用ELISA检测抗丙酮酸脱氢酶复合物E2和E3结合蛋白自身抗体

目的 用重组丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位和E3结合蛋白 (PDC E2 ,PDC E3BP)建立筛查原发性胆汁性肝硬化 (PBC)患者相应自身抗体的ELISA。方法 用本室制备的重组PDC E2和PDC E3BP蛋白包被酶联反应板 ,检测PBC患者、正常人及其他肝病患者血清。结果 组建成筛查PBC患者血清中自身抗体的试剂盒 ,能够准确地检测PBC患者血清中的自身抗体。结论 建立的试剂盒能用于PBC患者血清中丙酮酸脱氢酶复合物自身抗体的检测。

磷脂酰肌醇3激酶信号通路在缺血后适应中对大鼠心肌保护机制的研究

目的研究缺血后适应(IPost)对大鼠心肌保护作用及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K/Akt)信号通路机制。方法将32只雄性Wistar大鼠随机分为缺血再灌注组(A组),IPost组(B组),IPost+Wortmannin组(C组)和缺血再灌注+SB216763组(D组),每组8只。测定各组左心室收缩压(LVSP)和再灌注30 min冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶和肌酸激酶含量。并测定心肌梗死面积,对心肌进行免疫组织化学染色,观察Akt磷酸化和GSK-3β磷酸化的表达。结果与B组比较,A组LVSP明显降低,乳酸脱氢酶和肌酸激酶含量明显升高(P<0.05);同时IPost干预减小了心肌梗死面积(47.3% vs 29.5%),B组Akt磷酸化和GSK-3β磷酸化表达增加。结论 IPost对体外大鼠缺血再灌注损伤有明确的保护作用。Wortmannin可削弱IPost的保护作用,SB216763具有模拟IPost的心肌保护作用,Akt和GSK-3β的磷酸化水平在IPost的心肌保护作用信号通道传导机制中具有重要地位。

基于磷脂酰肌醇3⁃激酶/蛋白激酶B信号通路探讨针刺对超负荷运动致骨骼肌损伤大鼠氧化应激损伤及骨骼肌细胞凋亡的影响

目的探究针刺对超负荷运动致骨骼肌损伤大鼠氧化应激损伤及骨骼肌细胞凋亡的影响,初步了解针刺对超负荷运动致骨骼肌损伤的治疗机制。方法于2018年12月至2019年6月选取60只6周龄SPF级SD大鼠,采用随机数字表法将SD大鼠分为四组:空白组(Control,C)、超负荷运动组(Overload,O)、针刺组(Acupuncture,A)和超负荷运动+针刺组(Overload and Acupuncture,OA),各15只;O组及OA组实行超负荷运动,运动结束立即针刺A组及OA组足三里、阳陵泉、内关和肾俞穴,留针20 min,持续14 d;检测各组SD大鼠骨骼肌中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛、琥珀酸脱氢酶(SDH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH⁃Px)活性;使用流式细胞仪检测SD大鼠骨骼肌细胞凋亡情况,使用蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病⁃2(Bcl⁃2)、Bcl⁃2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase⁃3)活性;检测SD大鼠血清中肌酸激酶水平并使用苏木精⁃伊红(HE)染色观察SD大鼠骨骼肌情况;使用蛋白质印迹法检测磷脂酰肌醇3⁃激酶/蛋白激酶B(PI3K⁃Akt)信号通路相关蛋白表达情况。结果相比C组丙二醛水平(4.75±0.29)mol/L、骨骼肌细胞凋亡水平(9.89±1.02)%和肌酸激酶(457.54±45.02)kU/L,O组丙二醛水平(13.97±0.55)mol/L、骨骼肌细胞凋亡水平(32.58±3.50%)、Bax、Caspase⁃3蛋白表达水、血清肌酸激酶水平(1985.50±88.87)kU/L均显著升高(P<0.05);相比C组GSH⁃Px水平(142.25±8.39)kU/L、SOD水平(2.50±0.25)kU/L、SDH水平(35.75±8.78)kU/L,O组GSH⁃Px水平(55.68±6.97)kU/L、SOD水平(1.02±0.17)kU/L、SDH水平(10.58±6.50)kU/L、Bcl⁃2、PI3K、磷酸化蛋白激酶B(p⁃AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m⁃TOR)水平均显著降低(P<0.05),Akt蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);相比O组,A组丙二醛水平(4.99±0.32)mol/L、骨骼肌细胞凋亡水平(11.52±1.02)%、Bax、Caspase⁃3蛋白表达水、血清肌酸激酶水平均(557.56±54.25)kU/L显著降低,GSH⁃Px水平(130.25±7.14)kU/L、SOD水平(2.38±0.30)kU/L、SDH水平(31.25±5.50)kU/L、Bcl⁃2、PI3K、p⁃AKT、m⁃TOR蛋白水平显著升高(P<0.05),Akt蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);相比A组,OA组丙二醛水平(7.89±0.41)mol/L、骨骼肌细胞凋亡水平(22.58±2.51)%、Bax、Caspase⁃3蛋白表达水、血清肌酸激酶水平(1402.51±64.50)kU/L均显著升高,GSH⁃Px水平(135.58±8.14)kU/L、SOD水平(2.10±0.21)kU/L、SDH水平(24.28±4.99)kU/L、Bcl⁃2、PI3K、p⁃AKT、m⁃TOR蛋白水平显著降低(P<0.05),Akt蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);相比O组,OA组丙二醛水平、骨骼肌细胞凋亡水平、Bax、Caspase⁃3蛋白表达水、血清肌酸激酶平均显著降低,GSH⁃Px水平、SOD水平、SDH水平、Bcl⁃2、PI3K、p⁃AKT、m⁃TOR蛋白水平显著升高(P<0.05),Akt蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色观察结果显示:O组纤维弯曲,肌红蛋白溶解,肌细胞核固缩、溶解,肌束膜破裂;OA组少量肌纤维断裂溶解弯曲,余未见异常。结论针刺可以通过调控PI3K⁃Akt信号通路抑制SD大鼠氧化应激和骨骼肌细胞凋亡来实现治疗超负荷运动致骨骼肌损伤。

通过抑制PDHK3的表达降低乳酸水平增加CHO细胞抗体表达量

目的:通过抑制乳酸产生相关基因丙酮酸脱氢酶激酶3(PDHK3)的表达,降低CHO细胞系的乳酸表达,增加CHO细胞系蛋白表达量。方法:针对PDHK3序列设计特定的shRNA质粒,在CHO细胞系构建过程中将含有此shRNA的质粒与表达抗体蛋白的质粒一同转染至宿主细胞中,经过抗生素筛选后进行批次补料生产抗体蛋白。测定乳酸及蛋白产量,同时检测PDHK3基因的mRNA表达水平及shRNA质粒中的neomycin基因拷贝数。结果:利用此方法分别转染的不同抗体蛋白分子,PDHK3基因的mRNA水平降低了65.0%~76.0%,批次补料过程乳酸含量显著降低,同时相应的抗体蛋白表达量提升了18.6%~233.0%。结论:利用shRNA方法抑制乳酸相关的PDHK3基因的表达,可以有效降低乳酸表达,同时提高目的蛋白的表达。

IL-18对感染柯萨奇B3病毒乳鼠心肌细胞的保护作用

目的研究IL-18抗柯萨奇B3病毒(Coxsackie B3 virus,CVB3)的作用.方法将心肌细胞分为4组.感染组:用CVB3感染心肌细胞;干预组:心肌细胞感染病毒后加入IL-18(4～30 ng/ml);IL-18组:正常心肌细胞加入IL-18(8 ng/ml);对照组:正常心肌细胞.观察培养心肌细胞病变(CPE)及心肌酶谱乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CK)的变化.并进行IL-18最大无毒剂量实验.结果感染组感染病毒后第2、5天心肌细胞病变程度较其余3组明显,LDH和CK浓度明显升高,与其余3组比较差异有极显著性意义(P<0.01).IL-18浓度≥40 ng/ml对正常心肌细胞有毒性作用;在4～20 ng/ml范围内对感染心肌细胞具有保护作用.结论 IL-18可以抑制CVB3对心肌细胞的损伤,对CVB3感染的心肌细胞有保护作用.

人参皂苷20(s)-Rg3对llc-pk1细胞中顺铂所致肾毒性的保护作用

目的:探讨人参皂苷20(s)-Rg3对llc-pk1细胞中顺铂所致肾毒性的保护作用。方法:通过基于细胞的肾脏保护试验,研究了发酵黑参(FBG)及其活性成分人参皂苷20(S)-Rg3对猪肾(LLC-PK1)细胞中顺铂(化疗药物)诱导的损伤的保护作用。结果:由顺铂诱导的细胞活力降低,再使用FBG提取物和人参皂苷20(S)-Rg3依赖剂量后明显恢复。用FBG提取物或人参皂苷20(S)-Rg3处理后会降低顺铂诱导升高与磷酸化c-Jun N-末端激酶(JNK),p53和裂解的半胱天冬酶-3升高的蛋白。通过用FBG和人参皂苷20(S)-Rg3的共同处理,由于顺铂的诱导导致凋亡LLC-PK1细胞升高的百分比显著降低。结论:人参皂苷20(s)-Rg3可改善LLC-PK1的细胞毒性,人参皂苷20(S)-RG3可能是通过阻断JNK-P53-caspase-3信号级联反应来介导这种作用的重要组成部分。

羟喜树碱对前列腺癌PC-3细胞能量代谢的影响

目的研究羟喜树碱对人前列腺癌PC-3细胞增殖抑制作用及能量代谢和关键酶的影响。方法选取PC-3细胞,采用MTT法测定1.0、2.0及5.0μmol/L的羟喜树碱处理该细胞24 h后细胞的增殖抑制能力。采用分光光度法测定葡萄糖摄取量及乳酸生成量及ATP生成相关能量代谢参数。采用Western blot法测定乳酸脱氢酶A(LDHA)和AMP活化蛋白激酶(AMPK)表达。结果 1.0、2.0及5.0μmol/L的羟喜树碱可抑制PC-3细胞的增殖并呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01),IC_(50)值为3.24μmol/L。与对照组相比,不同浓度的羟喜树碱可降低葡萄糖摄取,抑制乳酸生成及ATP生成,且均呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01);Western blot结果显示,不同浓度的羟喜树碱可使PC-3细胞中LDHA及AMPK表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论羟喜树碱通过可降低PC-3细胞中LDHA及AMPK表达,抑制肿瘤的有氧酵解并抑制细胞增殖。

miR-142-3p对膀胱癌细胞增殖和有氧糖酵解的影响及作用机制

目的探究微小RNA(miR)-142-3p对膀胱癌(BC)细胞增殖与有氧糖酵解的影响及作用机制。方法qPCR检测比较人BC细胞系(SW780、UMUC3、T24、BIU87)和人输尿管上皮细胞(SV-HUC-1)中miR-142-3p表达水平,选取低表达的BC细胞进行miR-142-3p过表达质粒转染;分别采用平板细胞克隆实验、CCK8-法、流式细胞术、2-NBDG葡萄糖摄取实验、糖代谢检测试剂盒检测miR-142-3p表达对BC细胞增殖、活性、周期、有氧糖酵解的影响。双荧光素酶和Western blot法检测miR-142-3p与细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4、乳酸脱氢酶A(LDHA)的靶向性及作用关系。过表达miR-142-3p的BC细胞分别转染CDK4或LDHA表达质粒,采用CCK8-法、2-NBDG葡萄糖摄取实验、糖代谢检测试剂盒测定转染后的BC细胞活性和有氧糖酵解情况。结果miR-142-3p在T24、UMUC3细胞中显著低表达(均P<0.01)。T24、UMUC3细胞转染过表达miR-142-3p质粒后,克隆能力及活性显著下降(均P<0.05),细胞周期阻滞于G0/G1期(均P<0.01),2-NBDG荧光强度显著减弱(均P<0.01),葡萄糖消耗量和乳酸生成量显著减少(均P<0.01)。miR-142-3p靶向抑制CDK4和LDHA蛋白表达(均P<0.01)。CDK4或LDHA表达显著逆转了miR-142-3p过表达对T24细胞的活性和有氧糖酵解的抑制作用(均P<0.05)。结论miR-142-3p通过靶向CDK4和LDHA抑制BC细胞增殖和有氧糖酵解。

3'-大豆苷元磺酸钠对心肌缺血/再灌注损伤保护作用的研究(Ⅰ)

目的:研究3'-大豆苷元磺酸钠对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。方法:取32只雄性Wistar大鼠,随机分为4组,每组8只,分别为假手术组、缺血再灌注组、3'-大豆苷元磺酸钠低、高剂量组(1.0、2.0 mg.kg-1)。于结扎冠状动脉左前降支前10 min经舌下静脉注入(1.0、2.0mg.kg-1)3'-大豆苷元磺酸钠溶液,模型组及假手术组经舌下静脉注入等体积生理盐水。结扎冠状动脉左前降支使心肌缺血,40 min后恢复血流并持续120 min,复制缺血再灌注损伤模型。测定血清中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)的含量。结果:3'-大豆苷元磺酸钠治疗组与缺血再灌注组比较,血清LDH、CK值降低,MDA值减小,SOD值升高,且呈一定的剂量依赖性。结论:3'-大豆苷元磺酸钠对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。

甘油激酶和3-磷酸甘油脱氢酶基因在大肠杆菌中的克隆表达

莽草酸是抗流感有效药物"达菲"的前体物质。作者等之前的研究中,发现甘油作为碳源时重组大肠杆菌生物合成莽草酸的量最高,说明甘油代谢途径对莽草酸的生物合成有重要的影响,甘油激酶和3-磷酸甘油脱氢酶是大肠杆菌甘油代谢途径的关键酶,对它们进行克隆表达来研究甘油代谢途径对大肠杆菌生物合成莽草酸的影响。文章采用PCR方法从大肠杆菌DH5α基因组中扩增得到长度均为1.5 kb的甘油激酶基因(glpK)和3-磷酸甘油脱氢酶基因(glpD),并构建了重组表达载体pET-3b-glpD-glpK,转化E.coli BL21(DE3)后得到重组的E.coli BL21(DE3)-pET3b-glpD-glpK,并采用SDS-PAGE检测目的基因蛋白的表达。结果表明,glpK和glpD基因已成功构建到pET-3b-glpD-glpK质粒中,SDS-PAGE也检测到了目的基因的成功表达(55 k);同时,重组E.coli BL21(DE3)-pET3b-glpD-glpK的甘油消耗比出发菌株提高了16%,莽草酸积累量是出发菌株的3.5倍。

G6PD调控PI3K/Akt信号通路诱导肝癌细胞索拉非尼耐药的机制研究

目的 基于磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路研究葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)诱导肝癌细胞索拉非尼耐药的机制。方法 以肝癌细胞Huh7、索拉非尼耐药肝癌细胞Huh7-SR、G6PD稳定过表达的肝癌细胞Huh7-G6PD及其对照细胞Huh7-CT为研究对象,以索拉非尼或G6PD抑制剂(6-氨基烟酰胺)为干预药物,采用CCK-8法检测细胞活力,采用Western blot法检测G6PD蛋白表达水平及PI3K/Akt信号通路相关蛋白的磷酸化水平,采用流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果 与Huh7细胞比较,Huh7-SR细胞中G6PD的表达水平显著升高(P<0.05)。经6-氨基烟酰胺和索拉非尼联合干预后,Huh7-SR细胞存活率显著降低(P<0.01)。经索拉非尼干预后,与Huh7-CT细胞比较,Huh7-G6PD细胞存活率显著升高(P<0.01),凋亡率显著降低(P<0.01)。经6-氨基烟酰胺干预后,Huh7-SR细胞中PI3K、Akt蛋白的磷酸化水平均显著降低(P<0.05)。不加药物干预时,与Huh7-CT细胞比较,Huh7-G6PD细胞中PI3K、Akt蛋白的磷酸化水平均显著升高(P<0.01)。结论 G6PD可通过激活PI3K/Akt信号通路诱导肝癌细胞索拉非尼耐药。

miR-103a-3p在乳腺癌组织和血清中的表达及通过下调PDK4抑制乳腺癌细胞的有氧糖酵解及增殖

目的:探讨miR-103a-3p在乳腺癌组织及血清中的表达及其作用机制。方法:选用2017年3月1日至2017年8月31日在海南医学院第二附属医院肿瘤外科手术切除、经病理确诊为乳腺癌的31例癌组织及对应的21例癌旁组织标本、38例乳腺癌患者及22例健康体检者的血清标本,以及乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231,分别利用慢病毒载体pHBLV-U6-Luc-T2A-Puro和PLL3.7敲低乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中的miR-103a-3p和PDK4,qPCR法和Western blotting法检测miR-103a-3p和PDK4在癌组织、血清及乳腺癌细胞系中mRNA和蛋白的表达,CCK-8细胞增殖实验检测转染的乳腺癌细胞MCF-7和MDAMB-231的细胞增殖水平,用Olympus AU5400检测葡萄糖消耗与乳酸生成。结果:乳腺癌患者组织和血清中miR-103a-3p表达水平均显著低于癌旁组织(P<0.01,P<0.05)。敲低miR-103a-3p后,乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中葡萄糖消耗(P<0.01)与乳酸生成增多(P<0.01)、细胞增殖增强(P<0.01)、PDK4表达上调(P<0.01);在miR-103a-3p沉默的MCF-7和MDA-MB-231细胞中,敲低PDK4导致减弱葡萄糖消耗(P<0.01)、乳酸生成(P<0.01)和细胞增殖(P<0.01)。结论:乳腺癌细胞中miR-103a-3p通过抑制PDK4减弱糖酵解活动,从而抑制乳腺癌细胞增殖。

miR-103a-3p过表达靶向负调控PDK4抑制胶质瘤生长及侵袭

目的探讨miR-103a-3p过表达对胶质瘤C6细胞恶性生物学行为的影响及对裸鼠移植瘤生长的影响。方法体外培养鼠源性C6胶质瘤细胞,转染miR-103a-3p mimics质粒过表达miR-103a-3p,转染miR-103a-3p mimics+pcDNA-PDK4质粒分析PDK4过表达对miR-103a-3p过表达的影响;EDU法检测细胞增殖活性;qRT-PCR检测miR-103a-3p、PDK4 mRNA表达水平;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Transwell实验检测细胞侵袭能力;免疫印迹法检测E-cadherin、N-cadherin、vimentin蛋白表达水平。取40只裸鼠,其中20只皮下注射未转染质粒的C6细胞、20只皮下注射转染miR-103a-3p mimics质粒的C6细胞构建移植瘤模型,分析miR-103a-3p mimics过表达对移植瘤生长的影响。结果生物信息学及双荧光素酶试验证实PDK4是miR103a-3p的靶点。过表达miR-103a-3p明显降低C6细胞PDK4、Ki67、PCNA、N-cadherin、vimentin表达水平(P<0.05),明显抑制C6细胞增殖活性、侵袭能力(P<0.05),明显增加C6细胞E-cadherin表达水平、细胞凋亡率(P<0.05)。过表达PDK4明显抑制过表达miR-103a-3p对C6胶质瘤细胞的作用(P<0.05)。过表达miR-103a-3p明显抑制裸鼠移植瘤生长(P<0.05),抑制肿瘤组织PDK4、Ki67、vimentin表达(P<0.05)。结论过表达miR-103a-3p通过靶向抑制PDK4表达,一方面抑制胶质瘤细胞增殖、促进胶质瘤细胞凋亡,从而抑制胶质瘤生长;另一方抑制胶质瘤上皮-间质转化过程,从而抑制胶质瘤细胞侵袭。

甘蓝型油菜G3PDH和PK基因对氮肥的响应

为了研究氮肥施用量对油菜含油量以及相关基因表达水平的影响,本研究以甘蓝型油菜‘宁油22号’作为材料,在0 kg/hm^2、320 kg/hm^2、640 kg/hm^2氮肥水平下分别测定‘宁油22号’种子和角果皮的含油量,同时检测G3PDH和PK基因在不同氮肥水平下以及不同组织中的表达含量。结果发现,随着施氮量的增加,‘宁油22号’含油量下降,在0 kg/hm^2和320 kg/hm^2水平时下降不明显,在640 kg/hm^2水平时下降明显,并且随着施氮量的增加,G3PDH和PK基因表达量均增强。本研究还分别分析了在种子和角果皮中G3PDH和PK基因的比值,以及开花30天后跟开花15天后的表达比,结果表明二者均在640 kg/hm^2水平下达到最高;PK基因在种子与角果皮中的比值在640 kg/hm^2水平时达到最高,在开花30天后跟15天后的表达比在0 kg/hm^2水平时达到最高。

胃肠胰神经内分泌肿瘤中GSK-3β、LDHA表达及其与临床病理特征的关系

目的 探讨胃肠胰神经内分泌肿瘤(GEP-NENs)中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、乳酸脱氢酶A(LDHA)表达及其与临床病理特征的关系。方法 收集2021年6月至2022年6月收治的98例GEP-NENs患者临床资料。采用免疫组化法检测GSK-3β、LDHA在GEP-NENs组织中的表达水平,并分析GSK-3β、LDHA表达与患者临床病理特征的关系。结果 免疫组化结果显示,98例癌组织中GSK-3β高表达高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);98例癌组织中LDHA高表达高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。GSK-3β、LDHA表达均与GEP-NENs患者的TNM分期、病理分级、浸润程度、淋巴结转移情况有关(P<0.05),而与GEP-NENs患者的性别、年龄、手术方式、肿瘤最大径、肿瘤部位、远处转移及神经内分泌标志物突触素、嗜铬素A表达情况无关(P>0.05)。结论 GSK-3β、LDHA在GEP-NENs中均呈过表达,且其表达水平与GEP-NENs患者TNM分期、病理分级、浸润程度、淋巴结转移情况密切相关。

线粒体乙醛脱氢酶2(ALDH2)通过AMPK/FOXO3a通路改善高糖导致的心肌细胞凋亡

目的:观察乙醛脱氢酶2(ALDH2)对高糖诱导的H9C2心肌细胞存活及凋亡的影响,并探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/FOXO3a信号通路在高糖导致的心肌细胞凋亡中的调控作用。方法:以30 mmol/L葡萄糖诱导培养H9C2心肌细胞48 h,经ALDH2激动剂Alda-1及AMPK抑制剂Compound C干预后,用MTT法检测细胞的存活情况,TUNEL试剂盒检测细胞凋亡情况,Western blot检测ALDH2、磷酸化AMPK和FOXO3a蛋白的表达水平。结果:与对照组相比,高浓度葡萄糖培养H9C2心肌细胞后,细胞的存活率显著降低、凋亡指数明显升高,磷酸化AMPK的表达水平明显上调,ALDH2和磷酸化FOXO3a的蛋白表达显著降低(P<0.05)。ALDH2的激动剂Alda-1处理可显著提高高糖诱导的H9C2心肌细胞的存活率、降低其凋亡率,减少磷酸化AMPK的蛋白表达,增加ALDH2的表达和FOXO3a蛋白的磷酸化;而进一步采用AMPK的抑制剂Compound C处理,可显著抑制Alda-1对高糖诱导的H9C2心肌细胞的这些影响。结论:ALDH2的激动剂Alda-1对高糖诱导的心肌细胞凋亡具有保护作用,可能与其激活AMPK,进而抑制心肌细胞FOXO3a的活性有关。

高甘油三酯高血糖血症大鼠脂糖代谢相关酶活性变化的实验研究

目的该实验研究以脂糖代谢途径为切入点,通过喂饲高果糖食饵造成大鼠高甘油三酯(TG)高血糖(GLU)血症模型,观察ATP-柠檬酸裂解酶(ACL)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、丙酮酸激酶(PK)、丙酮酸(PYR)、脂肪酸合成酶(FAS)及胰岛素(Ins)等指标的变化,探讨果糖诱发大鼠高甘油三酯高血糖血症的发病机理。方法SD雄性大鼠自由摄取果糖造模饲料,连续28d。测定血清TG、Glu含量、全血GAPDH活性、血清和肝脏ACL活性、血清PK活性及PYR、Ins含量。结果与正常组相比,模型组动物血清TG、GLU水平显著升高;全血GAPDH活性、血清PK活性、PRY含量显著降低,血清及肝脏ACL活性、肝脏FAS活性显著升高;血清Ins含量未见明显变化。结论果糖诱发大鼠高TG高GLU血症的发病机制与脂糖代谢相关酶(ACL、GAPDH、PK、FAS)活性变化密切相关。

氟离子和碳酸氢根对构树幼苗生长和碳代谢的影响

【目的】通过研究氟离子和碳酸氢根添加对构树幼苗生长和碳代谢的影响,探讨喀斯特生态区域内的氟离子对植物光合作用和糖代谢过程的影响机制,以期为氟富集地区的森林植被管理和修复提供理论依据。【方法】以喀斯特适生植物构树幼苗为研究对象,通过在Hoagland营养液中加入NaF和NaHCO_(3)制成处理液。试验共设置4个处理组,即对照组、3 mmol·L^(-1)NaF处理组、3 mmol·L^(-1)NaHCO_(3)处理组和3 mmol·L^(-1)NaF+3 mmol·L^(-1)NaHCO_(3)处理组。测定构树幼苗在处理条件下的生长指标、光合指标、磷酸果糖激酶(PFK)活性、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)活性和碳酸酐酶(CA)活性。【结果】1)F^(-)添加显著抑制了构树幼苗的生长和光合能力,并且使葡萄糖代谢从糖酵解途径转移到磷酸戊糖途径。在不同时添加HCO^(-)_(3)的情况下,F^(-)对叶片内的CA酶活性不产生显著影响,但在同时添加HCO^(-)_(3)时,F^(-)显著抑制叶片内的CA酶活性。2)根际HCO^(-)_(3)添加能够显著促进构树幼苗的生长和光合能力,提高葡萄糖代谢总量和CA酶活性。而同时添加F-能抑制HCO^(-)_(3)添加对植株产生的正面效应,使植株的生长、光合、葡萄糖代谢总量都显著下降,而G6PDH酶活性显著上升。【结论】环境中较高浓度的F-能够显著抑制构树的生长,具体体现在对光合过程的抑制和把过多的糖代谢底物分配到PPP途径上。而在根际添加适量的HCO^(-)_(3)能够为植株的生长提供额外的光合代谢底物,提高植株的糖代谢水平,从而对植物的抗逆性和生长都产生有利的影响。在同时添加HCO^(-)_(3)和F-条件下,HCO^(-)_(3)对植物生长的增益效果被F-的作用所削减,这主要是因为F-对植物光合系统中各种酶结构和活性的破坏和抑制作用,也可能与F-和HCO^(-)_(3)在根系吸收时存在竞争关系有关。

新生儿高胆红素血症的心肌酶改变及临床意义

目的探讨新生儿高胆红素血症心肌酶的变化及临床意义。方法选择住院的48例高胆红素血症新生儿为观察组,检测治疗前和治疗8d后的血清心肌酶;选择同期门诊体检的健康新生儿20例为对照组,行血清心肌酶检测。两组作对比分析。结果观察组治疗前的心肌酶值明显高于对照组(P<0.01);治疗后,患儿的心肌酶明显下降(P<0.01),与对照组比较差异无显著意义(P>0.05)。结论高胆红素血症可能造成心肌损害。高胆红素血症的新生儿应常规作心肌酶谱检查;早期应注意对心肌的保护性治疗,以避免严重的心肌损害。

吗啡依赖相关的酶学研究进展

吗啡依赖形成的机制是一个复杂的过程。涉及特定脑区突触超微结构变化、神经递质、酶学等多种复杂的机制,并且相互之间有密切的联系。本文从蛋白激酶类、一氧化氮合酶、超氧化物歧化酶、腺苷酸环化酶、琥珀酸脱氢酶、3β-羟基类固醇脱氢酶等几方面对吗啡依赖相关酶体系的研究进展作一综合性论述。