应用Proofman-LMTIA技术双重检测当归和东当归

通过梯型熔解温度核酸等温扩增技术(Ladder-shape melting temperature nucleic acid isothermal amplification,LMTIA)与校对酶介导探针(Proofreading enzyme-mediated probe cleavage,Proofman)联合的方法对当归和东当归进行双重检测。以ddH2O为阴性模板,当归和东当归基因组DNA为阳性模板,测定当归和东当归引物的最适温度、灵敏度及稳定性,并进行了真实样品检测。结果表明,应用Proofman-LMTIA双重检测当归和东当归,引物测定的最适温度为62℃,当归引物灵敏度低至10 pg/μL,东当归引物灵敏度低至1 pg/μL,具有良好的稳定性。7份市售当归样品经检测均为当归。该研究可为当归和东当归的鉴别提供一种新的检测方法。

东当归化学成分及药理活性研究进展

东当归(Angelica acutiloba(Sieb.et Zucc.)Kitagawa)目前在日本、朝鲜等国家及我国朝鲜族自治州均有应用,极具开发潜力与应用价值,笔者通过中国知网、Pubmed等数据库检索东当归的国内外相关研究文献报道,并结合本草组鉴、Pubchem、Chemical book等数据库对东当归的化学成分与药理活性进行归纳总结。迄今分离鉴定得到的东当归化学成分主要为挥发油、香豆素类、有机酸类、黄酮类、多糖类等,由于种植方法与产地的不同,不同产区的成分含量有所区别。东当归的多种成分通过多途径发挥药理活性,如水提物、醇提物及部分单体在循环系统、神经系统、免疫系统等多个系统具有良好的调节作用,主要是改善造血与心血管系统、护肝、抗炎、抗菌、改善学习记忆功能、抗光老化和抗肿瘤等药理活性。本文对近年国内外东当归的化学成分以及药理作用研究进展进行梳理,以期为东当归的药效物质基础研究、药用资源开发及临床应用提供参考。

垄间套种玉米对东当归产量和抽薹的影响

以东当归为试验材料,研究不同玉米套种株距和行距对其产量和抽薹的影响。结果表明,东当归垄间套种玉米株行距为1 m×3 m时,产量相对最高,为12882.6 kg/hm^(2),较最低产量增产32.99%,且抽薹率较低,为0.87%;东当归抽薹率在套种玉米株行距为0.75 m×2.00 m时最高,达2.17%。东当归抽薹率随着玉米套种株行距的增大呈“低—高—低”趋势。合理控制垄间套种玉米株距和行距,能有效提高东当归产量,控制抽薹,达到绿色生产、增产增收的目的。

海拔与定植密度对宜昌市东当归生长和产量的影响

研究海拔与定植密度对湖北省宜昌市东当归[Angelica acutiloba(Sieb.et Zucc.)Kitagawa]生长和产量的影响。设置2个海拔水平(600 m、1100 m)和3个定植密度水平(30 cm×40 cm、35 cm×40 cm、40 cm×40 cm)处理,测定东当归不同时期地上部分主要农艺性状指标和采收期主要产量指标。结果表明,600 m海拔、35 cm×40 cm定植密度处理下,东当归生长旺盛期株高最高(14.80 cm),茎秆数较多(5.20个);1100 m海拔、35 cm×40 cm和40 cm×40 cm定植密度处理下,根膨大期株高较高,分别为42.75、42.65 cm;1100 m海拔下的3个处理和600 m海拔、40 cm×40 cm定植密度处理下单株鲜根重较大,为218.33~265.26 g;1100 m海拔、30 cm×40 cm和35 cm×40 cm定植密度处理下,折合鲜根产量较大,分别为15157.83、16725.66 kg/hm2;单株鲜根重和折合鲜根产量均与生长旺盛期茎秆数之间呈显著负相关关系,相关系数分别为-0.868和-0.820。综上所述,600 m海拔种植有利于东当归生长旺盛期生长;1100 m海拔种植有利于增加地上部分养分积累、提高单株重量和总产量;35 cm×40 cm和40 cm×40 cm密度定植有利于东当归地上部分生长,30 cm×40 cm密度定植有利于提高总产量;宜昌市适宜在1100 m海拔、30 cm×40 cm定植密度条件下种植东当归,单株重量和总产量均较高。

攀枝花地区东当归的丰产栽培技术研究

[目的]研究攀枝花地区东当归的丰产栽培技术。[方法]采用单因素的试验设计,开展不同种植密度试验、不同追肥量试验、不同遮阴效果试验和修剪拔薹试验对攀枝花地区东当归的丰产栽培技术进行研究,优选最佳栽培条件。[结果]试验的方差分析表明,东当归的最佳栽培条件为:采用种植密度为20 cm×20 cm、追肥量为尿素15 g/株和菌肥60 g/株,不采用遮阴措施,发现植株抽薹采用及时修剪。[结论]试验优选了东当归的丰产栽培技术,为东当归的进一步研究提供了依据。

四川栽培东当归挥发油成分分析

目的:对四川栽培东当归挥发油成分进行分析。方法:GC-MS联用法。结果:共鉴定出47个化合物,占挥发油总量的99.02％,并测定了各成分在挥发油中的百分含量。结论:主成分为蒿本内酯(22.8％)和丁烯基酞内酯(19.5％)。

当归与东当归对大鼠离体子宫平滑肌的影响

本文对当归和东当归在动物离体子宫平滑肌上进行了药理学比较。实验结果表明当归与东当归对离体子宫平滑肌的作用存在明显的差异，当归主要表现为抑制作用，而东当归则主要表现为兴奋作用。二者均具有对抗垂体后叶素引起的子宫平滑肌的兴奋作用。

伞形科东当归的果实形态和解剖结构

对伞形科(Apiaceae)当归属(Angelica L.)东当归〔A.acutiloba(Sieb.et Zucc.)Kitag.〕的分生果形态特征和解剖结构进行了全面观察。该种分生果的外观呈倒椭圆状长卵形,有三角状萼齿,果棱、棱槽和腹面表面均有黄白色斑点。果实横切面解剖结构具有以下特征:外果皮终止于果棱顶端的腹面处,合生面宽阔,外果皮和中果皮细胞中有大量淡黄色晶体,油管在棱槽和合生面处连续分布等。东当归的这些果实形态及解剖结构明显不同于当归属的其他种类,其分类地位有待重新探讨。

东当归地扑草净除草效果及其药害、残留分析

在前期筛选东当归地适宜化学除草剂扑草净的基础上,为了进一步了解扑草净的安全性,采用GC-MS法检测了东当归根中的扑草净残留量.结果表明:GC-MS法检测的扑草净添加回收率为83.5%-90.8%,相对标准差为0.55%-2.60%.残留测定结果显示,春季1年生东当归移栽地分别处理扑草净(40%)2和4 kg.hm-2,秋季收获(施药后152 d)后烘干的东当归根中扑草净残留量分别为0.0368和0.0464 mg.kg-1.

东当归乙醇提取物对小鼠学习记忆的影响

目的观察东当归乙醇提取物对记忆障碍模型小鼠的作用效果。方法应用氢溴酸东莨菪碱注射液(SCOP)制备小鼠记忆障碍模型,采用避暗实验、跳台实验、水迷宫实验和Y型电迷宫穿梭实验等方法观察不同剂量东当归乙醇提取物对记忆障碍模型小鼠的作用效果。结果与模型组比较,东当归乙醇提取物中、高浓度组均能改善记忆障碍,作用强度类似于石杉碱甲。结论东当归乙醇提取物对SCOP诱导的小鼠记忆障碍具有良好的改善作用。

东当归化学成分研究及定量分析

从当归属植物东当归的根的乙醇溶液中分离得到了4个化合物,通过理化特性和波谱分析分别鉴定为双(5-甲酰基糠基)醚(bis(5-formylfurfuryl)ether,1)、5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethyl-2-furaldehyde,2)、豆甾醇(stigmasterol,3)、十七烷酸(heptadecanoic acid4,)。所有化合物均为首次从该植物中分离得到,其中1为首次从该属植物中分离得到。采用高效液相色谱法对东当归所含该属特征活性成分紫花前胡素进行了定量分析。

东当归的研究进展

目的:对东当归的形态特征、化学成分及药理研究进行概述,为中药东当归的深入研究提供信息和借鉴。方法:主要以历年研究文献资料为依据,查阅整理。结果:东当归的化学成分、药理研究有一定的发展和突破。结论:为中药东当归的研究提供新思路。

东当归对四氯化碳及乙醇性肝损伤的保护作用

研究东当归水提取物对四氯化碳及乙醇所致小鼠 SGPT和 SGOT活性升高的影响。在四氯化碳及乙醇所致小鼠急性肝损伤的血清中检测 SGPT和 SGOT值。结果表明 ,37.5 %、75 .0 %和 15 0 .0 %东当归水提物在体内显著抑制四氯化碳及乙醇所致小鼠 SGPT值和 /或 SGOT值升高。

超临界二氧化碳萃取气相色谱—质谱联用分析东当归挥发油化学成分

目的对吉林省延边地区产东当归的挥发油化学成分进行分析。方法采用超临界CO2萃取技术对东当归中挥发油成分进行提取,用GC-MS联用技术分离鉴定其化学组成,计算其相对百分含量。结果超临界CO2萃取物为黄棕色油状物,得率为0.9%,用GC-MS联用技术从中鉴定出亚油酸乙酯、5,5-二甲基-双环(6,3,0)-1,7-十一烯-3-酮等30种成分,占挥发油总含量65.66%;萃取物经硅胶柱色谱分离纯化,从中鉴定出十八酸乙酯等11种成分,占总含量的85.1%。结论首次从东当归挥发油当中分离鉴定出5,5-二甲基-双环(6,3,0)-1,7-十一二烯-3-酮等10种化学成分,超临界CO2萃取与传统方法提取的东当归中挥发油化学成分有显著不同。

不同种质和表型当归与习用品东当归、牡丹叶当归的rDNA ITS序列分析

目的:通过研究比较不同种质和表型的当归与地方习用品东当归、牡丹叶当归的差异,建立当归与东当归、牡丹叶当归之间的分子鉴别。方法:对14个不同种质和表型的当归及其地方习惯用品东当归、牡丹叶当归的ITS序列进行测序和分析,探讨该片段在中药当归分子生物学水平上的鉴定意义。结果:测得当归14个个体的ITS-1,5.8S rDNA和ITS-2全序列及18S rRNA基因3′端和26S rRNA基因5′端部分碱基序列,共约664bp,其中ITS1序列长度215bp,5.8S长162 bp,ITS2序列长度为223bp。当归与东当归的遗传距离为8.6,与牡丹叶当归的遗传距离为9.6,而东当归与牡丹叶当归的遗传距离为10.7。结论:从ITS序列结果来看,两种表型的绿茎当归和紫茎当归ITS序列并无区别,栽培和野生的当归其ITS序列也完全相同。用ITS区序列来对不同种质不同表型的当归的遗传多样性进行分析并不适宜。但高度保守的ITS区可以用来鉴定当归与东当归、牡丹叶当归。

当归及其常见伪品东当归和欧当归的鉴别

目的对当归及其常见伪品东当归和欧当归药材进行鉴别。方法采用薄层色谱和紫外光谱等方法对当归、东当归和欧当归进行鉴别研究。结果当归、东当归和欧当归的薄层色谱图基本一致,但在Rf值=0.95处东当归和欧当归较当归多出一个斑点;从紫外光谱扫描图中可以看出三者的曩大吸收波长几乎没有区别。结论用薄层色谱方法可有效地鉴剐和区分药材当归、东当归和欧当归。

不同栽培措施对攀枝花地区东当归产量的影响

目前,东当归已在攀枝花市规模化种植,但因栽培措施不统一,使得东当归的产量与质量得不到保证,从而减少了种植农户的收入,为此,我们从种植密度、追肥量、阴蔽度、抽薹修剪4个栽培措施入手,开展试验并对其进行综合评价。结果表明:种植密度对东当归产量影响最大,应该严格控制,建议采用30 cm×30 cm的密度进行种植;阴蔽度对东当归产量的影响次之,应该加强控制,建议在东当归生长期保证充足的光照;追肥量与抽薹修剪对东当归产量影响最小,在生产上可根据当地土壤肥力、气候及人力物力灵活进行。

东当归控薹技术及其对根部影响研究

目的研究控制东当归抽薹的方法。方法以东当归苗栽直径、栽培密度、多效唑浓度3个因素,每个因素设计3个水平,按照正交试验L9(34)表进行试验。以抽薹率作为指标,综合考虑,选取最优的栽培东当归处理组合。结果控制抽薹的最佳处理是苗栽直径≤0.35cm,种植密度50×25cm,多效唑浓度2g/L。结论试验优选了东当归的控制抽薹的技术,为东当归栽培进一步研究提供了依据。

东当归花化学成分的分离与鉴定

目的对伞形科当归属药用植物东当归花的化学成分进行研究。方法采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、制备液相色谱等分离方法对东当归花进行化学成分分离,得到的单体化合物用波谱数据分析进行结构鉴定。结果从东当归花乙酸乙酯层分离得到16个单体,分别是芹菜素(1)、香叶木素(2)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(3)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-7-O-β-龙胆双糖苷(4)、山奈素-3-O-a-L-鼠李糖苷(5)、kanferol-3-O-a-L-(4″-E-p-cumaroil)-raminoside(6)、platanoside(7)、佛手柑内酯(8)、trans-E-3-burylikidene-4,5,6,7-tetrahydm-6,7-dihydmxy-I(3H)-isobenzojiuranone(9)、洋川芎内酯H(10)、洋川芎内酯I(11)、原儿茶酸(12)、没食子酸(13)、5-反式香豆酰基奎宁酸(14)、1-十二醇(15)、β-谷甾醇(16)。结论化合物4、6、7、14为首次从该属植物中分离得到,化合物1~3、5为首次从该植物中分离。

朝药东当归的生药学及指纹图谱研究

目的:对朝药东当归进行生药学和指纹图谱研究。方法:采用来源鉴定、性状鉴定和显微鉴定法对东当归进行系统的生药学研究。采用硅胶GF_(254)薄层板,以藁苯内酯为对照品,建立东当归的薄层鉴别方法。采用Promosil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为325 nm;柱温为30℃。以"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004 A版)"软件建立10批不同产地东当归的指纹图谱,并计算相似度。结果:东当归的TLC特征斑点清晰,分离效果好。通过相似度评价系统建立了东当归的HPLC指纹图谱,确定20个共有峰,10批东当归样品的相似度为0.859～0.978。结论:该研究所建立的方法操作简便、结果准确、重现性好,可为朝药东当归的质量控制提供依据。