尿胰蛋白酶抑制剂分离纯化研究进展

尿胰蛋白酶抑制剂(Urinary Trypsin Inhibitor,UTI)是从人类尿液中分离纯化得到的一种具有丝氨酸蛋白酶抑制活性的硫酸软骨素蛋白聚糖,其对胰蛋白酶、透明质酸酶、粒细胞弹性蛋白酶、纤溶酶等蛋白酶均具有良好抑制作用,被广泛用于临床治疗急性胰腺炎和作为急性循环衰竭的抢救辅助用药。本文主要综述了尿胰蛋白酶抑制剂的来源、结构、生理功能、传统分离纯化工艺以及基因工程技术生产新方法等,旨在为尿胰蛋白酶抑制剂的高质量生产以及应用提供参考。

乌鳢鱼卵中胰蛋白酶抑制剂的分离纯化及性质研究

以乌鳢鱼卵为材料，通过生物化学手段和研究方法，从乌鳢鱼卵匀浆液中分离得到了一种相对分子质量大约为42kDa的蛋白酶抑制剂．该蛋白对胰蛋白酶具有专一性的抑制活性，最低抑制浓度为130μg／mL，对胰蛋白酶的抑制常数为30．3nM．SDS—PAGE电泳检测表明，该抑制剂为不合二硫键的单链蛋白．热稳定性和酸碱稳定性研究表明，该蛋白酶抑制剂在30℃～100℃温度下能保持76％以上的活性，在pH值2～11的酸碱条件下，能保持90％以上的活性。

PSA与前列腺癌发展和转移相关性的研究进展

前列腺特异性抗原(PSA)是1个前列腺癌诊断和管理生物标志物,并对前列腺癌的发展和/或前列腺原位癌向转移癌的进展有一定作用。本文综述了PSA在人前列腺癌发展中促进前列腺癌发展和转移等的作用,阐述了PSA对前列腺癌发展和转移影响的可能机制,包括丝氨酸蛋白酶活性、以无酶活性形式与细胞膜受体结合发挥作用和抑制免疫功能等,并指出亟待解决的关键问题。

圣路易斯脑炎病毒NS2B-NS3蛋白酶的原核表达及其抑制剂的筛选

【目的】圣路易斯脑炎病毒(St. Louis encephalitis virus,SLEV)属于黄病毒科,是一种单股正链RNA病毒。黄病毒编码的非结构蛋白NS3在病毒复制以及多聚蛋白加工过程中起着重要作用,NS2B是其发挥作用的重要辅助因子。因此,NS2B-NS3蛋白酶复合物是抗病毒药物的重要靶标。本研究旨在构建SLEV NS2B-NS3蛋白酶的原核表达系统并建立其抑制剂的高通量筛选方法,从而发现其小分子抑制剂。【方法】通过PCR扩增SLEVNS2B-NS3蛋白的编码区,构建原核表达质粒;在大肠杆菌BL21(DE3)中,经异丙基硫代半乳糖苷(Isopropyl β-D-thiogalactoside)诱导得到可溶性的NS2B-NS3蛋白,并用镍亲和层析方法进行纯化;基于荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer)技术检测NS2B-NS3蛋白酶活性,建立其抑制剂的高通量筛选平台。【结果】SLEV NS2B-NS3蛋白酶纯化程度高达95%以上,基于酶活测定的抑制剂筛选平台准确可行。对700多个上市药物进行筛选后,发现原花青素对SLEVNS2B-NS3蛋白酶具有明显的抑制活性。【结论】本研究为SLEVNS2B-NS3蛋白酶抑制剂提供了一种操作方便、高通量的筛选方法,并首次发现了原花青素具有抑制SLEV NS2B-NS3蛋白酶活性的功能,可以作为治疗SLEV感染的潜在靶向药物。

Cantharidin and Its Analogues:Anticancer and Ser/Thr Protein Phosphatase Inhibitory Activities

This paper mainly describes the anticancer activities and Ser/Thr protein phosphatase inhibitory activities of cantharidin and its analogues.