HCV-RNA组与高ALT、GGT、SF、HCV-RNA组,均给予聚乙二醇干扰素a-2a联合利巴韦林治疗48周,随访24周。在0周时检测血清ALT、GGT、SF、HCV-RNA,在4、12、48及72周检测HCV-RNA以判断疗效。结果聚乙二醇干扰素抗病毒治疗前低GGT、SF、HCV-RNA组较高GGT、SF、HCV-RNA组能获得更好的持续病毒应签(SVR)(P<0.05),而ALT水平与疗效无相关性(P>0.05)。结论慢性丙型病毒性肝炎患者治疗前GGT、SF、HCV-RNA水平与聚乙二醇干扰素的疗效密切相关,提示GGT、SF、HCV-RNA的水平可较准确地预测慢性丙型病毒性肝炎患者聚乙二醇干扰素抗病毒治疗的疗效。

聚合酶链反应检测血清及肝脏中丙型肝炎病毒核糖核酸的研究

本文报道了简便快速检测血清及肝脏中丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)的聚合酶链反应(PCR)方法。检测单浆献血员61例,其中抗-HCV阳性30例,检出血清HCV RNA阳性者17例;抗-HCV阴性31例,检出血清HCV RNA阳性者9例。检测6例血清HCV RNA阴性、抗-HCV阳性丙型肝炎患者的肝穿标本,发现4例HCV RNA阳性。说明本文所建立的PCR方法是诊断HCV感染的特异性强、敏感度高的一种新方法。检测肝组织内的HCV RNA可提高HCV RNA的检出率。本文还对标本的处理及如何避免假阳性等问题进行了讨论。

455例丙型肝炎病毒抗体核糖核酸定量检测结果分析

目的探讨丙型肝炎患者血清丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)结果与丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)定量的相关性。方法采用酶联免疫吸咐实验(ELISA)和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)技术,对455例同时做抗-HCV和HCV-RNA的丙型肝炎患者检测。结果455份标本中有85份HCV-RNA含量高于1000拷贝/ml,91份抗-HCV阳性。经统计分析,两者有明显的相关性。结论血清抗-HCV与血清HCV-RNA之间有较好的一致性;抗-HCV检测和HCV-RNA检测均有一定的局限性,同时检测抗-HCV和HCV-RNA可提高丙型肝炎患者的检出率,为其诊断和治疗提供帮助。

丙型肝炎病毒核糖核酸阳性肝炎临床特点

我们挑选了丙型肝炎病毒核糖核酸(HCVRNA)阳性病毒性肝炎患者进行观察,以了解本地区散发丙型肝炎的临床特点。病例与方法病例选择系按照第六届全国病毒性肝炎会议制订的标准诊断为病毒性肝炎者,其血清做抗-HAVIgM、HBsAg/抗-HBs、HBeAg/抗-HBe、抗-HBc/抗-HBcIgM、抗-HDV、巨细胞病毒抗体免疫球蛋白M型(抗-CMVIgM)、抗-EBVIgM,部份患者还做了戊型肝炎病毒抗体免疫球蛋白M型(抗-HEVIgM)检测均为阴性,而HCV RNA和抗HCV-C_(100-3)均为阳性者。性别及年龄不限,均系住院治疗患者。除HCVRNA用PCR法检测外,其他均用ELI-SA法。结果 1.按上述标准共选出34例,其中急性黄疸型肝炎12例(35.3%),急性无黄痘型肝炎2例(5.9%),慢性迁延型肝炎(慢迁肝)11例(32.4%)、慢性活动型肝炎(慢活肝)8例(23.5%)、慢性活动性肝炎伴肝硬变1例(2.9%)。总的急慢性比例为1:1.4。黄疸型和无黄疸型的比例为1:0.7(20例、14例)。有3例曾做肝活检,病理诊断与临床诊断相符。

定量竞争核糖核酸(RNA)多聚酶反应法检测丙型肝炎病毒RNA水平:高滴度病毒血症与疾病进展期相关

目前认为丙型肝炎病毒(HC)感染是慢性肝炎肝硬化及终末期肝病的主要原因.此外,新近认为HCV至少与两种肝外综合征有关,包括原发性混合性冷沉淀球蛋白血症和膜增生性肾小球肾炎.有症状或无症状的HCV感染者的血浆或血清中,用RNA多聚酶链反应法(RNA—PCR)检测HCV—RNA基因组是HCV感染的最敏感标志物.在用干扰素治疗慢性丙型肝炎时,病毒RNA阴转与临床反应有很好的相关.而病毒RNA再阳预示复发.精确检测病毒血症患者的HCV—RNA水平能增进我们对HCV感染、传播和发病机理的了解,亦有助于对慢性丙型肝炎患者进行临床分期和治疗.因此,建立了一种定量竟争(QC)RNA—PCR检测法来检测临床样本中的HCV—RNA实际水平.该方法在RNA提取,cDNA合成和PCR扩增过程中的一个合成的HCV—RNA分子作为内对照物.由于HCV分溶物的HCV—RNA 5’端核苷酸高度保守,故选该区做为靶序列.PCR对该编码区要比HCV基因组的其他区更加灵敏,而且与5’端编码区相对稳定,易于处理和贮存,可能与该区有丰富的二级结构有关.应用定量竞争PCR检测法.检测了121例病毒血症患者的HCV—RNA水平,包括无症状的供血员,慢性肝炎病人及将行肝移植的晚期肝病病人.

丙型肝炎病毒IgG抗体阳性者确诊丙型肝炎的高危因素分析及列线图预测模型构建

目的分析丙型肝炎(丙肝)病毒(HCV)免疫球蛋白G(IgG)抗体阳性者中确诊HCV的高危因素,同时建立列线图(nomogram)预测模型,为基层医疗机构丙肝的临床诊断和转诊决策提供依据。方法回顾性收集2022年1月—2023年10月住院筛查患者中同时进行HCV\|RNA、HCV-IgG抗体、肝功能和血常规检测HCV-IgG抗体阳性者的人口学特征及丙肝相关各项指标。采用logistic回归分析HCV-IgG抗体阳性者确诊丙肝的高危因素,并构建nomogram模型,分别采用一致性系数和校准曲线评估模型的预测性能和符合度。结果394例HCV-IgG抗体阳性者中,HCV-RNA阳性率为30.2%。多因素logistic分析显示,在HCV-IgG抗体阳性的人群中,HCV-IgG≥5.0 S/CO、天冬氨酸氨基转移酶(AST)>35 U/L和有肝炎相关临床症状为HCV-RNA阳性的独立危险因素,其OR值分别为233.926(95%CI:31.814~1720.046)、4.079(95%CI:2.105~7.904)和5.295(95%CI:1.505~18.634)。用于预测HCV-RNA阳性的nomogram模型准确度为0.923,灵敏度为99.2%,特异度为74.5%。结论基于HCV-IgG抗体、AST和肝炎相关临床症状的nomogram模型具有高准确度,可用于指导临床医生判断HCV-IgG抗体阳性者确诊HCV感染的风险。

丙型肝炎病毒抗体及核酸测定的诊断效能分析

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染患者HCV抗体(HCV-Ab)、HCV核糖核酸(HCV-RNA)水平的变化及其在诊断治疗中的意义。方法随机收集临床诊断为HCV感染患者血清,采用化学发光微粒子免疫检测法测定HCV-Ab,PCR-荧光探针法检测HCV-RNA,同时检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)。根据ALT、AST水平以及HCV-RNA水平分别分为两组,分析比较两组间各指标的变化。同时收集37例临床抗病毒治疗患者的血清,分析治疗前后各指标的变化。结果肝功异常组HCV-Ab、RNA载量对数值水平均高于肝功正常组(P<0.05)。HCV-RNA阳性组HCV-Ab、ALT、AST水平均高于HCV-RNA阴性组(P<0.05)。HCV-Ab、RNA载量对数值诊断丙型肝炎的ROC曲线下面积分别为0.990、0.838。连续观察病例治疗后ALT、AST、RNA载量对数值水平均较治疗前下降(P<0.05);而HCV-Ab治疗前后差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HCV-Ab对于丙型肝炎的诊断效能优于RNA载量对数值。ALT、AST及HCV-RNA检测在丙型肝炎治疗监测过程中有重要临床意义。

丙型肝炎病毒抗体阳性患者HCV-RNA与ALT结果分析

目的研究丙型肝炎病毒抗体阳性患者丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)、丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测结果分布特点及相关性。方法收集北京同仁医院2018年1月至2021年6月HCV-Ab阳性患者HCV-Ab、HCV-RNA、ALT检测数据,运用统计学方法分析三者数据分布特点及相关性,以及HCV-RNA阳性患者与HCV-RNA阴性患者HCV-Ab检测值与ALT水平分布特点。结果患者个体HCV-Ab检测值、HCV-RNA与ALT水平三者之间不存在明显的相关性,但将三者实验数据按检测值的高低、阴阳性以及异常率进行分组仍然存在一定的规律。HCV-RNA阳性患者的HCV-Ab检测值高于阴性患者,预测HCV-RNA阳性的最佳HCV-Ab阈值为10.34(S/CO)。患者ALT异常率、HCV-RNA阳性率随HCV-Ab检测值分组的升高有升高的趋势。ALT异常率与患者HCV-RNA阴阳性有关,但与HCV-RNA水平分组无关。结论患者HCV-Ab检测值对预测HCV-RNA阴阳性有较大的应用价值,HCV-Ab检测值升高和HCV-RNA阳性的患者发生ALT异常的可能性更大,临床可对三者实验结果进行预判和印证。

丙型肝炎病毒核酸定量测定的临床价值

目的 研究丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)载量与抗-HCV含量以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平之间的相关性与符合性。方法 用FQ-PCR法检测128份怀疑HCV感染的血清中的HCV-RNA,同时检测ALT和抗-HCV。结果 128份样本中HCV-RNA阳性率为53.9%(69/128);抗-HCV阳性率为62.5%(80/128);ALT异常率为51.0%(65/128)。HCV平均载量为8.52×105 拷贝/ml血清。抗-HCV滴度和ALT异常随着HCV-RNA载量升高而增加。结论 用FQ-PCR法检测HCV-RNA可以确定(1)抗HCV与抗-HBs不同,不是中和抗体,(2)高滴度抗-HCV血清具有传染性。(3)抗-HCV滴度与HCV-RNA浓度之间呈正相关性r=0.952, P<0.001,且有符合性和互补性,(4)对慢性丙型肝炎长期抗-HCV阳性,若出现HCV-RNA阴性或阳性可以鉴别活动性、复制性程度,(5)是评价丙型肝炎抗病毒治疗效果的重要指标。

慢性丙型肝炎患者外周血DNT细胞与HCV-RNA病毒载量关系的研究

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）感染机体后所引起的传染性疾病。大多数的丙型肝炎患者感染后转为慢性,病毒在体内持续存在,慢性丙型肝炎是引起肝硬化和肝癌的重要原因之一。

定量检测丙型肝炎病毒核酸的临床意义

目的 研究丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒（HCV-RNA）载量与抗-HCV含量以及丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平之间的相关性和符合性。方法 用FO-PCR法检测146例高度怀疑丙肝感染的血清中的HCV-RNA，同时检测抗-HCV和ALT.结果 146份标本中HCV-RNA阳性率为55．5％（81／146）;抗-HCV的阳性率为58．2％（85／146）;ALT异常率为54．8％（80／146）。HCV-RNA平均我量为6．98×10^5拷贝／ml血清。抗-HCV滴度和ALT异常率随着HCV-RNA载量升高而增加。结论 用FQ-PCR法检测HCV-RNA可以确定：（1）高滴度抗-HCV血清具有传染性；（2）抗-HCV与HCV-RNA之间呈正相关关系r=0．980，P〈0．001，且有符合性和互补性：（3）对慢性丙型肝炎长期抗-HCV阳性，若出现HCV-RNA阴性或阳性可以鉴别活动性、复制性程度；（4）评价抗病毒治疗效果的重要指标。

血液透析丙型肝炎病毒跨膜通透的临床研究

目的对透析膜施加特定条件，寻求丙型肝炎病毒（HCV）跨膜转运的临床依据。方法选择10例HCV-RNA标志物阳性的血液透析患者，研究分两个阶段，第1阶段应用低通量聚乙烯醇膜透析器，第2阶段应用高通量聚砜膜血滤器，均在250-400mmHg的高跨膜压（TMP）和无肝素的条件下，每例患者应用低通量与高通量单超透析各2次，共留取40份单超液，用RT-PCR检测单超液中的HCV-RNA标志物。结果第1阶段留取的20份单超液HCV～RNA标志物均阴性，第2阶段留取的20份单超液中有2份HCV-RNA标志物呈阳性，这2份阳性标本均出自同一患者。结论使用低通量透析器，即使再高TMP情形下，HCV不容易跨膜通过，但在使用高通量透析器，在高TMP的特定条件下有可能导致HCV从血液中逃逸至膜外。

HCV感染患者436例丙型肝炎病毒载量与抗-HCV及ALT异常的关系

目的了解丙型肝炎病毒（HCV）载量与HCV抗体（抗-HCV）滴度及丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平的关系。方法采用双抗原夹心酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测抗-HCV;用荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ-RT-PCR）检测436例抗-HCV阳性者的HCV RNA定量,同时检测ALT水平。用SAS9.0软件进行分析。结果 HCV RNA阳性率随S/CO值的增大而增高,当S/CO值在11.965时,敏感性为80.83%,特异性为70%;HCV RNA载量与ALT水平呈正相关（r=0.234 10,P〈0.05）,HCV RNA介于104~105IU/ml时ALT异常率最高,说明异常ALT水平在不同HCV RNA分组中存在统计学差异（P〈0.05）;随着HCV RNA载量的升高,ALT异常率升高,但以中病毒载量组最明显（χ2=58.4480,P〈0.05）。结论抗-HCV滴度越高,HCV RNA阳性率越高;HCV RNA是反映HCV复制的可靠指标,结合ALT结果可帮助了解HCV在体内的复制情况。

慢性丙型肝炎患者病毒载量与T细胞免疫功能关系分析

目的观察慢性丙肝病毒(HCV)感染者细胞免疫功能的变化,探讨病毒复制程度与细胞免疫功能的关系。方法应用流式细胞仪直接免疫荧光法检测120例丙肝病毒感染者和40例正常对照者外周血T细胞亚群百分率,荧光定量PCR法检测丙肝感染者血清HCV-RNA。结果 (1)HCV感染者外周血CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值分别为(35.8±9.7)%,1.6±0.7,明显低于正常对照组的(40.1±10.1)%,1.8±0.8(P<0.05,P<0.01);CD8+T细胞百分率(26.8±7.5)%明显高于正常对照组的(23.8±6.7)%(P<0.01),而CD3+T细胞百分率差异无显著性(P>0.05)。(2)低拷贝组(103～104copies/mL)和高拷贝组(105～108copies/mL)的CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+T比值分别为(37.1±9.9)%、(35.9±8.8)%,1.6±0.6、1.2±0.7明显低于对照组(<103copies/mL)的(40.1±10.1)%、1.9±0.8(P<0.05,P<0.01);高拷贝组和低拷贝组的CD8+T细胞百分率(29.6±8.9)%、(28.8±7.3)%,明显高于对照组的(23.8±6.7)%和RNA阴性组的(24.7±5.9)%(P<0.05),且高拷贝组的CD4+/CD8+比值明显低于低拷贝组和RNA阴性组(P<0.01);而RNA阴性组CD4+、CD8+细胞百分率与正常对照组之间及CD4+、CD8+细胞百分率和CD4+/CD8+比值在低拷贝组与高拷贝组之间无明显差异(P>0.05)。结论慢性丙型肝炎患者HCV-RNA表达水平的升高,可能是导致T淋巴细胞应答能力下降的重要原因。