不同提取方法对东北林蛙皮胶原蛋白理化特性的影响

以东北林蛙皮为原材料,用乙酸和胃蛋白酶两种方法对其中所含的胶原蛋白进行提取,最终得到两种胶原蛋白:酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC),并对这两种胶原蛋白的理化性质及功能特性进行比较研究。结果发现,ASC和PSC在234 nm附近都有强吸收峰,符合胶原蛋白的特征;红外光谱发现ASC在3346.0、2952.0、1662.0、1548.0、1242.0 cm^(-1)有吸收峰,PSC在3322.0、2944.0、1662.0、1551.0、1236.0 cm^(-1)有吸收峰,证明这两种胶原蛋白都存在酰胺A、酰胺B、酰胺Ⅰ、酰胺Ⅱ、酰胺Ⅲ,内部三螺旋结构都保留完整;氨基酸组成表明ASC和PSC都含有18种氨基酸,包括人体所需的8种必需氨基酸,但是组成略有差异;SDS-PAGE电泳结果显示,这两种胶原蛋白都存在β、α1和α2链,符合Ⅰ型胶原蛋白的结构特征;PSC的变性温度较ASC要高,但是保湿率较低,它们的吸湿率和相对溶解度差异不显著(p>0.05);以上结果表明不同提取方法对东北林蛙皮胶原蛋白的结构、功能特性有一定影响,但是不影响胶原蛋白的品质。

东北林蛙皮糖胺聚糖分析及其体外免疫活性

目的研究东北林蛙皮糖胺聚糖基础结构,并验证其体外免疫活性。方法采用水提醇沉法提取多糖,Sepharose^(TM) CL-6B凝胶柱分离纯化,对所得多糖进行分子量、单糖组成、红外光谱以及体外免疫活性考察。结果粗多糖DGP、纯化后多糖DGPA由甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、氨基半乳糖、半乳糖构成,摩尔比分别为0.30∶2.05∶0.17∶1∶0.23、0.41∶2.67∶0.16∶1∶0.25,后者分子量为141 kDa。纯化后,DGPA为糖胺聚糖。DGP、DGPA均可促进小鼠T、B淋巴细胞增殖,并能促进小鼠巨噬细胞吞噬功能及分泌NO、TNF-α能力。结论纯化后,东北林蛙皮多糖DGPA为糖胺聚糖,具有免疫调节活性,在同一质量浓度下比粗多糖DGP显示出更强的免疫激活作用。