高敏丙型肝炎病毒核糖核酸在丙型肝炎中的诊断价值

目的比较高敏丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)与普通HCV-RNA、丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原检测在丙型肝炎临床诊断中的优势,探讨高敏HCV-RNA在临床诊断和病情监测中的应用价值。方法选择48例HCV抗体阳性的门诊及住院患者作为观察组,另选择同期40例HCV抗体阴性的健康体检者作为对照组。采集所有研究对象5 mL空腹静脉血标本,留取血清。高敏HCV-RNA采用赛沛全自动医用聚合酶链反应(PCR)分析系统检测,普通HCV-RNA采用厦门安普利生物技术有限公司Anadas9850全自动核酸提纯系统及荧光定量PCR分析系统及配套试剂检测,HCV抗体及HCV核心抗原检测采用酶联免疫吸附试验。试验前,先对赛沛高敏HCV-RNA检测进行性能验证。结果高敏HCV-RNA检测性能验证准确度、重复性、线性范围和最低检出限符合要求。高敏HCV-RNA诊断丙型肝炎灵敏度明显高于普通HCV-RNA及HCV核心抗原检测。结论高敏HCV-RNA是丙型肝炎诊断的重要指标,并可用于丙型肝炎治疗终点判断和病情监测。

丙型病毒性肝炎抗体检测与HCV高敏核酸检测对病毒性丙型肝炎的筛查价值研究

目的通过对本院2019年1月至2022年9月需进行手术、输血或其他侵入性医疗服务的住院患者的HCV血清学抗体及高敏HCV RNA筛查结果进行回顾性分析,探讨丙型病毒性肝炎抗体检测与HCV高敏核酸检测对病毒性丙型肝炎的筛查检测价值。方法对本院相关住院患者进行Elecsys Anti-HCV II或(和)高敏HCV RNA检测,统计分析其检测结果。结果HCV血清学抗体检测22443人次,阳性率为0.68%,阳性COI中位数为38.4(1.0~165)。高敏HCV RNA检测34628人次,阳性率0.30%,阳性病毒载量中位数为1.00×10^(6)IU/mL(3.50×10^(1)~4.00×10^(7)IU/mL)。两种方法学均显示45~59岁人群阳性率显著高于其他人群(P<0.001)。两种检测有重合的样本共17785人次,HCV抗体血清学阳性率为0.70%。高敏HCV RNA阳性率0.22%,如以高敏HCV RNA为丙型肝炎现症感染的标准,HCV抗体血清学检测HCV现症感染的灵敏度为100.00%(95%CI 89.09%~100.00%),特异性为99.52%(95%CI 99.41%~99.61%),现症感染阳性预测期PPV为32.00%(95%CI 23.82%~40.18%),阴性预期值为100.00%。HCV抗体血清学检测COI值与高敏HCV RNA检测的病毒载量无线性相关性,COI<10和COI>100的HCV RNA阳性率低。结论HCV抗体检测和高敏HCV RNA均为有效的丙型肝炎筛查手段,需进一步加强对重点人群的丙型肝炎感染管理。

丙型肝炎病毒IgG抗体阳性者确诊丙型肝炎的高危因素分析及列线图预测模型构建

目的分析丙型肝炎(丙肝)病毒(HCV)免疫球蛋白G(IgG)抗体阳性者中确诊HCV的高危因素,同时建立列线图(nomogram)预测模型,为基层医疗机构丙肝的临床诊断和转诊决策提供依据。方法回顾性收集2022年1月—2023年10月住院筛查患者中同时进行HCV\|RNA、HCV-IgG抗体、肝功能和血常规检测HCV-IgG抗体阳性者的人口学特征及丙肝相关各项指标。采用logistic回归分析HCV-IgG抗体阳性者确诊丙肝的高危因素,并构建nomogram模型,分别采用一致性系数和校准曲线评估模型的预测性能和符合度。结果394例HCV-IgG抗体阳性者中,HCV-RNA阳性率为30.2%。多因素logistic分析显示,在HCV-IgG抗体阳性的人群中,HCV-IgG≥5.0 S/CO、天冬氨酸氨基转移酶(AST)>35 U/L和有肝炎相关临床症状为HCV-RNA阳性的独立危险因素,其OR值分别为233.926(95%CI:31.814~1720.046)、4.079(95%CI:2.105~7.904)和5.295(95%CI:1.505~18.634)。用于预测HCV-RNA阳性的nomogram模型准确度为0.923,灵敏度为99.2%,特异度为74.5%。结论基于HCV-IgG抗体、AST和肝炎相关临床症状的nomogram模型具有高准确度,可用于指导临床医生判断HCV-IgG抗体阳性者确诊HCV感染的风险。

关于在远洋船员中开展丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)检测的研究探讨

目的通过调查天津口岸远洋船员的抗HCV-IgG阳性率和HCV RNA检测阳性率的符合度,了解处于传染期的远洋船员占抗HCV-IgG阳性船员的概率。并证明利用酶联免疫吸附实验对远洋船员这一处于狭小、封闭空间的特殊人群进行HCV筛查的局限性,探讨使用更灵敏、准确的技术对船员进行HCV检查,以防止船员由于彼此的密切接触而增加感染风险的重要性。方法利用RT-PCR方法检测38份抗HCV-IgG阳性血清标本和76份阴性血清标本,此标本来自于2012年度于天津国际旅行卫生保健中心进行《国际旅行健康检查证明书》办理的远洋船员。结果 RT-PCR检测结果表明,受检船员中,抗HCV-IgG阳性者RNA检测阳性率为34.21%,抗HCV-IgG阴性者RNA检测阳性率为1.31%。结论由于ELISA方法本身的局限性、HCV感染病程和远洋船员生活环境的特殊性,导致使用酶联免疫吸附实验检测具有一定的局限性,因此需要辅以RNA检测。

丙型肝炎病毒核酸定量测定的临床价值

目的 研究丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)载量与抗-HCV含量以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平之间的相关性与符合性。方法 用FQ-PCR法检测128份怀疑HCV感染的血清中的HCV-RNA,同时检测ALT和抗-HCV。结果 128份样本中HCV-RNA阳性率为53.9%(69/128);抗-HCV阳性率为62.5%(80/128);ALT异常率为51.0%(65/128)。HCV平均载量为8.52×105 拷贝/ml血清。抗-HCV滴度和ALT异常随着HCV-RNA载量升高而增加。结论 用FQ-PCR法检测HCV-RNA可以确定(1)抗HCV与抗-HBs不同,不是中和抗体,(2)高滴度抗-HCV血清具有传染性。(3)抗-HCV滴度与HCV-RNA浓度之间呈正相关性r=0.952, P<0.001,且有符合性和互补性,(4)对慢性丙型肝炎长期抗-HCV阳性,若出现HCV-RNA阴性或阳性可以鉴别活动性、复制性程度,(5)是评价丙型肝炎抗病毒治疗效果的重要指标。

丙型肝炎病毒多表位基因核酸疫苗的构建及其免疫原性

目的 构建丙型肝炎病毒（HCV）多表位基因的真核表达载体pcDNA3.1（-）-CtEm,用该重组质粒免疫BALB/c小鼠,并检测其免疫原性.方法 用BamHⅠ和Hind Ⅲ双酶切含有HCV C区、E2区模拟表位和NS3～NS5区细胞表位串联基因的原核表达载体pQE30-CtEm,克隆入真核表达载体pcDNA3.1（-）,脂质体瞬时转染CHO细胞,并检测其表达.以100 μg重组质粒免疫BALB/c小鼠,检测其体液免疫和细胞免疫效果.结果 所构建的真核表达载体pcDNA3.1（-）-CtEm在CHO细胞中能获得有效表达.该质粒免疫小鼠后可诱导高水平的抗体,特异性淋巴细胞增殖反应、IFN-γ水平及CTL活性均明显高于空载体和生理盐水对照组.结论 已成功构建HCV多表位基因的真核表达载体pcDNA3.1（-）-CtEm,免疫小鼠后可诱导特异性体液免疫和细胞免疫应答.

丙型肝炎病毒抗体联合核酸定量检测对丙型肝炎患者的早期诊断价值研究

目的探讨在丙型肝炎患者早期诊断中丙型肝炎病毒抗体联合丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)检测的临床价值。方法对116例鼓楼医院住院及门诊丙型肝炎患者采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)测定HCV RNA、酶联免疫吸附试验(ELISA)和金标法测HCV抗体、速率法测丙氨酸氨基转移酶(ALT)。结果 116例丙型肝炎患者中,ELISA HCV抗体阳性97例(占83.6%),HCV RNA阳性85例(占73.3%),HCV金标阳性77例(占66.4%),ALT阳性69例(占59.5%),HCV抗体和HCV RNA联合检测总阳性率(指任一指标阳性即为阳性)为100.0%。结论 HCV抗体和HCV RNA联合检测扩大了丙型肝炎检测范围,降低了丙型肝炎的漏诊率,有利于丙型肝炎的早期诊断。

丙型肝炎病毒核酸扩增及微流芯片检测方法的建立

目的建立稳定、可靠的核酸扩增和微流芯片分析法,用于血液中丙型肝炎病毒的检测。方法分别选取经2种酶联免疫吸附试验验证的丙型肝炎阴性(60份)和阳性(200份)血液标本;提取核酸后采用巢式PCR法进行扩增,最后用微流芯片法分析扩增产物。结果经过核酸扩增的丙型肝炎阳性血液经分析后皆出现预期大小片段的特异性条带,而阴性血液缺少相应的条带。结论本次建立的特异性巢式PCR扩增和微流芯片法检测结果可靠,可用于血液筛查。

丙型肝炎病毒核酸定量和抗-HCV血清学分析的诊断价值

目的探讨PCR-荧光探针法与抗-HCV检测在丙型肝炎(丙肝)诊断中的应用价值。方法回顾性分析265例疑似丙肝病毒感染者行HCV-RNA、抗-HCV及ALT检测的资料,统计不同年龄、性别分布情况,进行HCV-RNA与抗-HCV、ALT的相关性分析。结果 (1)男性抗-HCV与HCV-RNA的阳性率均高于女性,但差异无统计学意义(P>0.05);年龄>40岁的患者抗-HCV与HCV-RNA的阳性率明显高于年龄≤40岁的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)ALT异常率随HCV-RNA阳性率的增高而增加,并与HCV-RNA含量成正相关(r=0.999,P<0.05)。但ALT的水平与HCV-RNA含量无相关性(r=0.800,P>0.05)。(3)HCV-RNA阳性多伴有抗-HCV阳性(r=0.320),二者有很好的相关性。结论 ELISA法检测抗-HCV在丙型肝炎诊断中仍旧为首选检测方法。联合应用HCV-RNA和抗-HCV及ALT检测,是诊断丙型肝炎最为可靠的方法。

丙型肝炎病毒抗体阳性人群中抗-HCV、HCV-cAg与HCV-RNA结果的相关性及其联合检测在临床应用价值的评估

目的探讨丙型肝炎病毒抗体阳性人群中抗-HCV、HCV-cAg与HCV-RNA结果的相关性及其联合检测在临床应用的价值,同时界定雅培I2000全自动化学发光仪检测抗-HCV真阳性95%时标本S/CO值的临界点。方法选取全自动化学发光仪检测的抗-HCV阳性血清样本179例(包括11例灰区标本),利用化学发光法检测HCV-cAg,利用RT-PCR法检测HCV-RNA,采用SPSS16.0软件对抗-HCVS/CO值绘制受试者操作特性(ROC)曲线,得到95%真阳性时抗-HCV结果的临界值(S/CO)。再对抗-HCV、HCV-cAg与HCV-RNA进行相关性分析。结果对179例样本进行抗-HCV、HCV-RNA及HCV-cAg的检测,其中HCV-RNA阳性43例,HCV-cAg阳性42例。在43例HCV-RNA阳性的标本中,抗-HCV的阳性检出率为93.02%,HCV-cAg阳性检出率为95.35%。抗-HCV灵敏度为93.02%,特异性为5.88%;HCV-cAg灵敏度为95.35%,特异性为99.26%。且HCV-cAg及抗-HCV阳性率随着HCV病毒含量升高而增高,RNA病毒含量越高,HCV-cAg及抗-HCV的阳性率也越高,差异具有统计学意义(P<0.05)。HCV-cAg联合抗-HCV检测与HCV-RNA的阳性符合率为100%,高于单独检测HCV-cAg或抗-HCV的阳性符合率95.35%、93.02%。以HCV-RNA检测为金标准,当抗-HCV的S/CO值>4.42时,真阳性率可达到95%。结论HCV-cAg与HCV-RNA检测的阳性符合率高达95.35%,故HCV-cAg可作为丙型肝炎早期诊断的特异性指标。为保证标本真阳性率达到95%,建议使用美国雅培I2000仪器进行丙肝抗体检测时,若抗-HCV结果(S/CO)小于4.42的标本,抗-HCV、HCV-cAg与HCV-RNA联合检测可有效降低丙型肝炎窗口期的漏检率,为丙型肝炎的早期发现、早期诊断、早期治疗提供有力证据。

不同混合方式检测丙型肝炎病毒核酸的研究

目的 研究不同混合方式检测丙型肝炎病毒核酸含量 (HCVcDNA)的方法。方法 以未混合标本为对照 ,使用荧光定量PCR(FQ PCR)技术研究提取阶段混合 ,反转录阶段混合以及提取和反转录阶段均混合等不同实验条件下的HCVcDNA含量。结果 提取阶段混合组的HCVcDNA含量与对照组相比未见显著性差异 (P >0 0 5 ) ;反转录阶段混合组以及提取和反转录阶段均混合组的HCVcDNA含量低于对照组 (P <0 0 5 ) ,且在低浓度时出现假阴性结果。阴性标本在提取阶段混合未见假阳性。结论 在对混合血清进行HCVcDNA测定时 ,应将混合安排在提取阶段 ,不宜为增大混合标本数而在提取和反转录阶段均混合。

丙型肝炎病毒核酸定量检测的临床意义

目的 研究丙型肝炎患者血清中的丙型肝炎病毒核糖核酸 (HCVRNA)载量与抗丙型肝炎病毒抗体 (抗 HCV)之间的相关性。方法 用荧光定量 (FQ PCR)法检测 2 0 8例疑诊丙型肝炎患者血清中的HCVRNA ,酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗 HCV。结果 2 0 8例血清样本中HCVRNA阳性率为 81.3 %。HCVRNA平均载量为 4.63× 10 5Copies/ml。结论 FQ PCR法检测HCVRNA是判定HCV感染的直接证据 ,是反映病毒复制与传染性的直接指标 ,有确诊价值与抗病毒治疗疗效评估价值。HCVRNA与抗 HCV具有高度正相关。HCVRNA较抗

丙型肝炎病毒抗体及核酸测定的诊断效能分析

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染患者HCV抗体(HCV-Ab)、HCV核糖核酸(HCV-RNA)水平的变化及其在诊断治疗中的意义。方法随机收集临床诊断为HCV感染患者血清,采用化学发光微粒子免疫检测法测定HCV-Ab,PCR-荧光探针法检测HCV-RNA,同时检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)。根据ALT、AST水平以及HCV-RNA水平分别分为两组,分析比较两组间各指标的变化。同时收集37例临床抗病毒治疗患者的血清,分析治疗前后各指标的变化。结果肝功异常组HCV-Ab、RNA载量对数值水平均高于肝功正常组(P<0.05)。HCV-RNA阳性组HCV-Ab、ALT、AST水平均高于HCV-RNA阴性组(P<0.05)。HCV-Ab、RNA载量对数值诊断丙型肝炎的ROC曲线下面积分别为0.990、0.838。连续观察病例治疗后ALT、AST、RNA载量对数值水平均较治疗前下降(P<0.05);而HCV-Ab治疗前后差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HCV-Ab对于丙型肝炎的诊断效能优于RNA载量对数值。ALT、AST及HCV-RNA检测在丙型肝炎治疗监测过程中有重要临床意义。

丙型肝炎病毒核酸定量检测的临床应用

本文采用实时荧光定量PCR方法对158例丙型肝炎抗体阳性患者的血清HCV RNA进行检测,探讨血清HCV RNA水平与患者肝功能损害情况的关系。1对象和方法1.1对象丙型肝炎抗体检测结果为阳性的病例标本共158例（男88,女70）,均来自我院门诊或住院病人,年龄（15～88）岁,平均（46.13±17.24）岁。以上病例血清的乙型肝炎、甲型肝炎、戊型肝炎及丁型肝炎病毒标志物均为阴性。

丙型肝炎病毒抗体阳性患者HCV-RNA与ALT结果分析

目的研究丙型肝炎病毒抗体阳性患者丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)、丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测结果分布特点及相关性。方法收集北京同仁医院2018年1月至2021年6月HCV-Ab阳性患者HCV-Ab、HCV-RNA、ALT检测数据,运用统计学方法分析三者数据分布特点及相关性,以及HCV-RNA阳性患者与HCV-RNA阴性患者HCV-Ab检测值与ALT水平分布特点。结果患者个体HCV-Ab检测值、HCV-RNA与ALT水平三者之间不存在明显的相关性,但将三者实验数据按检测值的高低、阴阳性以及异常率进行分组仍然存在一定的规律。HCV-RNA阳性患者的HCV-Ab检测值高于阴性患者,预测HCV-RNA阳性的最佳HCV-Ab阈值为10.34(S/CO)。患者ALT异常率、HCV-RNA阳性率随HCV-Ab检测值分组的升高有升高的趋势。ALT异常率与患者HCV-RNA阴阳性有关,但与HCV-RNA水平分组无关。结论患者HCV-Ab检测值对预测HCV-RNA阴阳性有较大的应用价值,HCV-Ab检测值升高和HCV-RNA阳性的患者发生ALT异常的可能性更大,临床可对三者实验结果进行预判和印证。

丙型肝炎病毒核酸疫苗的免疫效果观察

将丙型肝炎病毒Ｃ＋Ｅ１区基因克隆到不同的真核细胞表达载体ｐＣＤＮＡ３．１（＋）和ｐＳＶＬ中，通过肌肉注射和皮下注射免疫ＢＡＬＢ／Ｃ及Ｆ１小鼠后，产生了抗ＨＣＶ／Ｃ区抗体。其中核酸疫苗ｐｃＤＮＡ３．１－ＨＣＶ／Ｃ＋Ｅ１的免疫高峰的出现早于ｐＳＶＬ－ＨＣＶ／Ｃ＋Ｅ１，Ｆ１小鼠的抗体应答强于ＢＡＬＢ／小鼠。肌肉注射优于皮下注射。

荧光定量PCR法在丙型肝炎病毒核糖核酸检测中的应用

目的：通过与荧光半定量PCR及传统逆转录PCR（RT-PCR）比较,探讨荧光定量PCR（FQ-PCR）在丙型肝炎病毒核糖核酸（HCV RNA）检测中的应用价值。方法：采用FQ-PCR、荧光半定量PCR及RT-PCR三种方法同步检测180例丙型肝炎患者HCV RNA含量,所得结果采用χ^2检验。结果：FQ-PCR在血浆中及单个核细胞中的阳性检出例数最多,分别占78.3%和83.7%。无论是在血浆中或单个核细胞测定,FQ-PCR阳性检出率均明显高于同步检测的荧光半定量PCR及RT-PCR（P〈0.01）。以RT-PCR为标准,当HCV RNA水平在10^3～5copies/ml时,FQ-PCR和荧光半定量PCR阳性检出水平相一致（P〉0.05）,明显高于RT-PCR（P〈0.01）。当HCV RNA水平在10^6～7cop-ies/ml时,3种检测方法的阳性检出率基本相同（P〉0.05）。结论：FQ-PCR检测HCV RNA具有高灵敏度、高特异性,且二次污染的可能性小。

丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸含量与丙型肝炎病毒抗体和丙氨酸氨基转移酶的相关性

[目的]探讨丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒核酸(HCV RNA)含量与丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)间的相关性.[方法]采用实时荧光定量PCR检测302例丙型肝炎患者血清中HCV RNA含量,同时采用ELISA法检测抗-HCV水平,利用全自动生物化学检测仪测定ALT水平.[结果]302例丙型肝炎患者血清标本中,抗-HCV均呈阳性,其中199份标本HCV RNA含量高于检测上限(103 U/mL),2种检测方法的符合率为65.9%.ALT异常率随HCV RNA含量的增高而升高,两者呈显著正相关(r=0.155,P<0.05);而ALT水平变化与HCV RNA含量无相关性(r=0.001,P>0.05).[结论]HCV RNA含量与抗-HCV水平是诊断HCV感染的重要指标,HCV RNA含量结合ALT水平测定可帮助临床了解HCV在体内复制的状况及肝脏损伤情况.

血浆丙型肝炎病毒核酸稳定性的研究

目的:建立血浆丙型病毒性肝炎病毒(HCV)核酸的稳定保存方法,提高荧光定量聚合酶链反应(FQ鄄PCR)检测的准确性。方法:HCV混合血浆以TRIZOL提取病毒核酸,分别保存于70%乙醇溶液及溶解于焦碳酸二乙酯(DEPC)水中,在4℃放置不同时间后,以FQ鄄PCR检测HCVRNA拷贝数。HCVRNA冻干质控品溶解于DEPC水并提取核酸后同时测定作为对照。另外,对保存的HCVRNA稀释后作线性分析。结果:未提取核酸的病毒血浆及70%乙醇溶液中的HCVRNA在4℃保存8d后,病毒核酸拷贝数无明显改变。HCVRNADEPC水溶液在4℃放置30min后即发现拷贝数降低,5h后下降为零。质控品测定值无明显降低。在70%乙醇溶液中保存的HCVRNA稀释后测定值具有线性(r=0.9991)。结论:病毒在血浆及70%乙醇溶液中保存,其核酸可以在4℃稳定保存至少8d并具有良好的线性。病毒核酸DEPC水溶液在4℃易发生降解。