丛梗孢酵母产赤藓糖醇的诱变选育

利用微波-硫酸二乙酯复合诱变对产赤藓糖醇丛梗孢酵母E54进行处理,以高渗平板和摇瓶发酵为筛选方法,得到遗传稳定的诱变高产株EW29;再采用氮离子注入对EW29进行诱变处理,摇瓶发酵筛选得到诱变株EN59,其90h发酵液中赤藓糖醇产量达到55.13g/L,较EW29提高20.3%,较E54提高36.9%,遗传稳定性较好。对突变株EN59的发酵培养基进行了优化,在优化培养基葡萄糖250g/L、酵母膏5g/L、KH2PO4 0.3g/L、MnSO4.4H2O0.04g/L、CuSO4.5H2O 0.03g/L,初始pH4的条件下,90h发酵液中赤藓糖醇平均产量达到69.00g/L以上。在优化培养基的基础上进行5L罐发酵放大实验,发酵126h赤藓糖醇产量达到71.14g/L。

梅利斯丛梗孢酵母发酵生产赤藓糖醇的条件优化

研究梅利斯丛梗孢酵母(Moniliella mellis)耦合异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus)发酵生产赤藓糖醇。通过单因素试验优化梅利斯丛梗孢酵母C-703产赤藓糖醇的发酵条件,得到最佳摇瓶发酵条件:培养基为葡萄糖250g/L和酵母提取物17.5g/L,初始pH5.5,250mL摇瓶装液20mL,温度28℃。在该条件下,发酵6d赤藓糖醇产量为84.6g/L。梅利斯丛梗孢酵母在5L发酵罐补料发酵10d,赤藓糖醇产量达114g/L。进一步将发酵液接入异常威克汉姆酵母C-430进行二次发酵,除去绝大部分副产物丙三醇,再经精制和结晶得到赤藓糖醇晶体,转化率为93.2%。结果表明双酵母耦合发酵生产赤藓糖醇具有较大的应用前景。

丛梗孢酵母发酵产赤藓糖醇条件的优化

丛梗孢酵母BH010是从蜂蜜样品中分离得到的产赤藓糖醇菌株。该实验研究了发酵培养基及发酵条件对丛梗孢酵母赤藓糖醇产量的影响。单因素实验及正交实验的结果表明,最佳发酵培养基及发酵条件为:葡萄糖含量(质量浓度)35%、酵母膏含量(质量浓度)1%、CaCl2.2H2O(质量浓度)0.2%,初始pH6.0,接种量1%,30℃摇瓶培养9d。最终赤藓糖醇产量为110.61g/L发酵液,比普通发酵条件下提高85.56%。

丛梗孢酵母发酵产赤藓糖醇的响应面优化

为了提高丛梗孢酵母发酵产赤藓糖醇的产量,在前期单因素实验结果的基础上,利用Plackett-Burman实验设计对影响其产赤藓糖醇的发酵条件进行评估并筛选出了影响显著的3个因素:葡萄糖、初始pH和温度。采用响应面法进行实验方案设计,利用SAS软件对其结果进行二次回归分析,确定了优化后的发酵条件为:葡萄糖260g/L、酵母膏4g/L、KH2PO4 0.2g/L、MnSO4.4H2O 0.05g/L、CuSO4.5H2O 0.04g/L、初始pH4.2、温度31℃、装液量20%、转速150r/min、接种量4%。在该条件下发酵90h,发酵液中的赤藓糖醇含量,较优化前提高10.8%达到75.63g/L,转化率提高9.4%为36.12%。