电化学法研究多粘菌素B与磷脂酰丝氨酸的相互作用及与其他磷脂的比较

采用头基修饰的磷脂在金电极表面构建了稳定的磷脂双层膜,并使用该膜模拟生物膜对多肽类抗生素多粘菌素B(PMB)和磷脂酰丝氨酸的相互作用进行了研究。PMB可与磷脂酰丝氨酸发生相互作用,破坏双层膜结构,从而使膜的通透性升高。PMB的浓度、作用时间以及膜中胆固醇的存在均影响二者的作用程度。被PMB破坏的双层膜电极在一定程度上可在KCl溶液中重新自组装,且自修复的程度与修复时间和PMB的浓度有关。此外,比较了PMB和多种磷脂之间的作用程度,磷脂的头基、烃链的长度以及不饱和度均会影响二者间的相互作用。

聚L-丝氨酸修饰电极选择性测定去甲肾上腺素

用循环伏安法制备了聚L-丝氨酸修饰玻碳电极，研究了去甲肾上腺素在聚L-丝氨酸修饰玻碳电极上的电化学行为，建立了测定去甲肾上腺素的新方法。实验结果表明：在pH6．0的磷酸盐缓冲溶液中，聚L-丝氨酸薄膜对去甲肾上腺素的电化学氧化具有明显的催化作用，利用循环伏安法测定其还原峰电流可排除抗坏血酸干扰。去甲肾上腺素检测线性范围为4．0×10^-7～1．5×10^-4mol／L；检出限为1．0×10^-8 mol／L。该修饰电极具有良好的灵敏度、选择性和稳定性，已用于针剂样品分析。

聚L-丝氨酸修饰电极的制备及测定针剂中的多巴胺

目的:建立用氨基酸修饰电极测定多巴胺的新方法.方法:用循环伏安法制备聚L-丝氨酸修饰玻碳电极,研究神经递质多巴胺在聚L-丝氨酸修饰玻碳电极上的电化学行为,建立循环伏安法测定痕量多巴胺的新方法.结果:在pH 7.0的磷酸盐缓冲溶液中,多巴胺在聚L-丝氨酸修饰玻碳电极上产生一对氧化还原峰,峰电位分别为Epa=0.278 V,Epc=0.066 V(相对Ag/AgCl电极).用循环伏安法测定多巴胺的线性范围:5.0×10-6～1.0×10-3mol/L,检测限:1.0×10-6mol/L.对1.0×10-4mol/L多巴胺溶液平行测定15次,其相对标准偏差为4.8%.结论:方法简单,电极稳定性好,用于针剂中多巴胺的测定,结果满意.

L-丝氨酸修饰掺硼金刚石薄膜电极检测去甲肾上腺素

采用直流等离子体喷射化学气相沉积（CVD）法制备了掺硼金刚石（BDD）薄膜电极。提出了应用L-丝氨酸修饰掺硼金刚石薄膜电极检测去甲肾上腺素,提高了去甲肾上腺素（NE）含量检测的精度。在浓度为2.0×10^-4mol/L的去甲肾上腺素溶液中,通过对比BDD裸电极与L-丝氨酸修饰BDD电极得出：经L-丝氨酸修饰的BDD电极的电催化氧化能力明显增强;在浓度为1.0×10^-4～1.0×10^-8mol/L的范围内,浓度的对数与氧化峰电流基本呈线性关系,且检测限为1.0×10^-9mol/L。

丝氨酸与肾上腺素相互作用的电化学研究

采用循环伏安法,研究了铂电极与玻碳电极上丝氨酸与肾上腺素在硫酸、盐酸、磷酸、B.R.缓冲溶液中相互作用的电化学行为.实验结果表明,不同电极和体系使丝氨酸与肾上腺素相互作用的循环伏安曲线的氧化还原峰,呈现出不同的变化规律.

乌司他丁对体外循环术后肺损伤的保护作用

体外循环所致的炎症反应与术后肺损伤密切相关。其中中性粒细胞在肺内蓦集,释放蛋白酶、氧自由基等毒性物质是一重要发病机制。乌司他丁为广谱丝氨酸蛋白酶抑制剂,可同时抑制胰蛋白酶、组织蛋白酶、弹性蛋白酶等多种水解酶的活性,以及体外循环所致的多种炎症介质的释放,可防治体外循环术后肺损伤。

乌司他丁对体外循环时心肌组织黏附分子及P选择素表达的影响

目的:观察乌司他丁对体外循环前后P-选择素及细胞间黏附分子-1mRNA的表达的影响。方法:40例行体外循环心内直视手术的先天性心脏病患儿,治疗组20例,预充液中加入乌司他丁1万IU/kg;对照组20例,应用常规预充液。于体外循环前后各取右心耳组织,采用RT-PCR方法检测心肌组织中P-选择素、ICAM-1 mRNA的表达水平。结果:两组P-选择素、ICAM-1mRNA表达量术后均较术前增高(P<0.01);术后对照组中其升高幅度明显高于治疗组(P<0.01)。结论:体外循环心肌组织黏附分子P-选择素及ICAM-1mRNA表达增加。乌司他丁可以通过抑制这些黏附分子的表达,从而减轻炎症反应。

体外循环中应用抑肽酶引起的过敏反应

抑肽酶是一种非特异性的丝氨酸蛋白酶抑制剂，具有抑制激肽释放酶，抑制血小板的激活、粘附和聚集功能，显着减少术中与术后出血，但有时可引起过敏反应。笔者在520例心内直视手术中应用抑肽酶，曾遇到7例过敏反应，现报告如下。

大鼠深低温停循环抑制Akt信号通路影响认知功能

目的:探究大鼠深低温停循环(DHCA)术后脑损伤情况及作用机制。方法:建立大鼠深低温停循环模型,16只SD大鼠随机分成假手术组和DHCA组。再灌注4 h后Western blot法检测海马组织丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(p-Akt)、B淋巴细胞瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和活化胱天蛋白酸-3(cleaved caspase-3)表达水平。HE染色及尼氏染色评估术后第7天海马CA1区神经元损伤情况。Morris水迷宫评价大鼠学习记忆、空间感知及运动能力。结果:与假手术组相比,DHCA组海马CA1区p-Akt、Bcl-2的蛋白表达水平降低,Bax、cleaved caspase-3的蛋白表达水平升高(P均<0.05),两组Akt的蛋白表达水平无统计学差异。DHCA组病理评分明显高于假手术组,正常神经细胞数量均明显低于假手术组,大鼠逃避潜伏期、跨越原平台次数及运动速度均明显弱于假手术组(P均<0.05)。结论:DHCA通过抑制Akt信号通路介导神经细胞凋亡,对大鼠认知等功能造成损伤。

甲烷氧化菌分类及代谢途径研究进展

甲烷作为仅次于二氧化碳的第2号温室气体,是全球温室效应的主要"贡献者"之一。甲烷氧化菌是一类可以直接以甲烷作为能源和碳源的微生物,不仅能减少土壤甲烷排放量,在含水量不饱和的土壤中还能利用空气中的甲烷,对于减缓全球温室效应具有显著效果。甲烷氧化菌可分为好氧甲烷氧化菌和厌氧甲烷氧化菌2大类,均在环境中分布广泛。本文总结了近年来有关甲烷氧化菌分类及其代谢途径2个方面的最新研究进展,以期为甲烷氧化菌在环境中的生态分布研究及甲烷氧化菌在工程中的应用提供参考。

缺血预处理对缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的 :观察缺血预处理 (ischemicpreconditioning ,IPC)对体外循环中缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响 ,评价其对心肌的保护作用。 方法 :在猫体外循环 (cardiopulmonarybypass,CPB)模型的基础上随机分成 3组 :组 1(单纯CPB组 ,n =18)和组 2 (主动脉阻断组 ,n =18)于CPB开始 4 5min后阻断主动脉 ,6 0min后开放主动脉使心脏恢复再灌注 90min ;组 3(IPC组 ,n =18)于主动脉阻断前进行IPC(阻断升主动脉 5min后开放 10min ,并重复 3次 ) ,余处理与组 2相同。应用Annexin Ⅴ /PI联合染色、流式细胞仪检测心肌细胞膜磷脂酰丝氨酸的外翻 ,比较IPC处理组及单纯缺血再灌注组体外循环过程中 4 5、10 5、195min时间点心肌细胞坏死和凋亡的数量。 结果 :组 2于主动脉阻断 6 0min及再灌注 90min时心肌细胞坏死率分别为(2 .6 75± 0 .4 2 4 ) %及 (5 .32 7± 0 .5 13) % ,而组 3则分别为 (1.317± 0 .2 92 ) %和 (3.112± 0 .32 8) % ,两组主动脉阻断 6 0min时 ,均未检出凋亡心肌细胞 ,但在再灌注 90min时 ,组 2和组 3的心肌细胞凋亡率分别达 (2 .32 7± 0 .6 73) %和 (0 .94 3± 0 .14 6 ) %(P <0 .0 1)。IPC处理组缺血再灌注期间坏死及凋亡的心肌细胞明显减少。 结论 :IPC不仅能减少体外循环缺血再灌注导致的心肌细胞坏?

超极化停搏对缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的观察超极化停搏对体外循环(extracorporeal circulation,ECC)中缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响,评价其对心肌的保护作用。方法将75只健康家猫随机均分为3组。应用猫ECC模型。并行循环组:ECC建立后不阻断上、下腔静脉和主动脉,仅并行循环150 min;去极化停搏组:主动脉阻断(ACC)60 min,再灌注60min,心脏停搏液使用去极化高钾St.Thomas液;超极化停搏组:心脏停搏液使用含吡那地尔的低钾St.Thomas液,余处理与去极化停搏组相同。应用Annexin-V/PI联合染色、流式细胞仪检测心肌细胞膜磷脂酰丝氨酸的外翻,比较超极化停搏处理组及去极化停搏组ECC过程中心肌细胞坏死和凋亡的数量。结果去极化停搏组于ACC 60min及再灌注60 min时坏死心肌细胞率分别为(2.727±0.436)%及(5.622±1.389)%;而超极化停搏组分别为(1.514±0.333)%和(3.052±0.403)%。两组ACC 60 min时,均未检出凋亡心肌细胞,但在再灌注60 min时,去极化停搏组和超极化停搏组凋亡细胞率分别达(2.253±0.581)%和(0.875±0.232)%。超极化停搏处理组缺血再灌注期间坏死及凋亡的心肌细胞明显减少。结论超极化停搏不仅能减少ECC缺血再灌注导致的细胞坏死,而且能够抑制再灌注期间发生的细胞凋亡。

出血倾向患者应用无肝素血液透析及护理

血液透析是一个体外循环的过程，患者血液与穿刺针、管道和透析膜等接触可激活机体的凝血系统，导致血栓形成，堵塞透析器和血液管路，致使体外循环难以进行。因此，透析时必须使用抗凝剂使患者全身肝素化，防止血栓形成，以免透析器和管道堵塞，保证体外循环的顺利进行。肝索抗凝鹤是血液透析的关键技术，是防止体外循环凝血的标准方法。肝素是一种分子质量不定的阴离子硫酸黏多糖，在血液中能与循环抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）形成复合物，此复合物再与凝血因子I、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ的丝氨酸蛋白酶结合，导致这些因子迅速失活。因此肝素在达到充分抗凝时也增加了出血的危险眭。

新型冠状病毒相关TMPRSS2蛋白结构特征和抗原表位分析

采用生物信息学方法分析预测新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)跨膜蛋白酶丝氨酸2(transmembrane protease serine 2,TMPRSS2)的理化特性、结构特征和抗原表位,为抗SARS-CoV-2药物研发提供参考。利用ProtParam、ProtScale分析预测TMPRSS2蛋白酶的理化特性;利用COILS Server、SignalP、TMPred、TargetP Server、NetPhos Server、NetNGlyc Server服务器对TMPRSS2蛋白酶结构进行功能结构的分析预测;利用SOPMA、Pfam、SWISS MODEL分析预测TMPRSS2蛋白酶高级结构;利用IEBD分析预测TMPRSS2蛋白酶B细胞、T细胞表位。TMPRSS2蛋白酶氨基酸组成数为492个,其中丝氨酸占比最高;亲水性较高,含10个跨膜螺旋区;具有4个磷酸化位点,3个糖基化修饰点;二级结构中无规则卷曲占据主导地位,三级结构能与已知的5ce.1.1.A(SMTL ID)模型同源建模;存在13个潜在的B细胞表位,12个得分较高的T细胞表位。

紫杉醇前药的开发与临床研究进展

紫杉醇(Paclitaxel,Taxol),紫杉-11-烯-9-酮,5β环氧化-1,2α,4,7β,10β,13α-六羟基-4,10-二乙酸酯-2-苯甲酸酯-β[(2′R,3′S)-N-苯甲酰-3′-苯基异丝氨酸酯],分子式C47H51NO14,相对分子质量为853.9,是从太平洋杉树Taxus brevifolia的树皮中分离得到的一种微管稳定剂[1],对多种癌症具有明显的治疗作用。1992年以来。

一碳单位代谢以及抗叶酸类抗肿瘤药物

一碳单位代谢能感知细胞的葡萄糖、氨基酸等营养状况,以满足细胞生长和增殖的需要。一碳单位代谢通路借助叶酸循环和甲硫氨酸循环来调控核酸、蛋白质和脂质的合成,并维持细胞的氧化还原内稳态以及表观遗传的稳定性。近年来的研究发现,代谢重编程是肿瘤细胞一个重要的表征,而靶向一碳单位代谢酶和下游核酸代谢酶的抗肿瘤药物越来越受到人们的关注。该文就一碳单位代谢与疾病的关系以及抗叶酸类抗肿瘤药物的研究现状进行综述,展望了这类化疗药物在临床应用的前景以及面临的挑战。

RhoA/Rho激酶在高肺血流肺血管结构重构中的表达及其活性研究

目的探讨 RhA/Rho 激酶在高肺血流所致肺血管结构重构过程中所起的作用。方法108只4周龄 Wistar 大鼠随机分到4个分流组、4个对照组,分流组大鼠接受左侧颈总动脉-颈外静脉分流术,对照组大鼠作假手术。在术后1、2、4、8周,分别测量右心室收缩压,作血气分析计算 Qp/Qs。肺组织切片 HE 染色光镜下观察肺血管形态学改变,测量并计算中等血管中膜厚度所占管径百分比(MT%)。免疫组化增殖细胞核抗原(PCNA)染色分析平滑肌细胞增生情况。用 TUNEL 细胞凋亡标记分析平滑肌细胞凋亡状况。pull down assay 分析 RhoA 活性,Western blot 检测 RhoA、Rho 激酶(ROCK2)的蛋白表达以及 MYPT1磷酸化程度量化分析 Rho 激酶活性。结果颈总动脉-颈外静脉分流导致肺循环血流量增加,Qp/Qs 平均值为2.26±0.35。分流组 RVSP 在术后1周和8周较对照组高(t=8.799,t=5.332,P<0.01)。与对照组相比,分流组以平滑肌细胞过度增生和肥大为特征的中等肺动脉中膜增厚,MT%升高在第4周开始出现,到第8周更为明显(t=9.192,t=11.185,P<0.01)。分流组 PCNA 阳性平滑肌细胞在第1周显著升高,第2周达最高值,与对照组相比,差异有统计学意义(t=7.213,P<0.01),到第4周下降到显著低于对照组(t=4.183,P<0.01),并持续降低,到第8周几乎观察不到增生的平滑肌细胞(t=6.152,P<0.01)。TUNEL 阳性平滑肌细胞在第2周较对照组低(t=2.418,P<0.05),并持续降低,到第8周几乎观察不到凋亡的平滑肌细胞(t=4.582,P<0.01)。RhoA 和 ROCK2 表达在第1周即高于对照组(t=6.056,t=8.411,P<0.01),第2周达高峰(t=9.342,t=10.437,P<0.01)。到第4开始下降,但是到第8周仍然显著高于对照组(t=4.743,t=4.455,P<0.01)。RhoA 和 Rho 激酶活性在第1周也显著高于对照组(t=10.246,t=19.110,P<0.01),到第4周达高峰(t=24.984,t=16.124,P<0.01),然后开始降低,但是二者到第8周仍然显著高于对照组水平(t=4.934,t=10.426,P<0.01)。结论在高肺血流所致的大鼠肺血管收缩和结构重构与 RhoA/Rho 激酶的表达和活性增强有关。

抑肽酶——捡了芝麻丢了西瓜？

抑肽酶（aprotinin）是数十年前就用于治疗胰腺炎的老药，1986年经英国国家心肺研究所（National Heart and Lung Institute）的心外科医师研究证实，抑肽酶为非特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂，可抑制Ⅻ因子的激活，抑制纤溶，保护血小板Ⅱa／mb蛋白，手术开始缓慢给予200万KIU抑肽酶后，每小时给予50万KIU，体外循环预充液中加入200万KIU，可使体外循环下心脏直视手术的失血量减少46％左右。1993年抑肽酶经拜尔医药保健有限公司引进我国，随后，国产抑肽酶问世。自20世纪90年代，国内外越来越多地将大剂量抑肽酶应用于体外循环下心脏手术和大出血的手术，主要目的是减少术中出血量，其应用已经被列入许多国家的临床规范，也不乏严谨研究支持其安全性。不仅如此，还有许多实验和试验表明，给予上述大剂量抑肽酶还可以有效地抑制炎性反应，保护缺血器官，本期发表的抑肽酶器官保护效应的文章，亦属此类。