泡桐丛枝病发生特异相关蛋白质亚细胞定位及质谱鉴定

借助胶体金免疫电镜和质谱分析技术,利用制备的专化性抗体,进行豫杂一号泡桐丛枝病发生特异相关蛋白质(m24ku,pI6.8)叶片和茎尖的亚细胞定位和质谱鉴定研究。结果显示:豫杂一号泡桐丛枝病发生特异相关蛋白质分布于健康苗叶片和茎尖细胞的细胞壁、液泡和叶绿体部位,患病幼苗叶片和茎尖细胞相同亚细胞器部位未发现该蛋白质的存在,进一步表明植原体侵染阻断了此蛋白的合成。此外,基质辅助激光解吸飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)分析该特异蛋白后,通过查询MSDB数据库初步断定该特异相关蛋白为水稻叶绿体分子伴侣Q6K822-ORYSA的同源蛋白。

卵巢癌患者血清中肿瘤特异标志物的鉴定研究

目的:通过分析卵巢癌患者血清中的蛋白质组分,寻找可能的肿瘤相关蛋白并对该蛋白鉴定,以期确定其作为卵巢癌血清学诊断的特异标志物。方法:采用双向凝胶电泳方法分离6例卵巢癌患者及2例正常健康妇女血清总蛋白,经考马斯亮蓝染色后对比找出差异蛋白斑点,该蛋白斑点经蛋白酶水解后进行液质联用串联质谱(LC-MS/MS)分析,用SEQUEST搜索软件查询Finngan公司提供的FASTA格式蛋白序列数据库。采用WesternBlotting、ELISA、斑点印迹及亲和层析等方法对目标蛋白作进一步的分析。结果:经双向电泳分离,卵巢癌患者血清中有3-4个组分显示含量高于正常健康妇女血清,选其中最明显的一个差异斑点进行质谱分析,对库检索确定为结合珠蛋白。进一步的分析证实,卵巢癌患者血清中结合珠蛋白总含量有高于正常健康妇女的趋势。此外,通过凝集素斑点印迹法检测发现,岩藻糖基化结合珠蛋白成分明显增加是该蛋白总量增高的主要特性。结论:检测血清结合珠蛋白总量以及特异的岩藻糖基化组分可能成为卵巢癌的血清诊断指标之一,可与其它检测方法相结合,提高卵巢癌早期诊断的有效性。

乳腺癌基因芯片数据分析

目的 以乳腺癌病人的表达谱芯片数据为基础 ,探寻乳腺癌复发的相关基因。方法 对标化芯片数据进行缺失值处理后 ,分别用单因素COX回归模型和综合了聚类及多因素COX回归的综合法来筛选兴趣基因 ,然后通过兴趣基因对病人做样品聚类 ,以灵敏度、特异度、约登指数和Kaplan Meier法评价分类效果 ,最后结合文献和蛋白质数据库探寻乳腺癌复发的相关基因。结果 综合法筛出的 30个P <0 .0 1的基因对乳腺癌病人复发状况的预测效果最佳 ;单因素COX回归筛出的 1 0 2个P <0 .0 1的基因的预测效果较差 ;单因素COX回归筛出的 1 5个P <0 .0 0 1的基因预测效果最差。结论 综合法筛选得到的 30个基因可用来评价病人的预后状况 ,为进一步的生物学研究提供待选基因。

4种自身抗体联合检测对1型糖尿病诊断的意义

目的探讨联合检测谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、蛋白质酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)、锌转运体8抗体(Zn T8A)和胰岛特异的葡萄糖-6-磷酸酶催化亚基相关蛋白抗体(IGRPA)对1型糖尿病患者诊断的意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)对45例1型糖尿病患者、50例2型糖尿病患者及50例正常对照者血清进行GADA、IA-2A、Zn T8A及IGRPA自身抗体的检测。结果 IA-2A、GADA、Zn T8A和IGRPA在1型糖尿病患者中检出率分别为28.89%、53.33%、71.11%和77.78%。4种自身抗体的阳性率在1型糖尿病患者中高于2型糖尿病组及正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。自身抗体联合检测敏感度均高于单项组,GADA/IA-2A/Zn T8A/IGRPA 4项联合检测敏感度及曲线下面积(AUC)均为最高,分别为95.56%和0.988。结论 GADA、IA-2A、Zn T8A和IGRPA抗体的联合检测可以显著提高1型糖尿病的检出率,对1型糖尿病的诊断具有重要意义。