不同混合方式检测丙型肝炎病毒核酸的研究

目的 研究不同混合方式检测丙型肝炎病毒核酸含量 (HCVcDNA)的方法。方法 以未混合标本为对照 ,使用荧光定量PCR(FQ PCR)技术研究提取阶段混合 ,反转录阶段混合以及提取和反转录阶段均混合等不同实验条件下的HCVcDNA含量。结果 提取阶段混合组的HCVcDNA含量与对照组相比未见显著性差异 (P >0 0 5 ) ;反转录阶段混合组以及提取和反转录阶段均混合组的HCVcDNA含量低于对照组 (P <0 0 5 ) ,且在低浓度时出现假阴性结果。阴性标本在提取阶段混合未见假阳性。结论 在对混合血清进行HCVcDNA测定时 ,应将混合安排在提取阶段 ,不宜为增大混合标本数而在提取和反转录阶段均混合。

丙型肝炎病毒核酸定量和抗-HCV血清学分析的诊断价值

目的探讨PCR-荧光探针法与抗-HCV检测在丙型肝炎(丙肝)诊断中的应用价值。方法回顾性分析265例疑似丙肝病毒感染者行HCV-RNA、抗-HCV及ALT检测的资料,统计不同年龄、性别分布情况,进行HCV-RNA与抗-HCV、ALT的相关性分析。结果 (1)男性抗-HCV与HCV-RNA的阳性率均高于女性,但差异无统计学意义(P>0.05);年龄>40岁的患者抗-HCV与HCV-RNA的阳性率明显高于年龄≤40岁的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)ALT异常率随HCV-RNA阳性率的增高而增加,并与HCV-RNA含量成正相关(r=0.999,P<0.05)。但ALT的水平与HCV-RNA含量无相关性(r=0.800,P>0.05)。(3)HCV-RNA阳性多伴有抗-HCV阳性(r=0.320),二者有很好的相关性。结论 ELISA法检测抗-HCV在丙型肝炎诊断中仍旧为首选检测方法。联合应用HCV-RNA和抗-HCV及ALT检测,是诊断丙型肝炎最为可靠的方法。

丙型肝炎病毒核酸定量检测的临床应用

本文采用实时荧光定量PCR方法对158例丙型肝炎抗体阳性患者的血清HCV RNA进行检测,探讨血清HCV RNA水平与患者肝功能损害情况的关系。1对象和方法1.1对象丙型肝炎抗体检测结果为阳性的病例标本共158例（男88,女70）,均来自我院门诊或住院病人,年龄（15～88）岁,平均（46.13±17.24）岁。以上病例血清的乙型肝炎、甲型肝炎、戊型肝炎及丁型肝炎病毒标志物均为阴性。

丙型肝炎病毒核酸定量测定的临床价值

目的 研究丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)载量与抗-HCV含量以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平之间的相关性与符合性。方法 用FQ-PCR法检测128份怀疑HCV感染的血清中的HCV-RNA,同时检测ALT和抗-HCV。结果 128份样本中HCV-RNA阳性率为53.9%(69/128);抗-HCV阳性率为62.5%(80/128);ALT异常率为51.0%(65/128)。HCV平均载量为8.52×105 拷贝/ml血清。抗-HCV滴度和ALT异常随着HCV-RNA载量升高而增加。结论 用FQ-PCR法检测HCV-RNA可以确定(1)抗HCV与抗-HBs不同,不是中和抗体,(2)高滴度抗-HCV血清具有传染性。(3)抗-HCV滴度与HCV-RNA浓度之间呈正相关性r=0.952, P<0.001,且有符合性和互补性,(4)对慢性丙型肝炎长期抗-HCV阳性,若出现HCV-RNA阴性或阳性可以鉴别活动性、复制性程度,(5)是评价丙型肝炎抗病毒治疗效果的重要指标。

丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸含量与丙型肝炎病毒抗体和丙氨酸氨基转移酶的相关性

[目的]探讨丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)含量与丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)间的相关性.[方法]采用实时荧光定量PCR检测302例丙型肝炎患者血清中HCV RNA含量,同时采用ELISA法检测抗-HCV水平,利用全自动生物化学检测仪测定ALT水平.[结果]302例丙型肝炎患者血清标本中,抗-HCV均呈阳性,其中199份标本HCV RNA含量高于检测上限(103 U/mL),2种检测方法的符合率为65.9%.ALT异常率随HCV RNA含量的增高而升高,两者呈显著正相关(r=0.155,P<0.05);而ALT水平变化与HCV RNA含量无相关性(r=0.001,P>0.05).[结论]HCV RNA含量与抗-HCV水平是诊断HCV感染的重要指标,HCV RNA含量结合ALT水平测定可帮助临床了解HCV在体内复制的状况及肝脏损伤情况.

定量检测丙型肝炎病毒核酸的临床意义

目的 研究丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒（HCV-RNA）载量与抗-HCV含量以及丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平之间的相关性和符合性。方法 用FO-PCR法检测146例高度怀疑丙肝感染的血清中的HCV-RNA，同时检测抗-HCV和ALT.结果 146份标本中HCV-RNA阳性率为55．5％（81／146）;抗-HCV的阳性率为58．2％（85／146）;ALT异常率为54．8％（80／146）。HCV-RNA平均我量为6．98×10^5拷贝／ml血清。抗-HCV滴度和ALT异常率随着HCV-RNA载量升高而增加。结论 用FQ-PCR法检测HCV-RNA可以确定：（1）高滴度抗-HCV血清具有传染性；（2）抗-HCV与HCV-RNA之间呈正相关关系r=0．980，P〈0．001，且有符合性和互补性：（3）对慢性丙型肝炎长期抗-HCV阳性，若出现HCV-RNA阴性或阳性可以鉴别活动性、复制性程度；（4）评价抗病毒治疗效果的重要指标。

实时荧光PCR检测丙型肝炎病毒核酸及其临床意义

目的:探讨实时荧光PCR检测技术在丙型肝炎病原诊断及在监测干扰素-α治疗慢性丙型肝炎早期病毒学应答反应(EVR)中的临床意义。方法:采用一种新的丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)扩增(PCR)定量检测方法——实时荧光PCR检测HCV-RNA,对96％例慢性丙肝(其中20例随机接受Pegasys或Referon-α治疗,每例患者分别采集治疗前后系列血清7份)、30例其它肝病、15例非肝病和86例健康献血员的血清标本进行HCV-RNA检测,部分血清标本与Am-plicor(Roche)进行核对。结果:96例慢性丙肝患者血清HCV-RNA检出率为85.4％(82/96)、其它肝病、非肝病和健康献血员中均未检出HCV-RNA;部分标本经与Amplicor核对呈较好相关性,r(log)=0.91。随机接受Pegasys或Referon-α治疗的20例丙肝患者治疗前后EVR显示,前者的EVR似较后者明显,但因病例数太少,无明显统计学差异(G=4.467,P>0.05)。结论:实时荧光PCR检出的HCV-RNA载量可较客观地反映丙肝患者体内病毒复制水平,支持干扰素治疗慢性丙型肝炎EVR可用于预测长期疗效。

荧光定量PCR法检测丙型肝炎病毒核酸的临床意义

丙型肝炎是一种主要经血液传播的疾病,HCV感染可导致肝脏慢性炎症、坏死和纤维化,部分患者甚至可发展为肝硬化及肝癌[1],对人类的健康和生命危害极大,已成为严重的社会和公共卫生问题。抗-HCV检测可反映HCV的感染或既往感染,而HCV-RNA定量检测是反映HCV复制的特征指标,是抗病毒治疗的依据。本文对277例抗-HCV阳性患者同时进行HCV-RNA定量检测,

血清丙型肝炎病毒核酸含量联合肝功能检测在100例丙型肝炎患者诊断中的应用价值

[目的]探讨血清丙型肝炎病毒核酸含量联合肝功能检测在丙型肝炎患者诊断中的临床意义.[方法]选择2017年1月至2019年2月间接受检测的100例丙型肝炎患者作为研究对象,所有患者均接受单独血清丙型肝炎病毒核酸含量检测、肝功能检测及血清丙型肝炎病毒核酸含量联合肝功能检测,比较不同检测方法的阳性率并分析血清丙型肝炎病毒核酸含量与肝功能指标的相关性.[结果]血清丙型肝炎病毒核酸含量联合肝功能检测的阳性检出率显著高于单独血清丙型肝炎病毒核酸含量检测和肝功能检测(χ~2=19.151,P<0.01);胆碱酯酶正常组的前白蛋白及白蛋白水平均显著高于胆碱酯酶轻度异常组和胆碱酯酶异常组,相关性分析结果显示,血清胆碱酯酶与前白蛋白、白蛋白呈正相关(r=0.725,0.806,P<0.05).[结论]血清丙型肝炎病毒核酸含量联合肝功能检测在丙型肝炎的诊断中有较高的阳性检出率.

聚合酶链反应技术在定量检测丙型肝炎病毒核酸中的应用

目的:研究丙型肝炎患者血清中的丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)载量与抗-HCV含量以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平之间的相关性。方法:应用聚合酶链反应(FQ-PCR)技术定量检测231份HCV-RNA临床标本,同时采用ELISA法检测抗-HCV,用生化分析仪测定ALT水平。结果:231份样本中有136份HCV-RNA含量高于80拷贝/ml血清,阳性率为58.9%(136/231);139份样本抗-HCV阳性,阳性率为60.2%(139/231);100份样本ALT异常,异常率为43.3%(100/231)。结论:应用FQ-PCR方法检测HCV-RNA特异性强、灵敏度高,具有良好的临床应用价值。

高敏丙型肝炎病毒核糖核酸在丙型肝炎中的诊断价值

目的比较高敏丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)与普通HCV-RNA、丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原检测在丙型肝炎临床诊断中的优势,探讨高敏HCV-RNA在临床诊断和病情监测中的应用价值。方法选择48例HCV抗体阳性的门诊及住院患者作为观察组,另选择同期40例HCV抗体阴性的健康体检者作为对照组。采集所有研究对象5 mL空腹静脉血标本,留取血清。高敏HCV-RNA采用赛沛全自动医用聚合酶链反应(PCR)分析系统检测,普通HCV-RNA采用厦门安普利生物技术有限公司Anadas9850全自动核酸提纯系统及荧光定量PCR分析系统及配套试剂检测,HCV抗体及HCV核心抗原检测采用酶联免疫吸附试验。试验前,先对赛沛高敏HCV-RNA检测进行性能验证。结果高敏HCV-RNA检测性能验证准确度、重复性、线性范围和最低检出限符合要求。高敏HCV-RNA诊断丙型肝炎灵敏度明显高于普通HCV-RNA及HCV核心抗原检测。结论高敏HCV-RNA是丙型肝炎诊断的重要指标,并可用于丙型肝炎治疗终点判断和病情监测。

丙型肝炎病毒抗体联合核酸定量检测对丙型肝炎患者的早期诊断价值研究

目的探讨在丙型肝炎患者早期诊断中丙型肝炎病毒抗体联合丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)检测的临床价值。方法对116例鼓楼医院住院及门诊丙型肝炎患者采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)测定HCV RNA、酶联免疫吸附试验(ELISA)和金标法测HCV抗体、速率法测丙氨酸氨基转移酶(ALT)。结果 116例丙型肝炎患者中,ELISA HCV抗体阳性97例(占83.6%),HCV RNA阳性85例(占73.3%),HCV金标阳性77例(占66.4%),ALT阳性69例(占59.5%),HCV抗体和HCV RNA联合检测总阳性率(指任一指标阳性即为阳性)为100.0%。结论 HCV抗体和HCV RNA联合检测扩大了丙型肝炎检测范围,降低了丙型肝炎的漏诊率,有利于丙型肝炎的早期诊断。

荧光定量PCR法在丙型肝炎病毒核糖核酸检测中的应用

目的：通过与荧光半定量PCR及传统逆转录PCR（RT-PCR）比较,探讨荧光定量PCR（FQ-PCR）在丙型肝炎病毒核糖核酸（HCV RNA）检测中的应用价值。方法：采用FQ-PCR、荧光半定量PCR及RT-PCR三种方法同步检测180例丙型肝炎患者HCV RNA含量,所得结果采用χ^2检验。结果：FQ-PCR在血浆中及单个核细胞中的阳性检出例数最多,分别占78.3%和83.7%。无论是在血浆中或单个核细胞测定,FQ-PCR阳性检出率均明显高于同步检测的荧光半定量PCR及RT-PCR（P〈0.01）。以RT-PCR为标准,当HCV RNA水平在10^3～5copies/ml时,FQ-PCR和荧光半定量PCR阳性检出水平相一致（P〉0.05）,明显高于RT-PCR（P〈0.01）。当HCV RNA水平在10^6～7cop-ies/ml时,3种检测方法的阳性检出率基本相同（P〉0.05）。结论：FQ-PCR检测HCV RNA具有高灵敏度、高特异性,且二次污染的可能性小。

丙型肝炎病毒抗体与丙型肝炎病毒核糖核酸的关系

目的:研究丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)与丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)的关系。方法:对38例抗-HCV阳性的丙型肝炎(HC)病人,用酶标仪测血清抗-HCVOD值,同时用逆转录-套式-聚合酶链反应(RT-nesled-PCR)检测血清HCVRNA。结果:38例抗-HCV阳性的HC病人中23例HCV RNA阳性,即60％的HC病人存在病毒血症;在不同的抗-HCV OD值范围内HCV RNA检出率不等。HCV RNA检出率随抗-HCV OD值增高而增加(P<0.01)。结论:①血清抗-HCV与血清HCV RNA之间有较好的一致性;②抗-HCV OD检测对HC的诊断及判断HC病人是否存在病毒血症有一定价值。

血清丙型肝炎病毒核糖核酸二种提取方法的比较

目前，国内大多数聚合酶链反应（PC R ）实验室开始丙肝病毒核糖核酸（HCVRNA ）的检测不多，一是核糖核酸（RN A ）在裂解提取时操作较繁琐，容易降解，二是HCV的感染患者相对乙型肝炎较少，三是 HCV 含量低，需要高敏感度和准确率。本文应用2种HCVRNA裂解提取的方法：柱提取法和二氧化硅吸附法，对抗-HCV 阳性的血清处理，并应用反转录聚合酶链反应（RT-PCR ）的一步法和两步法分别检测HCV-RNA ，以比较2种方法的临床应用价值。

血清丙氨酸氨基转移酶、谷氨酰转肽酶、铁蛋白、丙型肝炎病毒核糖核酸定量对聚乙二醇干扰素抗病毒疗效的影响

目的探讨血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷氨酰转肽酶(GGT)、血清铁蛋白(SF)、丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)定量对聚乙二醇干扰素抗病毒疗效的影响。方法选取四川省自贡市第一人民医院2014年1—6月收治的慢性丙型病毒性肝炎患者51例,以ALT值达100 IU/L、GGT值达50 IU/L、SF值达400 ng/ml、HCV-RNA定量达106copies/ml为界将患者分为低ALT、GGT、SF、HCV-RNA组与高ALT、GGT、SF、HCV-RNA组,均给予聚乙二醇干扰素a-2a联合利巴韦林治疗48周,随访24周。在0周时检测血清ALT、GGT、SF、HCV-RNA,在4、12、48及72周检测HCV-RNA以判断疗效。结果聚乙二醇干扰素抗病毒治疗前低GGT、SF、HCV-RNA组较高GGT、SF、HCV-RNA组能获得更好的持续病毒应签(SVR)(P<0.05),而ALT水平与疗效无相关性(P>0.05)。结论慢性丙型病毒性肝炎患者治疗前GGT、SF、HCV-RNA水平与聚乙二醇干扰素的疗效密切相关,提示GGT、SF、HCV-RNA的水平可较准确地预测慢性丙型病毒性肝炎患者聚乙二醇干扰素抗病毒治疗的疗效。

聚合酶链反应检测血清及肝脏中丙型肝炎病毒核糖核酸的研究

本文报道了简便快速检测血清及肝脏中丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)的聚合酶链反应(PCR)方法。检测单浆献血员61例,其中抗-HCV阳性30例,检出血清HCV RNA阳性者17例;抗-HCV阴性31例,检出血清HCV RNA阳性者9例。检测6例血清HCV RNA阴性、抗-HCV阳性丙型肝炎患者的肝穿标本,发现4例HCV RNA阳性。说明本文所建立的PCR方法是诊断HCV感染的特异性强、敏感度高的一种新方法。检测肝组织内的HCV RNA可提高HCV RNA的检出率。本文还对标本的处理及如何避免假阳性等问题进行了讨论。

丙型肝炎病毒总抗原检测用于病程监测的研究

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)总抗原检测方法在丙肝病程监测方面的临床意义。方法对来本院就诊的40位丙肝患者于治疗前、治疗1个月时、治疗3个月时、治疗6个月(停药)时,停药6个月后等不同时期进行采血,收集血清或血浆标本,用抗-HCV检测试剂盒(酶联免疫法)、HCV核酸(RNA)扩增(PCR)荧光定量检测试剂盒、HCV总抗原检测试剂盒(酶联免疫法)进行检测。结果从患者确认感染丙肝到治疗结束抗-HCV检测均呈阳性,而HCV-RNA检测和HCV总抗原检测会随着病程的变化而变化。本次共检测了189例标本(40位患者不同时期标本总例数),其中HCV-RNA阳性51例,该51例阳性标本中,HCV总抗原检测阳性44例,阳性检出率为86.27%;138例HCV-RNA阴性标本,有3例HCV总抗原检测为阳性(2.2%)。2种方法比较,差异无统计学意义(χ2=1.6,P>0.05)。HCV总抗原检测其OD值会随着病程的变化而相应改变,可以较好地反应丙肝患者的病程状况。结论 HCV总抗原检测方法在丙肝病程监测方面具有很好的临床意义,适合在缺少荧光定量PCR检测能力的中小医院使用,可在一定程度上替代HCV-RNA检测,对抗-HCV阳性患者作进一步的验证检测或补充,更好地应用于丙肝患者的病程监测。

荧光定量PCR联合ELISA检测丙型肝炎病毒的临床应用研究

目的:探讨荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)联合检测丙型肝炎病毒的临床意义。方法:用FQ-PCR联合ELISA方法检测117例临床已确诊为丙型肝炎患者的血清,同时检测它们的丙氨酸氨基转移酶(AAT)。结果:1抗-HCV阳性率随着HCV-RNA含量的升高而增高,其阳性率与HCV-RNA含量呈正相关。287例HCV-RNA阳性标本中,有50例ALT异常,其异常率随着HCV-RNA含量的升高而增高,ALT异常率与HCV-RNA含量呈正相关,ALT水平和HCV-RNA含量之间呈正相关。3FQ-PCR检测敏感性为74.4%(87/117),漏检率为25.6%(30/117)。ELISA法检测敏感性为76.9%(90/117),漏检率为23.1%(27/117)。两种方法联合检测敏感性为92.3%(108/117),漏检率为7.7%(9/117)。结论:两种方法联合检测,互相补充,大大提高了丙型肝炎病毒的检出率,为临床早期,准确诊断丙型病毒肝炎、监测病情、观察疗效提供了有力的依据,为献血人员筛选和血制品安全提供了有力保障。