丙酸梭菌静息细胞法生物合成丙烯酸

介绍了丙烯酸生物合成的途径并比较了以不同起始物生物合成丙烯酸的特点。建立了以丙酸为底物的静息细胞生物合成丙烯酸的方法,并优化了生物转化工艺参数,其最优值分别为pH8.5、温度42℃、底物浓度250 mmol/,L、电子受体亚甲基蓝浓度0.2%～0.3%、促进剂L-丙氨酸浓度为20 mmol/L、Zn^(2+)离子浓度为1 mmol/L。通过紫外和硫酸二乙酯复合诱变筛选到一株能耐受丙烯酸浓度为40 mmol/L的突变株,以其静息细胞转化丙酸能获得25.2 mmol/L丙烯酸。

丙酸梭菌简易培养及电转化方法

建立了一种简易的丙酸梭菌(Clostridium propionicum)厌氧培养方法——输液瓶蜡封法,从而使厌氧培养快速有效。基于输液瓶蜡封法,采用电击缓冲液PEB,结合0.03 g/mL维生素C的方法,通过对不同对数生长期的菌体细胞进行实验,在无需借助厌氧培养箱的条件下,成功地将外源质粒pGJ103(3 283 bp)转化丙酸梭菌,结果表明处于对数生长中期(18 h)的丙酸梭菌细胞最适宜用于电转化。该研究为严格厌氧微生物的培养提供了一种普适的方法,并且为丙酸梭菌的分子生物学操作奠定了一定的基础。