丝切蛋白-1、磷酸化丝切蛋白-1、CD11c在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的探讨丝切蛋白1(Cofilin-1)、磷酸化丝切蛋白1(p-Cofilin-1)及树突状细胞(DCs)亚群在鼻咽癌组织中的表达及与预后的关系。方法回顾性分析2011年1月至2015年12月97例鼻咽癌患者的临床资料,采用免疫组化法检测鼻咽癌组织中Cofilin-1、p-Cofilin-1及CD11c+DCs的表达情况。分析三者表达与鼻咽癌临床病理特征和预后的关系。结果97例鼻咽癌患者中,Cofilin-1低表达率为26.8%(26/97),高表达率为73.2%(71/97);p-Cofilin-1低表达率为27.8%(27/97),高表达率为72.2%(70/97)。CD11c低表达率为80.4%(78/97),高表达率为19.6%(19/97)。M分期、临床分期、治疗后转移、治疗前骨转移和治疗后出现骨转移与Cofilin-1的表达有关(P<0.05);治疗后转移和治疗后出现骨转移与p-Cofilin-1的表达有关(P<0.05);CD11c表达与鼻咽癌临床病理参数均无关(P>0.05)。Cofilin-1低表达组和高表达组1、3、5年生存率分别为84.6%、73.1%、73.1%和93.0%、61.7%、46.7%(P=0.094);低表达组和高表达组1、3、5年无远处转移生存率分别为100.0%、100.0%、100.0%和87.2%、73.3%、68.6%(P=0.002)。p-Cofilin-1低表达组和高表达组1、3、5年生存率分别为85.2%、51.9%、40.4%和92.9%、72.7%、59.3%(P=0.075);低表达组和高表达组1、3、5年无远处转移生存率分别为83.5%、53.7%、53.7%和95.1%、89.9%、85.5%(P=0.001)。CD11c低表达组和高表达组1、3、5年生存率分别为89.7%、61.3%、46.5%和94.7%、89.5%、89.5%(P=0.007);低表达组和高表达组1、3、5年无远处转移生存率分别为88.8%、80.2%、76.1%和100.0%、93.8%、87.1%(P=0.175)。结论Cofilin-1表达水平越高,肿瘤转移风险越高,无远处转移生存时间越短;p-Cofilin-1表达水平越高,肿瘤发生转移的风险越低,无远处转移生存时间越长;CD11c表达水平越高,总生存时间越长。Cofilin-1、p-Cofilin-1、CD11有望成为鼻咽癌靶向治疗和预后预测的标志物。

丝切蛋白-1与卵巢癌分化关系的实验研究

目的:探讨细胞骨架蛋白——丝切蛋白-1表达与卵巢癌细胞分化程度的关系。方法:随机选取经手术切除的原发性卵巢癌30例,用免疫组化法检测丝切蛋白-1在这些样本中的表达情况,并分析与卵巢癌细胞分化程度的关系。结果:卵巢癌中丝切蛋白-1表达均随着肿瘤的恶性程度增加而逐步增加,其表达量与肿瘤细胞的分化程度密切相关(r=0.97,P<0.05)。结论:丝切蛋白-1表达量与卵巢癌的恶性程度密切相关,提示其可作为卵巢癌治疗的一个潜在靶点。

丝切蛋白1及前纤维蛋白1在外阴鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探究丝切蛋白1(CFL1)及前纤维蛋白1(PFN1)在外阴鳞状细胞癌(VSCC)中的表达与意义。方法采用免疫组化和免疫印迹方法检测CFL1及PFN1在VSCC中的表达及其与临床病理资料相关性。结果 CFL1在VSCC中的表达显著高于外阴的正常皮肤(P<0.05);临床Ⅲ期的表达明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05);在低分化、中分化的VSCC中的表达明显高于高分化VSCC(P<0.05);伴淋巴结转移的表达明显高于无淋巴结转移(P<0.05)。PFN1在VSCC中的表达显著高于外阴的正常皮肤(P<0.05);临床Ⅲ期的表达明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05);伴淋巴结转移的表达明显高于无淋巴结转移(P<0.05);VSCC低、中分化和高分化之间没有统计学差异(P>0.05)。Pearson相关性分析结果表明:CFL1及PFN1在VSCC中的表达呈正相关(r2=0.753,P<0.001)。结论 CFL1及PFN1的表达与VSCC的发生和发展有关。

抑制ROCKⅡ下调丝切蛋白1表达提高胶质瘤细胞的放射敏感性

目的研究丝切蛋白1(cofilin1,CFL1)介导放射抵抗性的潜在机制,探讨CFL1的上游调控元件与人脑胶质瘤细胞经放疗后细胞活力的关系。方法抑制Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶Ⅱ(Rho-associated coiled-coil forming proteinkinase,ROCKⅡ)后,测定正常U251细胞及放射抵抗性U251(RR-U251)细胞CFL1蛋白的表达水平;并通过放射治疗后细胞的增殖、侵袭和迁移实验,评估其放射敏感性。结果通过抑制 ROCKⅡ,RR-U251细胞的增殖、迁移和侵袭能力均明显降低,放射敏感性得到显著提高。结论ROCKⅡ为CFL1介导放射抵抗性的表型之一;其为进一步提高临床放射治疗的效果提供了潜在的生物标志物。

丝切蛋白-1作为肿瘤治疗生物标记分子的作用机制

肌动蛋白解聚因子丝切蛋白-1是普遍存在于真核生物的细胞骨架蛋白质。作为肌动蛋白动力学的关键调节因子,丝切蛋白-1参与了多种细胞活动,包括细胞凋亡、细胞运动及胞质分裂等。近年来的研究发现,丝切蛋白-1在肿瘤细胞中高表达,与肿瘤的发生、迁移及侵袭程度相关,对于肿瘤的发生及发展过程是必不可少的。丝切蛋白-1高表达的肿瘤细胞具有低放射敏感性。因此,丝切蛋白-1未来可用作肿瘤早期诊断、监测和决策治疗的生物标记分子。

Toll样受体4、丝切蛋白-1及可溶性白细胞介素-2受体在肝癌患者组织中的表达及意义

目的探讨Toll样受体(TLR)4、丝切蛋白(ADF)-1及可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)在肝癌组织中的表达及意义。方法纳入肝癌患者50例,取患者手术切除癌组织、癌旁组织标本。Western印迹法检测TLR4、ADF-1表达,酶联免疫吸附试验检测SIL-2R表达,对待测标本进行免疫组化染色。结果癌组织中TLR4、ADF-1、SIL-2R表达明显高于癌旁组织(P<0.05)。肿瘤体积≥5 cm^(3)、病理分期Ⅲ、Ⅳ期、有淋巴结转移、低分化患者TLR4、ADF-1、SIL-2R表达更高(均P<0.05)。肝癌组织中TLR4、ADF-1、SIL-2R表达呈正相关(P<0.05)。结论TLR4、ADF-1、SIL-2R在肝癌组织中呈现异常高表达,与肿瘤体积等病理参数具有相关性,且三者在肝癌组织中具有一定相关性,为肝癌的诊断、疗效评价、预后评估提供新的参考依据。

丝切蛋白-1在乳腺导管癌中的表达及意义

目的探讨丝切蛋白-1（eofilin-1，CFL-1）在乳腺导管癌中的表达及意义。方法应用高通量组织芯片技术建立组织芯片，采用免疫组织化学SP法检测69例乳腺癌旁组织、24例乳腺导管内癌组织、69例乳腺浸润性导管癌组织中CFL-1蛋白的表达情况。结果CFL-1蛋白在乳腺癌旁组织、乳腺导管内癌组织及乳腺浸润性导管癌组织中的阳性表达率逐渐升高，其阳性表达率依次为26．09％、62．50％、82．61％，差异有统计学意义（P〈0．05）。在乳腺浸润性导管癌中，CFL-1蛋白高表达与肿瘤TNM分期和淋巴结转移有关（P〈0．05），与患者年龄、肿瘤大小、病理分级无关（P〉0．05）。结论CFL-1表达增高可能在乳腺浸润性导管癌的发生、发展、侵袭和转移过程中起重要作用。

丝切蛋白1表达水平与原发性肝细胞肝癌患者预后的相关性

目的:探讨丝切蛋白1(cofilin 1)对原发性肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)预后判断的价值。方法:收集2012年12月至2014年5月诊断为HCC且在复旦大学附属中山医院接受HCC切除术患者术后肿瘤组织标本126例。采用免疫组织化学染色检测肿瘤组织中cofilin 1的表达,分析cofilin 1表达水平与肿瘤患者临床指标的相关性。采用GraphPad软件分析cofilin 1表达水平与患者术后复发与生存时间的相关性。采用Cox回归风险比例模型分析HCC切除术后复发的相关危险因素。结果:Cofilin 1免疫组织化学染色评分与术前甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)、肿瘤大小及巴塞罗那临床肝癌分组方案(BCLC分期)正相关(P<0.05,R<0.3)。生存曲线分析显示:cofilin 1高表达组、低表达组患者术后无病生存时间、总生存时间差异均有统计学意义(P<0.05);不同BCLC分期和肿瘤大小HCC患者间术后无病生存时间、总生存时间差异均有统计学意义(P<0.05),而不同AFP水平和侵袭发生与否患者亚组间术后无病生存时间、总生存时间差异无统计学意义。Cox回归风险比例模型的单因素分析发现:cofilin 1表达水平对患者术后复发和生存情况均有预测价值(P<0.05);多因素分析显示:cofilin 1是HCC患者行切除术后复发的独立危险因素(HR=1.647,95%CI 1.015~2.672),也是术后生存的独立危险因素(HR=2.412,95%CI 1.696~4.940)。结论:Cofilin 1高表达与HCC患者术后复发及较短生存时间相关,是肝癌术后复发的独立危险因素,可用于评估HCC切除术后患者的预后。

美金刚在慢性脑低灌注大鼠中通过调节海马区丝切蛋白水平改善认知损伤的研究

目的观察慢性脑低灌注(CCH)模型大鼠经美金刚干预后海马区丝切蛋白的变化,探讨丝切蛋白对认知受损可能的保护作用。方法将48只雄性SD大鼠随机分为CCH组、假手术组、美金刚组和溶剂组,每组12只。假手术组找到并游离双侧颈总动脉而不结扎,其余3组均进行双侧颈总动脉永久性结扎手术,制备CCH模型。美金刚组腹腔注射美金刚2.5mg/(kg·d),溶剂组注射等量生理盐水。4周后采用旷场实验和水迷宫实验检测大鼠自主探索活动和空间学习记忆能力;Western blot方法检测各组海马区突触素和丝切蛋白水平。结果与溶剂组比较,美金刚组旷场实验总行程、站立次数和中心区域行程明显增加[(1303.4±211.3)cmvs (606.0±216.8)cm,P<0.01;(56.7±17.7)次vs (43.6±8.3)次,P<0.05;(218.9±137.6)cmvs (89.8±69.3)cm,P<0.05],水迷宫空间探索实验逃避潜伏期明显缩短[(4.7±2.3)s vs (8.3±2.3)s,P<0.01],目标象限时间和进入平台次数明显增加[(43.4±9.1)%vs (36.6±4.4)%,P<0.05;(5.8±1.8)次vs (3.4±1.3)次,P<0.01],工作记忆逃避潜伏期更短,1、3d目标象限时间更高(P<0.01),突触素和丝切蛋白水平更高(P<0.05)。与CCH组比较,假手术组旷场实验总行程、站立次数、中心区域时间和中心区域行程明显增加[(962.7±186.2)cmvs (827.8±182.3)cm,(71.7±20.0)次vs (30.0±13.6)次,(55.3±34.6)s vs (24.5±19.7)s,(215.8±120.0)cmvs (96.4±79.0)cm,P<0.01];水迷宫空间探索实验逃避潜伏期更短[(4.1±1.8)s vs (7.2±3.5)s,P<0.05],工作记忆逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),目标象限时间明显升高(P<0.01),海马区突触素和丝切蛋白水平更高(P<0.05)。结论CCH可引发海马区丝切蛋白和突触素水平下降,推测N-甲基-D-天门冬氨酸受体拮抗剂美金刚可能是通过增加海马区丝切蛋白和突触素表达改善脑低灌注所致认知功能受损。

尿液足细胞生物标志物在诊断免疫球蛋白A肾病中的价值

目的筛选在免疫球蛋白A肾病(IgAN)的诊断中具有临床价值的尿液足细胞生物标志物,并分析其与临床病理特征的相关性。方法选取129例IgAN患者作为IgAN组,60例特发性膜性肾病(IMN)患者作为IMN组,63例健康志愿者作为健康组。检测并比较上述三组研究对象尿液中c‑Maf诱导蛋白(CMIP)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)、丝切蛋白‑1(cofilin‑1)、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)、α‑klotho蛋白、肾病蛋白(nephrin)和足盂蛋白(PCX)的水平。应用受试者工作特征(ROC)曲线分析尿液足细胞生物标志物诊断IgAN的临床价值,应用Pearson或Spearman相关法分析尿液足细胞生物标志物与IgAN患者临床指标的相关性。结果IgAN与IMN组间、IgAN与健康组间的cofilin‑1和suPAR水平均存在差异(均P<0.05)。suPAR诊断IgAN的ROC曲线下面积为0.730,suPAR联合cofilin‑1诊断IgAN的ROC曲线下面积为0.772(均P<0.05)。相关性分析结果提示,suPAR与收缩压、24 h尿蛋白、总胆固醇、高密度脂蛋白、牛津病理评分E呈正相关,与白蛋白呈负相关;cofilin‑1与收缩压和舒张压均呈正相关,与估算肾小球滤过率呈负相关。结论IgAN患者的尿液足细胞生物标志物suPAR和cofilin‑1水平特异性升高,suPAR联合cofilin‑1在IgAN的无创诊断中有一定的价值。

丝切蛋白在脑卒中后认知障碍中的研究进展

脑卒中后认知障碍(PSCI)不仅严重影响患者生存质量,还给患者家庭带来沉重负担。10%的患者在第1次脑卒中后出现痴呆,>1/3的患者在脑卒中复发后出现痴呆。38%的患者在脑卒中后1年内出现不符合痴呆症标准的认知障碍[1]。PSCI发病机制涉及广泛,其中,因丝切蛋白(cofilin)在神经系统发育中具有神经形成、神经突伸长、树突棘形成以及神经传递等功能,对学习和记忆至关重要[2-3]。越来越多的研究探讨cofilin在PSCI中的作用,试图寻找防治PSCI的干预靶点,本文就这方面的研究进展进行综述如下。

结肠癌组织中Cofilin-1蛋白的表达及临床病理意义

目的探讨结肠癌组织中Cofilin-1蛋白的表达及其与肿瘤侵袭和转移的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测60例结肠癌组织、40例癌旁正常组织、26例转移淋巴结组织标本中Cofilin-1蛋白的表达水平,并结合临床病理参数进行分析。结果 Cofilin-1蛋白在结肠癌组织、转移淋巴结组织中表达率分别为76.7%、61.5%,均明显高于癌旁正常组织中的32.5%表达率。Cofilin-1在结肠癌组织、转移淋巴结组织中的表达率明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(P<0.05);Cofilin-1蛋白的表达水平与结肠癌组织分化程度、Dukes分期、浆膜侵犯及淋巴结转移有关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小无明显相关(P>0.05);Cofilin-1与结肠癌预后密切相关(P<0.05)。结论检测Cofilin-1蛋白的表达有助于判断结肠癌的浸润、转移及预后。

17β-雌二醇对大鼠血管平滑肌细胞C反应蛋白及其mRNA表达的影响

目的:探讨17β-雌二醇对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)生成的影响及其相关机制。方法:采用免疫细胞化学法观察17β-雌二醇对正常状态大鼠VSMCs CRP表达的影响,免疫印迹法检测其对Ang-Ⅱ刺激大鼠VSMCs CRP及p-ERK1/2表达的影响,RT-PCR方法检测其对Ang-Ⅱ刺激状态大鼠VSMCs CRPmRNA表达的影响。结果:本实验所选用17β-雌二醇浓度(1、10、100 nmol/L)不影响正常状态大鼠VSMCs形态及CRP表达,但呈浓度依赖性抑制Ang-Ⅱ刺激的大鼠VSMCs CRP(r=-0.834,P<0.01)、p-ERK1/2(r=-0.712,P<0.05)及CRP mRNA(r=-0.856,P<0.01)的表达。结论:17β-雌二醇可以抑制Ang-Ⅱ刺激的大鼠VSMCs CRP及其mRNA表达,其作用机制与抑制ERK1/2信号转导通路相关。

小剂量螺内酯对糖尿病肾病患者可溶性血管间黏附因子-1的影响

目的探讨螺内酯对2型糖尿病肾病(DN)患者可溶性血管间黏附因子-1(sVCAM-1)的影响。方法将2012年2月至2013年5月该院肾脏内分泌门诊及住院的94例2型糖尿病患者分为单纯糖尿病组(SDM组)30例、早期糖尿病肾病组(EDN组)32例、临床糖尿病肾病组(CDN组)32例。另选择34名健康者作为对照组。糖尿病组(SDM组、EDN组、CDN组)给予小剂量螺内酯治疗,采集治疗前和治疗12周后静脉血和24 h尿。检测各组血清中sVCAM-1水平、尿微量清蛋白排泄率(UAER)等。结果治疗前,血清sVCAM-1水平在SDM组、EDN组及CDN组中均明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01);螺内酯治疗12周后,三组患者血清sVCAM-1水平及UAER较治疗前降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论小剂量螺内酯能显著降低DN患者血清sVCAM-1水平及UAER,延缓DN的进展。

大剂量维生素C通过减少糖酵解和蛋白质合成抑制乳腺癌细胞增殖

目的:观察大剂量维生素C对乳腺癌细胞增殖及荷瘤小鼠肿瘤生长的影响,并探索其中的机制。方法:以乳腺癌细胞Bcap37和MDA-MB- 453为体外研究对象,分别给予小(0.01 mmol/L)、中(0.10 mmol/L)、大(2.00 mmol/L)剂量的维生素C。采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖;蛋白质印迹法检测葡萄糖转运蛋白1(Glut1)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白表达;乳酸脱氢酶比色法测定乳酸含量。同时,取10只6周龄雌性BALB/c裸鼠,采用皮下接种乳腺癌Bcap37细胞建立荷瘤小鼠移植瘤模型,取5只小鼠腹腔注射维生素C( 4 g/kg ),观察肿瘤重量和小鼠体质量的变化。结果:体外细胞学实验结果显示,与空白对照组比较,大剂量维生素C作用下Bcap37和MDA-MB- 453细胞增殖受到抑制(均 P < 0.01 ),Glut1转运蛋白表达减少(均 P <0.05),乳酸分泌量减少(均 P < 0.01 ),mTOR信号通路相关蛋白表达水平下调(均 P < 0.05 )。体内实验结果显示,与对照组比较,大剂量维生素C组肿瘤重量明显减小( P <0.05),但体质量增长无明显变化。结论:大剂量维生素C可抑制乳腺癌细胞增殖,这一效果可能与大剂量维生素C抑制乳腺癌细胞能量摄取和下调mTOR信号通路有关。

OSBPL2介导RhoA/ROCK2信号通路调控听觉细胞肌动蛋白细胞骨架

目的:探索氧化固醇结合蛋白样蛋白2(oxysterol binding protein-like 2,OSBPL2)对听觉细胞肌动蛋白骨架形态和功能的影响及其相关分子机制。方法:采用OSBPL2基因敲除(Osbpl2-KO)HEI-OC1细胞探讨OSBPL2缺陷对听觉细胞肌动蛋白细胞骨架形态和功能的影响;扫描电镜观察Osbpl2-KO小鼠毛细胞静纤毛形态;Western blot实验检测HEI-OC1细胞和耳蜗内Rho/ROCK信号通路关键效应因子Rho激酶2(Rho-associated coiled-coil-containing protein kinase 2,ROCK2)、Lim激酶1(LIM domain kinase 1,LIMK1)、肌动蛋白解聚因子/丝切蛋白1(actin depolymerizing factor/cofilin 1,ADF/CFL-1)的表达水平。结果:Osbpl2-KO HEI-OC1细胞微丝骨架中纤维肌动蛋白(F-actin)的分布明显减少,细胞外周微刺突和丝状伪足明显减少,细胞迁移能力明显减弱;扫描电镜下观察发现Osbpl2敲除导致小鼠耳蜗内毛细胞静纤毛变短且排列紊乱;Western blot检测结果表明,在HEI-OC1细胞和小鼠耳蜗中OSBPL2-KO均导致RhoA/ROCK2信号通路的抑制。结论:在听觉细胞中OSBPL2介导的RhoA/ROCK2信号通路在维持肌动蛋白细胞骨架形态和功能的过程中发挥重要的调控作用。

过表达Cofilin-1对人胶质瘤细胞侵袭和增殖及凋亡的影响

【目的】分析胶质瘤细胞系中丝切蛋白-1（Cofilin-1）的表达水平，探讨其对胶质瘤细胞增殖、凋亡及侵袭的作用及分子机制。【方法】采用基因克隆技术，构建Cofilin-1过表达质粒，转染人胶质瘤细胞系U-87MG细胞。Real-timePCR及Westernblot检测验证Cofilin-1转染效果；MTT实验检测细胞增殖能力；Transwell小室实验检测细胞侵袭能力；ELISA实验检测细胞培养上清中血管内皮生长因子A（VEGFA）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）含量；Westernblot检测细胞中凋亡相关蛋白bax和Bcl-2及AKT和p-AKT蛋白的表达水平。【结果】转染Cofilin-1过表达质粒后，U-87MG细胞中Cofilin-1的表达水平显著升高；Cofilin-1过表达促进sHG44细胞增殖和侵袭能力，细胞培养上清中VEGFA和MMP-9含量升高；细胞凋亡相关蛋白bax表达降低而Bcl-2表达升高，细胞胞中p．AKT蛋白的表达水平增加。【结论】Cofi1in-1过表达能够促进胶质瘤细胞的增殖和侵袭，其机制可能通是过AKT通路活化发挥作用；Cofilin-1可能成为胶质瘤的潜在治疗靶点。

丝切蛋白-1及磷酸甘油酸激酶1在不同放疗敏感性星形胶质细胞瘤中的表达

目的分析不同放疗敏感性星形胶质细胞瘤蛋白表达特点，筛选与放射耐受关系密切的蛋白质。方法通过随访胶质瘤切除术后接受三维适型调强放射治疗的患者，按其存活状况及生活质量分为放疗敏感组（7例）和耐受组（8例），病理诊断均为星形胶质细胞瘤（WHOⅡ级）。采用二维液相色谱串联质谱法（2D—LC—MS／MS）对人组肿瘤标本进行蛋白组学分析，筛选差异表达蛋白。并对放疗耐受相关蛋白丝切蛋白-1（cofilin-1）及磷酸甘油酸激酶1（phosphoglyceratekinaseI，PGKl）用免疫印记法（Westernblot）检测其表达量。结果2D—LC—MS／MS共鉴定出两组问差异表达蛋白36个，以cofilin一1与PGKl含量最为丰富，在放疗耐受组肿瘤中呈高表达状态。Westernblot检测结果与蛋白组学分析相吻合。结论放疗后预后不同的同级别星形胶质细胞瘤问蛋白表达差异明显，以cofilin—I及PGKl为代表，可能成为星形胶质细胞瘤放疗耐受的潜在生物标志物。

Nelfinavir损害鼠胰岛素瘤INS-1细胞内IRS-2信号传导

目的 :探讨 HIV- 1蛋白酶抑制剂 nelfinavir对胰岛 β细胞内胰岛素信号传导蛋白磷酸化的影响。方法 :体外观察鼠胰岛素瘤 INS- 1细胞经 nelfinavir治疗 4 8h后 ,用 10 0 nmol/ L胰岛素刺激 2 min,细胞裂解产物中的胰岛素信号传导蛋白磷酸化采用免疫沉淀和 Western印迹方法测定。用台盼蓝染色细胞计数和 MTT衰减试验 ,评估nelfinavir对 INS- 1细胞活力的影响。结果 :nelfinavir降低胰岛素刺激的胰岛素受体底物 IRS- 2和 Akt- Thr3 0 8磷酸化 ,并呈剂量依赖关系。nelfinavir浓度为 10 μmol/ L时 ,分别降低 IRS- 2和 Akt- Thr3 0 8磷酸化达 5 2 %和 5 5 % ,在这个浓度下 nelfinavir没有细胞毒性作用。结论 :nelfinavir治疗可以损害胰岛 β细胞内 IRS-

EDG-1和CFL-1在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的观察内皮细胞分化基因-1(endothelial differentiation gene1,EDG-1),丝切蛋白-1(cofilin1,CFL-1)在原发性肝细胞癌(hepato cellular carcinoma,HCC)中的表达水平并探讨二者的相互关系及其临床意义。方法收集中南大学湘雅二医院肝胆外科2005年1月至2006年12月行原发性肝癌切除并经病理检查证实为HCC的标本57例作为实验组,另选取15例癌旁组织(距肿块≥3cm)作为对照组,用EnVision免疫组化法检测EDG-1和CFL-1在HCC组织中的表达情况,分析二者之间的相关性及其与患者的临床病理特征和预后的关系。结果 HCC组EDG-1和CFL-1的阳性表达率分别为54.4%和64.9%,均明显高于其在癌旁正常肝脏组织中的表达(均为13.3%),差异均有统计学意义(P<0.05)。EDG-1与CFL-1在肝癌组织中的表达呈显著正相关(P<0.05)。EDG-1和CFL-1在肿瘤转移组及低分化组中的表达阳性率均明显高于其在无肿瘤转移组及高、中分化组中的表达,差异有统计学意义(P<0.05);但两者表达的阳性率与患者的性别、年龄、是否合并乙肝、甲胎蛋白是否异常、肿瘤的大小、肝硬化程度、是否合并癌栓之间均无明显差异(P>0.05)。EDG-1低表达组和高表达组的平均生存期分别为(19.04±7.07)和(10.28±5.58)月,差异有统计学意义(P<0.05)。CFL-1低表达组和高表达组的平均生存期分别为(21.65±6.47)和(11.23±4.69)月,差异有统计学意义(P<0.05)。COX多因素回归分析的结果提示:EDG-1及CFL-1的表达为影响HCC患者预后的独立因素。结论 HCC组织中EDG-1和CFL-1均呈高表达,且二者的表达在HCC组织中呈正相关;EDG-1和CFL-1的表达水平与HCC的恶性程度及患者的预后均密切相关,有望成为HCC患者的预后评估指标。