精-甘-天冬-丝氨酸四肽对二磷酸腺苷诱导大鼠血小板活化的信号转导的影响

本工作在二磷酸腺苷（ADP）活化的大鼠血小板上，观察精-甘-天冬-丝氨酸四肽（RGDS肽）对血小板聚集、蛋白磷酸化、蛋白激酶C和丝裂素活化蛋白激酶活性的影响。结果发现，50μmol／LADP引起血小板聚集时，蛋白激酶C（PKC）及丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）活性增加，并引起95和66kD蛋白磷酸化。应用50，100和200μmol／LRGDS肽与其共同孵育，呈浓度依赖地抑制ADP引起的血小板聚集和对PKC及MAP的激活作用，两个作用均呈正相关（r=0.9397和r=0.9368，P＜0．01）。RGDS肽亦呈浓度依赖地抑制ADP诱导的95和66kD蛋白磷酸化，与其抑制PKC及MAPK的激活也明显正相关。上述结果提示，RGDS肽干扰ADP激活血小板的细胞内信号转导可能是其抗栓作用机理之一。

细胞外信号调节激酶在精-甘-天冬-丝氨酸四肽诱导肝星状细胞凋亡中的作用

目的 探讨细胞外信号调节激酶 (ERK)在精 甘 天冬 丝氨酸 (RGDS)四肽诱导肝星状细胞 (HSC)凋亡中的作用。方法 将培养的HSC细胞分为 6组 :①空白对照组 ,②纤维连接蛋白 (FN)组 ,③FN +RGDS(2 5mg/L)组 ,④FN +RGDs(5 0mg/L)组 ,⑤FN +RGDS(10 0mg/L)组 ,⑥FN +精 甘 谷 丝氨酸 (RGES ,10 0mgL)组。采用3 H 胸腺嘧啶核苷 (3 H TdR)掺入法测定HSC增生 ;透射电镜和末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记 (TUNEL)方法测定HSC凋亡 ;甲苯胺兰染色法测定细胞粘附率 ;分别应用Western印迹和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术测定ERK蛋白及其mRNA表达。结果 ① 2 5、5 0、10 0mg/L浓度的RGDS四肽呈剂量依赖性抑制HSC增生并诱导HSC凋亡 (P <0 .0 5 )。②RGDS四肽作用于HSC 2h ,HSC粘附率下降 (P <0 .0 1)。③在RGDS四肽干预组 ,HSC的ERK及其mRNA表达下调。结论 RGDS四肽可抑制HSCs增生并诱导其凋亡 ;RGDS四肽诱导HSCs凋亡的效应与其抗粘附作用、抑制ERK蛋白和ERK1mRNA表达有关。