0.1%Pt-0.02%Pd/不锈钢整体催化剂上丙酮氧化性能及稳定性(英文)

制备了0.1%Pt-0.02%Pd/不锈钢整体催化剂。选取不锈钢为该催化剂的载体,可克服传统γ-Al2O3和堇青石蜂窝载体热稳定性差的缺点。采用阳极氧化技术在不锈钢上自生长了结构致密的多孔阳极氧化膜,并在其上负载Pt和Pd制备得到挥发性有机物(VOCs)净化催化剂。结果表明,经500、800和1000℃不同温度焙烧后,该催化剂完全氧化丙酮的温度分别为160、160和200℃。该催化剂表现出以下优点:(a)高温稳定性能好;(b)低温催化活性高;(c)贵金属负载量低。通过SEM和EDX等技术对该催化剂的结构及活性组分分散情况进行了表征。

Cu-Mn复合氧化物的结构表征及丙酮氧化性能

本文采用共沉淀法制备了铜锰复合氧化物。采用Raman,XRD手段考察了复合氧化物的结构并与催化剂的丙酮完全氧化活性进行了关联。单组分Mn-O样品的晶相结构为MnO2和Mn3O4,而双组分的Cu-Mn-O样品只检测到晶相CuO,Cu含量较高时Cu-Mn-O样品没有检测到Raman谱峰,表明样品表面主要以MnO2为主。当Cu/Mn原子比为41∶时,催化剂活性最高,推测表面MnO2物种是丙酮氧化的主要活性相。

木犀草素抑制丙酮酸铁氧还蛋白氧化还原酶及其抗艰难梭菌作用研究

目的考察木犀草素对丙酮酸铁氧还蛋白氧化还原酶(PFOR酶)的抑制作用及其抗艰难梭菌活性。方法将艰难梭菌PFOR编码序列克隆至表达载体pET-2a,转染至感受态大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(Isopropylβ-D-Thiogalactoside,IPTG)诱导表达后进行粗酶液制备。40μmol·L^(-1)待测化合物与PFOR酶在厌氧25℃条件反应8 h后,测定待测化合物对PFOR酶的抑制率。通过对菌液OD_(600)的考察,测定PFOR酶强抑制剂对艰难梭菌细菌(ATCC BAA 1382和ATCC BAA 1870)的最小抑菌浓度(MIC)。借助分子对接技术考察PFOR-抑制剂间可能的相互作用机制。结果在所测化合物中,黄酮木犀草素对PFOR的抑制活性最强,单点抑制率约为33%,与阳性抑制剂硝唑尼特的抑制率(40%)相当。分子对接发现木犀草素可与PFOR结构域中的Asp428、Val431、Gly429、Asp456、Lys458、Lys459等形成氢键。木犀草素对艰难梭菌的MIC约为32μg·mL^(-1)。结论木犀草素具有较好的抗艰难梭菌活性,PFOR酶可能是其抗菌作用靶点。

优化稳定剂提高丙酮酸氧化酶稳定性的研究

来自绿色气球菌的丙酮酸氧化酶被广泛用于食品工业、医药工业及生物检测等方面,但其多聚体结构会导致酶稳定性低,因此提高丙酮酸氧化酶的稳定性有助于丙酮酸氧化酶的推广和应用。首先筛选了醇类、糖类和离子稳定剂,进而优化了稳定剂复配组成。结果表明:在4℃、pH 6.0的条件下,含有0.01 mmol/L CuSO4、30 g/L甘油和90 g/L PEG2000的复合稳定剂能够将丙酮酸氧化酶活性提升为对照组的1.5倍。丙酮酸氧化酶稳定性的提高归因于丙酮酸氧化酶亚基之间连接的强化,它们之间形成了更多有活性的四聚体。最后,添加复合稳定剂的丙酮酸氧化酶在-20℃下储存28 d后仍能保持46.7%的酶活。可见,复合稳定剂能显著提高丙酮酸氧化酶的稳定性,有利于丙酮酸氧化酶的更广泛应用。

离子交换树脂Amberlyst-35催化合成过氧化乙酰丙酮及其热稳定性

采用单因素法和正交实验设计法,以离子交换树脂Amberlyst-35为催化剂,由质量分数为50%的双氧水氧化乙酰丙酮合成过氧化乙酰丙酮。当双氧水与乙酰丙酮的物质的量的比为1.1,Amberlyst-35与乙酰丙酮的质量比为0.05,在20℃下反应4.5 h时,过氧化乙酰丙酮的活性氧质量分数为12.4%,主要产物为3,5-二羟基-3,5-二甲基-1,2-二氧戊环和5-氢过氧基-3-羟基-3,5-二甲基-1,2-二氧戊环,其分解热为1.64 kJ/g,分解活化能为70 kJ/mol。该法与传统的均相催化合成相比,制备条件温和,催化剂可循环使用,产品活性氧含量高。

血链球菌丙酮酸氧化酶基因表达克隆的构建与鉴定

目的 构建血链球菌丙酮酸氧化酶基因 Sopox的表达质粒 ,为研究丙酮酸氧化酶基因 Sopox表达的调节奠定基础。方法 将从血链球菌 ATCC10 5 5 7克隆的丙酮酸氧化酶基因 Sopox重组到 p BV2 2 0 ,表达载体 ,并转化入大肠杆菌 E.coli JM10 5 ,观察 Sopox基因在大肠杆菌中的表达。结果 通过酶切后电泳鉴定 ,Sopox基因重组入 p BV2 2 0并转化入 E.coli JM10 5 ;经 42℃诱导后 ,SDS- PAGE显示 p BV2 2 0 / Sopox/ JM10 5表达分子量约为6 5 kd的蛋白 ,与根据 Sopox基因 DNA序列预测的蛋白分子量一致 ;p BV2 2 0 / Sopox/ JM10 5的蛋白表达在 42℃诱导 4小时后达高峰。结论 丙酮酸氧化酶基因 Sopox已被成功地克隆到 p BV2 2 0 ,并在 E.coli JM10

丙酮酸氧化酶法测定血浆中丙酮酸及临床初步应用

目的 建立一种新的丙酮酸氧化酶偶联比色法测定血浆丙酮酸。方法 利用丙酮酸氧化酶氧化丙酮酸生成过氧化氢 ,过氧化氢与 2 ,4 ,6-三溴 - 3 -羟基苯甲酸和氨基安替比林在过氧化物酶的作用下生成红色化合物。结果 该法线性范围达 10 0 0 μmol/L ,批内和批间平均变异系数分别为 1 77%和 2 2 3 % ,平均回收率 99 9% ,与紫外酶偶联法比较 ,相关系数r =0 .9986,y=1.0 0 3x + 0 .85 4 ,4 0例健康人血浆丙酮酸 3 2～ 10 4 μmol/L( x± 2S) ,15例糖尿病患者的血浆丙酮酸为 88 4 5± 3 1 98μmol/L。 结论 该方法具有灵敏、准确、简便、快速等优点。糖尿病患者血浆丙酮酸水平显著高于正常对照组 (P <0 0 1)。

口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因的克隆和序列分析

目的 阐明血链球菌产生过氧化氢及其调节的分子机理。方法 根据已知的肺炎链球菌丙酮酸氧化酶基因 (spx B)序列设计 PCR引物 ,扩增血链球菌 ATCC10 5 5 7的丙酮酸氧化酶基因 ,以 p U C18及 M13mp18、M13m p19为载体进行克隆和亚克隆 ,并进行序列分析。结果 成功地从血链球菌 ATCC10 5 5 7扩增出丙酮酸氧化酶基因 ,获得该基因的全部序列 (1788bp) ,具有完整的开放读框 ,能编码 5 91个氨基酸的多肽。结论 血链球菌丙酮酸氧化酶基因的克隆和序列分析 。

对羟基苯基丙酮酸双氧化酶抑制剂筛选方法研究进展

对羟基苯基丙酮酸双氧化酶(HPPD)是植物体正常生长所必需的质体醌和生育酚生物合成路径中的关键酶,已成为当前最重要的除草剂作用靶标之一。发展快速、可靠的HPPD抑制剂筛选方法对研究小分子化合物与HPPD之间的相互作用,以及开展基于靶酶结构的新型HPPD抑制剂设计均具有重要意义。结合HPPD的结构和功能,文章从生物分析的角度分别就高效液相色谱、同位素标记、偶联法、电化学及简易筛选模型等方法在HPPD抑制剂筛选中的运用进行了总结,并对发展HPPD抑制剂的高通量筛选方法进行了展望。

对羟苯基丙酮酸双氧化酶抑制剂的研究进展

本文对对羟苯基丙酮酸双氧化酶抑制剂(HPPD)的发现、作用机制、结构与活性、合成方法及主要新品种加以概述。

产丙酮酸氧化酶重组大肠杆菌的发酵过程质粒稳定性研究

研究了碳源、温度、溶氧、pH值及外源丙酮酸氧化酶表达对重组大肠杆菌DH5α/pSML-PyOD质粒稳定性的影响.结果表明,以甘油为碳源,37℃,装液量10%~15%条件下重组菌质粒稳定性最好.当发酵过程中体系pH值在6~7之间时,质粒稳定性较高,但当pH提高至7.5时,质粒稳定性会有所下降,重组菌在低pH值条件下有利于产丙酮酸氧化酶.外源蛋白表达使得重组菌质粒稳定性有所下降.

重组大肠杆菌表达绿色气球菌丙酮酸氧化酶的条件优化

本文优化了表达绿色气球菌丙酮酸氧化酶的重组大肠杆菌的诱导条件。优化了诱导温度、诱导剂IPTG浓度、诱导时重组大肠杆菌的浓度、溶氧等条件后发现最佳的诱导条件为25℃、IPTG 0.5 mmol/L、OD_(600)0.5细胞浓度、250 m L摇瓶中50 m L发酵液。该条件下重组大肠杆菌诱导24 h后最终的丙酮酸氧化酶活力达到7 396.9 U/L,与优化前相比提高了4倍,是目前报道的最高水平。本研究结果为大肠杆菌大量表达有活性的丙酮酸氧化酶,以及丙酮酸氧化酶的生产应用奠定了基础。

丙酮酸氧化酶在压力下的解离

本文通过测定丙酮酸氧化酶内源荧光谱和荧光偏振的变化研究了该酶在1—2200bar压力下的解离。研究结果表明,在压力作用下酶的辅基FAD不可逆地从酶分子上解离下来,并因此引起酶的失活;酶亚基在压力下的解离是可逆的,在5℃,pH7.6条件下,该酶的解离自由能⊿G°为29.89k cal/mol,解离标准体积变化⊿V°为-220ml/mol。脱辅基丙酮酸氧化酶的解离自由能为24.93k cal/mol,证明FAD对酶有稳定作用;⊿V°则为-153ml/mol,减少了近30％,表明FAD对亚基间的空间大小有很大贡献。经胰凝乳蛋白酶部分酶解所活化的酶的解离⊿G°和⊿V°均有所增加,底物丙酮酸亦有相同的影响。研究还表明,碱性pH条件能促进丙酮酸氧化酶的解离。在此研究中,我们也观察到了Weber和Ruan在乳酸脱氢酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶等研究中报道的"conformational drift"现象。

酶标仪上丙酮酸氧化酶法测定血清ALT

血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定是常用肝功能试验之一,近年来,国内医院已引进大批自动生化分析仪,多采用了速率法作ALT测定.

对羟基苯基丙酮酸双氧化酶及其抑制剂的研究进展

对羟基苯基丙酮酸双氧化酶(4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase,HPPD)是一种亚铁非血红素酶,在酪氨酸分解代谢中起到重要作用.本文综述了除草剂的新靶标HPPD及相关抑制剂的结构、活性以及作用机制.综述了HPPD作用机理的相关研究,并对该领域的发展方向做了展望.

血清唾液酸丙酮酸氧化酶测定新法的研究及应用

目的探讨建立一种血清唾液酸测定的新方法以及临床应用。方法应用N-乙酰神经氨酸酶、丙酮酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、N-乙酰神经氨酸醛缩酶、过氧化物酶与色原系统3-甲基-N-乙基(β-羟乙基)苯胺、4-氨基安替比林进行血清唾液酸浓度的酶法测定。结果磷酸盐缓冲液最适浓度为50mmol/L、pH 7.2,最大吸收峰值为510nm,线性范围为0～4 500mg/L,显色稳定。精密度为批内(n=30)变异系数(CV)=1.90%～3.3%,批间(n=30)CV=1.98%～3.5%,回收率为95.2%～105.1%,平均回收率为99.6%。与酶偶联速率法比较,相关系数(r)=0.996,回归方程Y=1.028 X+0.40,两法高度相关,正常参考值范围50～90mg/L。结论该方法具有高度的特异性和准确性,操作简便、灵敏快速、标本用量少、结果稳定,适用于全自动、半自动生化分析仪,更适用于中小型医院,有较高的推广使用价值。

丙酮酸氧化酶在临床生化检验中的应用

阐述了丙酮酸氧化酶的来源、特性、基因克隆和在临床生化检验中的应用,包括丙酮酸、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、丙酮酸激酶、无机磷酸、3-巯基丙酮酸转硫酶和尿素等的测定.