丙酮酸激酶M2蛋白、葡萄糖转运蛋白-1在胃腺癌中的表达意义

目的探讨丙酮酸激酶M2(PKM2)蛋白、葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)在胃腺癌中的表达意义。方法选取收治的胃腺癌患者132例作为研究对象,取癌组织作为观察组、癌旁组织作为对照组,对比两组及不同TNM分期PKM2蛋白、GLUT-1表达水平,分析其在胃癌组织中的表达意义。结果观察组PKM2蛋白阳性表达率为75.76%(100/132)、GLUT-1阳性表达率为78.79%(104/132),高于对照组的9.09%(12/132)、10.61%(14/132),差异显著(P<0.05);Ⅳ期PKM2蛋白、GLUT-1阳性表达率高于Ⅲ期,Ⅲ期高于Ⅱ期,Ⅱ期高于Ⅰ期(P<0.05);经Spearman分析,PKM2蛋白、GLUT-1阳性表达率与TNM分期呈正相关(P<0.05)。结论 PKM2蛋白、GLUT-1表达水平与胃腺癌TNM分期关系密切,检测二者表达水平可为临床诊断及预后评估提供数据支持。

白藜芦醇通过调控雷帕霉素靶蛋白/M2型丙酮酸激酶轴抑制口腔鳞状细胞癌细胞的糖酵解作用

目的:通过雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)/M2型丙酮酸激酶(M2 isoform pyruvate kinase,PKM2)轴探讨白藜芦醇对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞的糖酵解的影响。方法:培养CAL-27和SCC-15细胞,采用不同浓度白藜芦醇(0、50、100、200、400、800 μmol/L)分别处理细胞24 h,噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测其对细胞增殖的影响并计算半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC 50 )值。选用250 μmol/L白藜芦醇或10 nmol/L mTOR抑制剂Rapamycin干预细胞 24 h ,采用2-脱氧葡萄糖类似物[(2-deoxy-2-[(7-nitro-2,1,3-benzoxadiazol-4-yl)amino]-D-glucose,2-NBDG]法检测细胞葡萄糖摄取率;比色法检测细胞上清中乳酸含量、细胞内糖酵解关键酶己糖激酶(hexokinase,HK)和丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)活性;Western blot检测细胞中己糖激酶2(hexokinase2,HK2)、PKM2、mTOR和磷酸化mTOR(phosphorylation mTOR,p-mTOR)等蛋白表达情况。结果:白藜芦醇对两株OSCC细胞的增殖有明显的抑制作用( P <0.05),并呈现浓度依赖性。白藜芦醇可显著抑制两株OSCC细胞的葡萄糖摄取能力以及降低乳酸的产生量( P <0.05),并可抑制两株细胞PK活性( P <0.05)、下调PKM2蛋白的表达( P <0.05),但对HK活性及HK2蛋白的表达无显著影响( P >0.05)。同时,白藜芦醇干预还可显著降低细胞内p-mTOR水平( P <0.05)。另外,Rapamycin干预也可抑制两株细胞的葡萄糖摄取能力、降低细胞上清中乳酸的产生量和细胞内p-mTOR水平,同时也可下调PKM2蛋白的表达。结论:白藜芦醇可抑制OSCC细胞的糖酵解作用,其机制可能与抑制mTOR/PKM2轴通路相关。