伯氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶5抗血清对有性阶段生长抑制作用的研究

目的:探讨伯氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶5(PP5)作为传播阻断疫苗候选抗原的可行性。方法:PCR扩增PP5的功能区(407-711 aa),克隆入p ET32a(+)载体。IPTG诱导PP5重组蛋白表达后,纯化重组蛋白并免疫小鼠。ELISA方法检测抗PP5免疫血清效价。实验观察免疫血清对配子体出丝、动合子转化率和蚊胃内卵囊形成的影响。结果:成功表达PP5重组蛋白,抗PP5免疫血清抗体滴度可达1∶256 000,且对配子体出丝的抑制呈剂量依赖性,在1∶5和1∶10倍稀释时,配子体出丝数目分别减少75%和45%,与对照组相比差异具有显著统计学意义0. 05)。免疫血清可显著抑制动合子形成数目,在1∶5倍稀释时,动合子转化率减少14. 79%(P<0. 05),蚊感染率和胃内卵囊密度分别减少26. 05%和74. 19%(P<0. 05)。结论:PP5蛋白具有良好的免疫原性和抗原性。抗PP5免疫血清具有明显的传播阻断效果。

约氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶5抗血清对有性阶段生长抑制作用的研究

目的:探讨约氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶5(PyPP5)作为传播阻断疫苗候选抗原的可行性。方法:PCR扩增PyPP5蛋白优势抗原表位,克隆入pET32a(+)载体。IPTG诱导PyPP5重组蛋白(rPyPP5)表达后,纯化并免疫小鼠获取抗血清。体外实验观察抗-PyPP5免疫血清对配子体出丝、动合子形成和转化率的影响。结果:成功制备抗-PyPP5免疫血清。抗-PyPP5免疫血清(1∶5倍稀释)使配子体出丝率、动合子数目和动合子转化率分别下降29.89%(P<0.05)、38.59%(P<0.05)和64.30%(P<0.01)。结论:PyPP5蛋白具有良好的抗原性。抗-PyPP5免疫血清可有效抑制约氏疟原虫传播。

非小细胞肺癌组织中RIP1与PGAM5蛋白表达及临床预后意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中受体相互作用蛋白1(RIP1)与丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶5(PGAM5)蛋白表达及临床预后意义。方法选取2013年11月至2015年12月登封市人民医院110例NSCLC标本(非小细胞肺癌组)和相邻肺组织样本(距肿瘤组织边缘3 cm,癌旁组)为研究对象,免疫组化法测定各组RIP1、PGAM5蛋白表达水平。采用χ^(2)检验评估RIP1、PGAM5表达与NSCLC患者临床病理特征的关系,多因素Cox比例风险回归模型探讨RIP1与PGAM5表达在NSCLC中的预后意义。结果非小细胞肺癌组RIP1、PGAM5蛋白表达阳性率高于癌旁组(65.4%vs18.1%,70.9%vs14.5%)(P<0.05)。RIP1、PGAM5蛋白表达与肿瘤最大径、TNM分期、浸润深度、病理级别、淋巴结转移、复发明显相关,且肿瘤最大径≥5 cm、TNM分期越高、浸润深度越深、病理级别越高、有淋巴结转移、有复发者RIP1、PGAM5阳性表达率越高(P<0.05)。RIP1、PGAM5阳性的非小细胞肺癌患者5年生存率较RIP1、PGAM5阴性表达者均显著降低(P<0.05)。肿瘤最大径≥5 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ、浸润深度为浸润≥6 cm、有淋巴血管浸润、病理级别高、有复发、RIP1阳性和PGAM5阳性的非小细胞肺癌患者5年生存率均显著降低(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、病理级别高、RIP1阳性、PGAM5阳性是影响非小细胞肺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论非小细胞肺癌组织中RIP1与PGAM5蛋白表达升高,二者与临床病理特征存在一定相关性;RIP1、PGAM5阳性表达是非小细胞肺癌预后的独立危险因素。