丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症1家系2例临床及遗传特点

丙酮酸脱氢酶复合物(pyruvate dehydroge-nase complex,PDHC)是一种分布于线粒体基质中的多酶复合体,通过催化丙酮酸的氧化脱羧反应生成乙酰辅酶A,有效连接糖酵解和三羧酸循环[1]。原核生物和真核生物的PDHC含有6种酶,丙酮酸脱羧酶(pyruvate decarboxylase,简称E1)、二氢硫辛酰胺乙酰转移酶(dihydrolipoamide acetyltransferase,简称E2)和二氢硫辛酰胺脱氢酶(dihydrolipoamide dehydrogenase,简称E3)是组成PDHC最关键的3种酶。

用ELISA检测抗丙酮酸脱氢酶复合物E2和E3结合蛋白自身抗体

目的 用重组丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位和E3结合蛋白 (PDC E2 ,PDC E3BP)建立筛查原发性胆汁性肝硬化 (PBC)患者相应自身抗体的ELISA。方法 用本室制备的重组PDC E2和PDC E3BP蛋白包被酶联反应板 ,检测PBC患者、正常人及其他肝病患者血清。结果 组建成筛查PBC患者血清中自身抗体的试剂盒 ,能够准确地检测PBC患者血清中的自身抗体。结论 建立的试剂盒能用于PBC患者血清中丙酮酸脱氢酶复合物自身抗体的检测。

丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位重组蛋白体外刺激PBC患者PBMCs实验研究

目的:初步探讨丙酮酸脱氢酶复合物的E2亚单位(PDCE2)与原发性胆汁性肝硬化(PBC)发病机制间的关系.方法:用纯化的PDCE2重组蛋白体外刺激PBC患者外周血单个核细胞(PBMCs);3HTdR掺入法检测PBMCs增殖情况;ELASA法检测细胞上清中TNFα含量.结果:11例M2抗体阳性和1例AMA阳性的PBC患者中有8例出现不同程度PBMCs增殖,而2例AMA和M2抗体均阴性的PBC患者和4例AIH患者PBMCs均无增殖.11例M2抗体阳性的PBC患者刺激后TNFα分泌均明显增加.结论:PBC患者外周血中存在针对PDCE2的自身反应性T细胞;TNFα可能在PBC的病理损伤中发挥重要作用.

用重组丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位检测M2抗体及其临床意义

目的用重组表达的丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位(PDC-E2)检测M2抗体,以利于原发性胆汁性肝硬化(PBC)的早期诊断。方法采用重组表达的PDC-E2建立了免疫印迹法(IBT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)。检测40例PBC患者血清的M2抗体,以其他肝病患者、自身免疫病患者、健康体检者作对照。结果40例PBC患者血清中检测出抗PDC-E2抗体阳性37例,阴性3例,阳性率为92.5%,而疾病对照组和健康体检者血清中该抗体检测均为阴性。结论用重组表达的人PDC-E2检测抗体有较好的敏感性和特异性,有助于PBC的临床诊断。

丙酮酸脱氢酶复合物X蛋白的原核表达与血清学鉴定

目的获得丙酮酸脱氢酶复合物的X蛋白(Pro-X)的原核表达蛋白。方法采用RT-PCR技术从人淋巴细胞RNA中扩增出Pro-X的基因片段,克隆至pET28a(+)表达载体进行诱导表达,并对表达产物进行Western blot和ELISA鉴定。结果成功构建了表达载体pET28a(+)/Pro-X;表达产物能特异性的被原发性胆汁性肝硬化(primary bili-ary cirrhosis,PBC)患者血清中的抗线粒体抗体识别。结论获得Pro-X蛋白的原核高效表达,为利用原核表达的丙酮酸复合物对PBC患者进行血清学检测进一步奠定了基础。

丙酮酸脱氢酶复合物缺陷Leigh综合征2例临床及PDHA1基因分析

目的探讨PDHA1基因突变所致丙酮酸脱氢酶复合物E1α亚单位缺陷Leigh综合征的临床特点及诊断和治疗。方法回顾分析2例因发育落后就诊,磁共振扫描提示Leigh综合征,并经生化代谢及基因检测确诊患儿的临床资料。结果 2例男性患儿分别于1岁1个月、4个月就诊,发育落后,肌张力障碍,肌力低下;头颅磁共振检查发现双侧基底节区对称性损害;血清丙酮酸、乳酸明显增高,血氨基酸及酯酰肉碱谱无异常。基因分析发现2例患儿X染色体PDHA1基因分别存在c.615C>G、c.605A>G错义突变,均为未报道的新突变,证实为丙酮酸脱氢酶复合物E1α亚单位缺陷所致Leigh综合征。结论 PDHA1基因突变患儿临床表现复杂多样,对于不明原因的发育落后儿童,应注意线粒体病的可能,基因检测有助于诊断、治疗及遗传咨询。

脑胶质瘤组织中肿瘤坏死因子受体1、丙酮酸脱氢酶复合物E2的表达变化及其临床意义

目的观察脑胶质瘤组织中肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)、丙酮酸脱氢酶复合物E2(PDC-E2)的表达变化,并探讨其临床意义。方法脑胶质瘤患者79例,均接受手术治疗,术中留取脑胶质瘤组织及癌旁组织,采用免疫组织化学法检测脑胶质瘤组织及癌旁组织中TNFR1、PDC-E2,计算阳性表达率,分析脑胶质瘤组织中TNFR1、PDC-E2阳性表达的相关性及其与脑胶质瘤患者临床病理参数的关系。根据脑胶质瘤组织中TNFR1、PDC-E2检测结果,将患者分为TNFR1阳性表达组、TNFR1阴性表达组和PDC-E2阳性表达组、PDC-E2阴性表达组,分析TNFR1、PDC-E2阳性表达与脑胶质瘤患者预后的关系。结果脑胶质瘤组织中TNFR1、PDC-E2阳性表达率分别为70.89%、64.56%,癌旁组织中分别为36.70%、46.83%,两者相比,P均<0.05。脑胶质瘤组织中TNFR1、PDC-E2阳性表达呈正相关关系(r=0.653,P<0.05)。TNFR1、PDC-E2阳性表达与脑胶质瘤患者肿瘤直径、WHO肿瘤分级有关(P均<0.05),而与年龄、性别、病理类型、侵犯脑叶数无关(P均>0.05)。TNFR1阳性表达组5年生存率为30.36%,TNFR1阴性表达组5年生存率为65.22%,两组相比,P<0.05。PDC-E2阳性表达组5年生存率为31.37%,PDC-E2阴性表达组5年生存率为57.14%,两组相比,P<0.05。结论与癌旁组织相比,脑胶质瘤组织中TNFR1、PDC-E2阳性表达率升高;脑胶质瘤组织中TNFR1、PDC-E2阳性表达呈正相关关系,并与肿瘤直径、WHO肿瘤分级有关,TNFR1、PDC-E2阳性表达的脑胶质瘤患者术后生存率较低。

丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症1例

丙酮酸脱氢酶复合物（pyruvate dehydrogenase complex,PDHc）是糖有氧氧化的限速酶,其不可逆的催化由糖酵解反应生成的丙酮酸为乙酰Co A,后乙酰Co A参与到三羧酸循环中氧化磷酸化产生能量。PDHc缺乏症是一种较罕见的遗传代谢性疾病,由于基因突变造成丙酮酸代谢障碍,导致乳酸堆积和能量生成障碍,临床常表现为乳酸酸中毒,神经发育迟滞,肌张力低下等.

细胞角蛋白19血清片段211、丙酮酸脱氢酶复合物E1α亚单位在非小细胞肺癌患者中的表达及意义

目的 分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者细胞角蛋白19血清片段211(Cyfra211)、丙酮酸脱氢酶复合物E1α亚单位(PDHA1)的表达及临床意义。方法 收集2017年3月至2020年3月我院收治的139例NSCLC患者癌组织标本(癌组织组)及远离癌组织3 cm的癌旁正常组织(对照组)。分析不同特征NSCLC患者Cyfra211、PDHA1表达及患者预后情况。结果 癌组织组Cyfra211阳性表达率及PDHA1阴性表达率高于对照组(P<0.05);低分化、Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移NSCLC患者Cyfra211阳性率及PDHA1阴性率更高(P<0.05);139例患者中死亡84例,生存55例,死亡NSCLC患者Cyfra211阳性率、PDHA1阴性率均高于生存患者(P<0.05);Cyfra211、PDHA1联合检测AUC、灵敏度、特异度均显著高于单一检测(P<0.05)。结论 Cyfra211、PDHA1C联合检测在NSCLC病情、预后评估中的作用更加可靠有效,可为NSCLC患者临床治疗指导及预后评估提供更好的参考依据。

丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症一例的临床特点及基因检测

目的 分析1例丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症患儿的临床表现及其基因突变特点.方法 对广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心2013年9-12月确诊的1例丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症患儿临床症状、体征特点、生化检测结果、治疗效果进行分析,运用PCR法扩增外周血PDHA1基因的11个外显子及与内含子拼接区,对扩增片段采用直接测序方法检测突变.通过PDHA1基因分析,确诊丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症.结果 患儿男,2岁4个月,反复发作性双下肢无力1年余,间断出现抬头无力,独坐不稳,不能独站,持续性高乳酸血症.血乳酸5.37 mmol/L,丙酮酸0.44 mmol/L,乳酸/丙酮酸12.23,脑MRI提示双侧基底节苍白球条状异常信号,T2WI和T2WIFlair高信号.PDHA1基因分析显示,c.788G＞A（p.R263Q）突变,确诊丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症.给予生酮饮食、维生素B1、辅酶Q10和左旋肉碱治疗,病情稳定.结论 PDHA1突变所致的丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症临床表现复杂多样.PDHA1基因出现c.788G＞A（p.R263Q）突变.对不明原因的肢体无力、高乳酸血症,可通过基因分析诊断.合理治疗可以稳定病情.

丙酮酸脱氢酶复合物E_2亚单位的克隆表达与临床应用

目的 构建丙酮酸脱氢酶复合物的E2亚单位(PDC-E2)的表达载体。方法 采用逆转录聚合酶链反应技术从人淋巴细胞中扩增出PDC-E2的基因片段,克隆至pExSecI表达载体进行诱导表达,并对表达产物进行western blot和酶联免疫吸附法鉴定。 结果 成功构建了表达载体pExSecI/PDC-E2;表达产物能特异性的被原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者血清中的自身抗体识别。 结论 获得PDC-E2蛋白的高效表达,为利用原核表达PDC-E2对PBC患者进行血清学检测奠定了基础。

以呼吸心跳骤停为突发表现的丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症一例

目的探讨以呼吸心跳骤停为首发表现的丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症患儿的临床、影像学特点及基因分析。方法对2017年深圳市宝安区妇幼保健院因突发呼吸心跳骤停就诊的1例丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症患儿的临床特征、影像学资料进行总结,以"丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症"、"PDHA1"等为关键词,查阅PubMed数据库、中国知识基础设施工程(CNKI)数据库、万方数据库建库至2019年3月相关文献,对国内报道的病例进行总结。结果先证者男,2个月10 d,感染后突发呼吸心跳骤停,伴高乳酸血症,难以纠正的代谢性酸中毒。头颅MRI检查提示:(1)双侧大脑基底节区异常信号,符合Leigh病影像学改变;(2)左侧室管膜下少许出血。脑电图提示异常放电。线粒体病相关基因检测提示PDHA1基因存在c.1132C>T,p.H378C半合突变。患儿于1岁时死亡。结论丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症多以神经系统症状起病,以心跳呼吸骤停为突发表现的报道罕见,及时心肺复苏、呼吸机支持能暂时挽救生命,为原发病治疗争取时间,但最终预后差,病死率高。PDHA1基因c.1132C>T,p.H378C变异是其致病原因。

丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症一例并文献复习

目的 了解丙酮酸脱氢酶复合体(pyruvate dehydrogenase complex,PDHc)缺乏症患儿的临床表现及其基因特点.方法 分析汕头大学医学院第一附属医院2015年3月确诊的1例丙酮酸脱氢酶复合体缺乏症患儿的临床表现,血生化特点及基因改变并进行文献复习.结果 2岁男性患儿,因神疲气促5h入院,查体四肢肌张力稍低,肌力可,呼吸深大,持续高乳酸血症,头颅磁共振提示双侧脑室体后部旁、内囊后肢、双侧小脑半球下部白质区及延髓见斑片状等稍长T1长T2/FLAIR呈稍高信号影.通过基因测序得出患儿PDHA1基因1个纯合突变,基因家系分析,其母亲有一个杂合突变.给予纠酸治疗,确诊后予生酮饮食,硫胺素治疗,患儿病情好转.结论 丙酮酸脱氢酶复合体缺乏症临床表现复杂,诊断困难,头颅磁共振及基因分析对该病的确诊有较好的诊断价值.

丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症1例临床和影像特点及基因分析

丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症(pyruvate dehydrogenase complex deficiency disease,PHD)是一种线粒体能量代谢异常的遗传性疾病,基因突变引起丙酮酸脱氢酶复合物(pyruvate dehydrogenase complex,PDHc)活性下降,导致丙酮酸代谢障碍,造成机体能量生成不足和乳酸堆积,进而出现神经系统结构和功能损害。PHD婴幼儿期发病多见,临床表现复杂,可出现持续高乳酸血症、间歇性肌无力或共济失调、运动发育迟缓、慢性神经病变等[1]。国内仅有少量个案报道[2-4]。本文回顾性分析1例PHD患儿的临床表现、实验室检查和头颅MRI特征、家系基因分析及诊治过程,以期为该病的诊治提供依据,报道如下。

丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症的研究现状

丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症是线粒体能量代谢异常的遗传性疾病,是由基因突变引起丙酮酸脱氢酶活性降低的一组疾病.该病临床表现复杂多样,诊断困难,酶检测和基因突变分析可协助诊断.该文介绍了近年来丙酮酸脱氢酶复合体缺乏症的国内外研究,以期提高对本病的认识,减少漏诊、误诊,促进早期治疗,改善预后.

利用丙酮酸脱氢酶复合物原核表达产物检测原发性胆汁性肝硬变患者血清自身抗体

目的 建立一种利用重组表达的丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位(PDC-E2)和E3结合蛋白(PDC-E3BP)检测原发性胆汁肝硬变(PBC)患者血清的方法。方法 以适当的条件诱导PDC-E2和PDC-E3BP表达质粒pExSecI/PDC-E2和pET28/E3BP,利用表达产物通过酶联免疫吸附试验检测PBC、正常人及其他原因肝硬变患者血清,并与欧盟的检测试剂盒比较。结果 显示PDC-E2和PDC-E3BP表达产物检测PBC患者血清中的自身抗体阳性率为93.3％,与欧盟试剂盒比较,总符合率为98.03％。结论 建立了利用重组表达丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位和E3结合蛋白检测PBC患者血清中自身抗体的方法,且获得PDC-E2和PDC-E3BP的高效表达产物。

一例罕见的丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症女性患儿的分析

目的分析1例表现为肌无力、脑部磁共振图像异常、血乳酸增高的女性新生儿的临床及遗传学特征。方法对患儿进行临床及实验室检查，应用新一代测序技术对其家系进行遗传学分析。结果先证者为足月小样儿，临床表现为肌无力、脑部磁共振图像异常、血乳酸增高、代谢性酸中毒等。基因检测发现其PDHA1基因存在一新生错义突变c．1133G〉A（P．R378H），为已报道的致病突变。结合其临床表现，该患儿被诊断为丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症（pyruvate dehydrogenase complex deficiency, PDCDD），给予维生素B1、辅酶Q10、左旋肉碱治疗，并建议生酮饮食。4月后随访，其血乳酸降至正常水平，但四肢肌张力偏低。结论确诊了1例由PDHA1基因错义突变所引起的PDCDD，使患儿在婴儿期就得到了及时的治疗。新一代测序技术为这类疾病提供了有力的诊断工具。

PDHA1基因新发变异致丙酮酸脱氢酶E1-α亚单位缺陷女性患儿遗传学分析

目的对1例临床拟诊丙酮酸脱氢酶E1-α亚单位缺乏症(PHD)患儿及家系成员进行临床及基因突变分析,为早期诊断及遗传咨询提供依据。方法对就诊于柳州市妇幼保健院的1例PHD患儿的临床特点及基因检测进行回顾分析。以“丙酮酸脱氢酶复合物”“丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症”“PDHA1基因”“Pyruvate dehydrogenase complex”“Pyruvate dehydrogenase complex deficiency”“PDHA1”为关键词查阅在线人类孟德尔遗传数据库、PubMed数据库、中国知网及万方数据库从建库至2020年6月相关文献,对中国人PHD病例进行汇总分析。结果先证者女性,以运动发育落后为主要临床表现,实验室检查血乳酸5.62 mmol/L(参考值0.5~2.2 mmol/L),丙酮酸430μmol/L(参考值30~100μmol/L),血氨66μmol/L(参考值0~54μmol/L),头颅MRI检查提示双侧基底节区异常信号,伴脑萎缩、脑室增宽,符合Leigh综合征影像学改变。患儿PDHA1基因检出未报道变异位点c.508C>T(p.R170X),变异位点导致蛋白质合成提前终止,经致病性预测分析软件及ACMG变异分类为1类致病变异,父母双方未检测到相应的变异位点。共检索到中国人PHD病例15例,相关文献18篇,包括本次报道1例共16例,其中男性14例,女性2例。多数患者以神经肌肉系统疾病为首发症状,实验室检查提示乳酸、丙酮酸增高,影像学检查可见基底节区信号改变。中国人PDHA1基因检测共发现14种变异类型,以R378C和R126C突变为主。结论通过临床表现结合PDHA1基因诊断确诊1例丙酮酸脱氢酶E1-α亚单位缺乏症女性患儿,新变异位点的发现丰富了PDHA1基因突变谱。

丙酮酸脱氢酶激酶PDK4在临床中的研究进展

丙酮酸脱氢酶复合物PDC可催化丙酮酸氧化脱羧,从而为三羧酸循环和脂质生物合成提供乙酰-CoA和NADH,其活性可被丙酮酸脱氢酶激酶PDK磷酸化灭活。本文主要介绍了PDK同工酶——PDK4在代谢性疾病,如糖尿病、脂质代谢异常以及血管钙化中的研究进展,并进一步对PDK4的调控机制进行总结,包括调控因子、激素水平以及基因多态性。