葛根素通过PI3K/Akt途径对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的抑制

目的观察葛根素预处理对缺血再灌注(I/R)大鼠心肌细胞凋亡的影响及其与PI3K/Akt信号通路的关系。方法30只SD大鼠随机分为假手术组(SH组)、缺血再灌注组(I/R组)、葛根素预处理组(PU组)、葛根素预处理+LY294002组(PU+LY组)及缺血再灌注+LY294002组(I/R+LY组)。除假手术组外,其他各组大鼠均行结扎冠状动脉前降支30min,再灌注120min,监测血流动力学,Western印迹法检测心肌组织p-Akt信号蛋白的表达;TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果与I/R组比较,PU组能够明显改善心功能,抑制心肌细胞凋亡,并增加Akt的磷酸化水平(P<0.05,P<0.01)。结论葛根素预处理能够抑制缺血再灌注所致的心肌细胞凋亡,其作用机制与PI3K/Akt信号通路活化有关。

葛根素预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤及PI3K/AKT信号通路的作用

目的:观察葛根素(Puerarin,Pue)预处理对缺血再灌注大鼠心肌的保护作用及其可能机制。方法:40只SD大鼠随机分为5组(n=8):假手术组(SH组);缺血再灌注组(I/R组);葛根素预处理组(PU组);葛根素预处理+LY294002组(PU+LY组);缺血再灌注+LY294002组(I/R+LY组)。结扎冠状动脉前降支30min,再灌注120min。于缺血前、缺血30min以及再灌注60、90、120min时,测定左室收缩压(Lef tventricular systolic pressure,LVSP)、左心室舒张末压(Left ventricular end-diastolic pressure,LVEDP)、左室内压变化最大上升和下降速率(Maximum rate of left ventricular pressure development and decay,±dp/dtmax);测定心肌梗死面积百分比、一氧化氮(Nitric oxide,NO)和一氧化氮合酶(Nitric-oxide synthase,NOS)的含量。结果:I/R组较SH组各时间点的收缩及舒张功能显著降低,心肌梗死面积增加,NO和NOS含量明显降低;与I/R组比较,PU组各时间点的收缩及舒张功能下降程度明显减轻,心肌梗死面积明显减少,NO、NOS含量明显增加;PU+LY组与PU组相比各时点的收缩及舒张功能显著降低,心肌梗死面积增加,NO和NOS含量明显降低;PU+LY组、I/R+LY组与I/R组相比以上指标差异均无显著意义。结论:葛根素预处理对缺血再灌注大鼠心肌有较好的保护作用,其作用机制可能与PI3K/Akt信号通路的活化有关。

芪丹通脉片对急性缺血再灌注大鼠心肌信号转导系统PI3K/Akt和Erk1/2的影响

目的观察中药芪丹通脉片对缺血再灌注大鼠心肌梗死面积、细胞凋亡和细胞信号转导系统中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、丝(苏)氨酸激酶(Akt)和细胞外信号调节激酶(Erk1/2)的影响。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组(模型组)和芪丹通脉片预处理组。生理盐水或芪丹通脉片灌胃7 d后,大鼠麻醉开胸,结扎冠状动脉前降支40 min,再灌注4 h。伊文氏兰和TTC染色测定心肌梗死范围,计算梗死面积(IS)与缺血区面积(AAR)的比值(%,IS/AAR);TUNEL方法定性和定量检测心肌细胞凋亡指数;Westernblot测定信号蛋白的表达。结果芪丹通脉片组的心肌梗死范围明显小于模型组[(28.8±8.4)%vs.(49.1±10.3)%,P<0.01];其心肌细胞凋亡指数亦显著低于模型组[(11.6±2.3)%vs.(20.3±4.5)%,P<0.01];而其Akt和Erk1/2的磷酸化表达水平增加,与模型组比较分别增加了2.5倍和1.9倍(P<0.01,P<0.05)。结论芪丹通脉片能够抑制缺血再灌注所致的心肌细胞损伤,并影响生存信号通路PI3K/Akt和Erk1/2的活化水平。

辛伐他汀后处理对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及机制

目的观察辛伐他汀对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤(I/R)细胞凋亡的影响,初步探讨其机制。方法采用Langendorff离体心脏灌流模型,32只SD大鼠随机等分为4组:对照组、I/R组、辛伐他汀后处理组、辛伐他汀+L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)组。进行再灌注心律失常分析;冠脉流出液中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)及NO含量测定;Western印迹法检测心肌组织p-Akt信号蛋白的表达;Annexin-V-FITC/PI法检测细胞凋亡指数(AI)。结果与I/R组比较,辛伐他汀后处理组心律失常发生率下降、CK和LDH含量降低、p-Akt蛋白表达及NO含量增加、细胞AI降低(P<0.01)。辛伐他汀+L-NAME组较辛伐他汀后处理组心律失常发生率升高、CK和LDH含量增加、p-Akt蛋白表达及NO含量降低、细胞AI增高(P<0.01);与I/R组比较,无显著差异(P>0.05)。结论辛伐他汀后处理能减轻大鼠心肌I/R损伤,减少心肌细胞凋亡,其作用机制可能与PI3K-Akt通路活化有关。

丙泊酚对急性肺损伤大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡及PI3K/Akt通路的影响

目的探讨丙泊酚的肺保护作用及其可能作用机制。方法采用尾静脉注射内毒素建立急性肺损伤模型,丙泊酚和LY294002同样经过尾静脉给药。将Wistar大鼠随机分入实验对照组(C组)、脂多糖组(L组)、脂多糖+丙泊酚组(LP组)和LY294002组(LY组)。每组16只,且每组随机选取8只进行肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)的分离。给药前及开始后第3、6和12h测定动脉血氧分压(PaO2),实验结束后观察肺湿/干重(W/D)比值、肺组织病理学检查并进行肺损伤轻重程度评分,同时观察各组大鼠ATⅡAkt活性、Bax蛋白表达及凋亡率。结果实验前各组PaO2无明显差异,注射LPS后L组PaO2持续下降,和C组相比其PaO2显著降低(P<0.05)。实验结束后L组和C组相比其W/D比值、肺组织病理学检查评分、ATⅡBax蛋白表达及凋亡率显著升高(P<0.05),而ATⅡAkt活性显著降低(P<0.05)。而LP组和L组相比W/D比值、肺组织病理学检查评分、ATⅡBax蛋白表达及凋亡率显著降低(P<0.05),而PaO2和ATⅡAkt活性显著升高(P<0.05)。而LY组加入LY294002后明显抑制丙泊酚以上保护作用。结论丙泊酚具有肺保护作用,且该作用可能与其通过激活PI3K/Akt通路而抑制ATⅡ的过度凋亡作用相关。

罗布麻叶提取物预处理对缺血再灌注大鼠心肌损伤的作用

目的:观察罗布麻叶提取物(AVLE)预处理对心肌缺血再灌注(MI/R)大鼠心肌细胞凋亡和细胞信号转导系统中丝(苏)氨酸激酶(Akt)和细胞外信号调节激酶(ERK1/2)的影响。方法:采用SD大鼠MI/R模型(结扎冠脉左前降支起始部30min后再灌注4h),随机分为Sham组(假手术)、MI/R组、AVLE预处理组[AVLE(500mg/kg)灌胃,每日一次,连续灌胃7天后再行MI/R]。用TUNEL法检测各组心肌细胞凋亡,计算凋亡指数(AI);荧光免疫分析法检测各组心肌组织凋亡蛋白Caspase-3活性;Western Blotting测定心肌组织Akt和ERK1/2的表达水平和磷酸化水平。结果:与Sham组比较,MI/R组心肌细胞AI显著升高(P<0.05),心肌组织Caspase-3活性明显升高(P<0.05),心肌Akt和ERK1/2的磷酸化水平显著降低(P<0.05);与MI/R组比较,AVLE预处理组AI明显下降(P<0.05),心肌组织Caspase-3活性显著降低(P<0.05),Akt和ERK1/2磷酸化水平显著升高(P<0.05)。结论:AVLE能够抑制缺血再灌注所致心肌细胞损伤,其作用与生存信号通路蛋白PI3K/Akt和ERK1/2的活化水平有关。

PI3K/Akt信号通路调节心脏功能的研究进展

PI3K/Akt是调节心脏功能的一条重要的信号转导通路,主要通过血管内皮生长因子介导血管生成、抑制心肌细胞凋亡、重构心室、促进细胞能量代谢等方面调节心脏功能。研究发现PI3K/Akt信号通路在内分泌疾病、肾病、肝纤维化、肿瘤及心血管疾病的发生、发展中起着重要作用。本文就PI3K/Akt信号通路调节心脏功能的分子机制作一阐述。

补阳还五汤含药血清对骨髓间充质干细胞增殖及细胞周期的影响

目的:研究补阳还五汤含药血清对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖及细胞周期的影响。方法:以6.5,13,26 g·kg^(-1)补阳还五汤和等量蒸馏水连续灌胃SD大鼠1周,制备3种补阳还五汤含药血清和空白血清。将BMSCs分为补阳还五汤6.5 g·kg^(-1)组(用含10%6.5 g·kg^(-1)生药制备的血清培养),补阳还五汤13 g·kg^(-1)组(用含10%13 g·kg^(-1)生药制备的血清培养),补阳还五汤26 g·kg^(-1)组(用含10%26 g·kg^(-1)生药制备的血清培养),空白组(用含10%空白血清培养)。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测各组BMSCs的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测磷脂酰肌醇-3羟基激酶(PI3K)和磷酸化丝(苏)氨酸蛋白酶(p-Akt)(Ser473)蛋白的表达。结果:13,26 g·kg^(-1)生药制备的补阳还五汤含药血清作用BMSCs 48,72 h后,细胞增殖活性较空白组明显升高(P<0.05);3种补阳还五汤含药血清作用48 h后,BMSCs在S期的细胞比率随着药物浓度的升高而升高,与空白组比较有统计学意义(P<0.05);13,26 g·kg^(-1)生药制备的补阳还五汤含药血清作用48 h后,PI3K和p-Akt(Ser473)蛋白表达较空白组显著增强(P<0.01)。结论:13,26 g·kg^(-1)生药制备的补阳还五汤含药血清可能通过活化PI3K/Akt信号通路促使细胞进入S期,增强BMSCs增殖活性。