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瘤胃中产琥珀酸丝状杆菌的纤维素降解机制及其在秸秆饲料化中的应用 被引量:5
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作者 王喜凤 李海峰 屈建航 《饲料研究》 CAS 北大核心 2023年第5期126-130,共5页
我国是农作物秸秆生产大国,农作物秸秆资源饲料化有助于缓解我国畜牧业饲料原料不足和秸秆类废弃物污染问题。秸秆中纤维素含量约为30%~40%,致使动物对秸秆消化速率减慢,成为秸秆饲料化的难点。动物瘤胃中分离的产琥珀酸丝状杆菌(Fibrob... 我国是农作物秸秆生产大国,农作物秸秆资源饲料化有助于缓解我国畜牧业饲料原料不足和秸秆类废弃物污染问题。秸秆中纤维素含量约为30%~40%,致使动物对秸秆消化速率减慢,成为秸秆饲料化的难点。动物瘤胃中分离的产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)能够高效降解纤维素,其采用不同于游离纤维素酶降解机制和纤维小体降解机制的第三种纤维素降解机制。文章综述了产琥珀酸丝状杆菌纤维素降解机制的研究进展,为产琥珀酸丝状杆菌在秸秆饲料化中的应用提供参考。 展开更多
关键词 纤维素 秸秆饲料化 产琥珀酸丝状杆菌
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产琥珀酸丝状杆菌1,3-1,4-β-葡聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达 被引量:6
2
作者 杨玉霞 张慧玲 +1 位作者 汪艳 陈勇 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期123-130,共8页
为实现瘤胃细菌产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)1,3-1,4-β-葡聚糖酶基因(FsGLU)的高效表达,开发新的饲用β-葡聚糖酶资源,根据毕赤酵母对密码子的偏爱性、G+C含量等特点,对FsGLU基因进行密码子优化,然后合成优化后的1... 为实现瘤胃细菌产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)1,3-1,4-β-葡聚糖酶基因(FsGLU)的高效表达,开发新的饲用β-葡聚糖酶资源,根据毕赤酵母对密码子的偏爱性、G+C含量等特点,对FsGLU基因进行密码子优化,然后合成优化后的1,3-1,4-β-葡聚糖酶基因(FsGLUm),转化毕赤酵母GS115,以甲醇诱导表达并对重组FsGLUm的酶学特性、底物特异性和对消化酶的耐受性进行了研究。结果表明:摇瓶水平条件下,以甲醇诱导表达48 h时,重组FsGLUm酶活性提高25.1%(P〈0.05)。在10 L发酵罐中诱导96 h后,重组FsGLUm的活性为6 424 U·mL-1,菌体湿质量和干质量达到274.6和123.6 g·L-1。酶学特性分析表明:纯化后的重组FsGLUm最适反应温度为37℃,最适反应pH值为5.0,比活性为10 397 U·mg-1。在温度低于37℃、pH 5.0~6.5时该酶具有较好的稳定性。底物特异性分析表明:重组FsGLUm可水解大麦β-葡聚糖和地衣多糖,不降解燕麦木聚糖、桦木木聚糖和羧甲基纤维素钠。在胃蛋白酶和胰蛋白酶共同作用60 min后,仍保留了50.5%的酶活性。结论:FsGLU基因在毕赤酵母GS115中实现了高效表达,重组FsGLUm作为饲用酶制剂具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 产琥珀酸丝状杆菌 1 3-1 4-β-葡聚糖酶基因 毕赤酵母 基因表达 酶学性质
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实时荧光定量PCR检测产琥珀酸丝状杆菌数量方法的研究 被引量:1
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作者 王国泽 刘达玉 +3 位作者 余华 郭秀兰 左福元 朱智 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2018年第2期159-163,共5页
为建立产琥珀酸丝状杆菌定性定量研究方法,实现后期该菌种用于纤维素生物可再生能源等方面应用研究。本试验提取15份瘤胃细菌脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,DNA),利用SYBR Premix Ex Taq荧光染料嵌合法和人工合成基因技术,采用实... 为建立产琥珀酸丝状杆菌定性定量研究方法,实现后期该菌种用于纤维素生物可再生能源等方面应用研究。本试验提取15份瘤胃细菌脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,DNA),利用SYBR Premix Ex Taq荧光染料嵌合法和人工合成基因技术,采用实时荧光定量PCR方法检测样品中产琥珀酸丝状杆菌数量;结果:所构建的质粒DNA标准曲线线性关系良好,R2=1,所有样品溶解曲线均为单峰,扩增曲线呈S型,扩增效率为93.9%。表明应用构建实时荧光定量PCR法可对实际样品中产琥珀酸丝状杆菌进行定性定量研究。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR 纤维素降解菌 产琥珀酸丝状杆菌 质粒标准品
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产琥珀酸丝状杆菌内切葡聚糖酶end-1基因密码子偏好性分析 被引量:2
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作者 苏少锋 萨初拉 +5 位作者 刘红葵 赵小庆 吴青海 其布日 王蕴华 呼和 《畜牧与饲料科学》 2017年第2期1-9,共9页
产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)end-1基因表达的内切葡聚糖酶是能够降解纤维素的纤维素复合酶中的一种。利用Codon W、CUSP和CHIPS等相关软件分析产琥珀酸丝状杆菌内切葡聚糖酶end-1基因的密码子使用情况,比较end-1基因与... 产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)end-1基因表达的内切葡聚糖酶是能够降解纤维素的纤维素复合酶中的一种。利用Codon W、CUSP和CHIPS等相关软件分析产琥珀酸丝状杆菌内切葡聚糖酶end-1基因的密码子使用情况,比较end-1基因与大肠杆菌、酿酒酵母菌、枯草芽胞杆菌以及乳酸乳球菌的密码子偏好性。结果表明,内切葡聚糖酶end-1基因偏好使用G/C结尾的密码子,其中有25种偏好密码子(RSCU值大于1),偏好性较强的有GCT、TGC、GAA、GGT、CAC、ATC、CTC、CCG、CGT、TCC和TAC(RSCU值均大于或等于2);end-1基因的密码子偏好性与4个宿主的基因组密码子偏好性差异较大,其中与乳酸乳球菌的密码子偏好性差异最大。若使该基因在上述几种表达系统中得到较高水平的表达,则需要对其密码子进行优化。 展开更多
关键词 产琥珀酸丝状杆菌 内切葡聚糖酶 密码子偏好性 密码子优化 异源表达
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琥珀酸丝状杆菌RT-PCR方法的建立
5
作者 周焱伟 贺丛 +4 位作者 许利凡 王绿林 吴胜强 邓立新 王世根 《安徽农业科学》 CAS 2013年第6期2471-2473,共3页
[目的]了解牛瘤胃内微生物的变化。[方法]以琥珀酸丝状杆菌为对象,根据16S rRNA序列分别设计引物。从牛瘤胃液提取总DNA,扩增琥珀酸丝状杆菌的DNA片段,并连接在pDM-18T载体上,经PCR和测序鉴定后,以不同稀释度的重组质粒为模版进行RT-PCR... [目的]了解牛瘤胃内微生物的变化。[方法]以琥珀酸丝状杆菌为对象,根据16S rRNA序列分别设计引物。从牛瘤胃液提取总DNA,扩增琥珀酸丝状杆菌的DNA片段,并连接在pDM-18T载体上,经PCR和测序鉴定后,以不同稀释度的重组质粒为模版进行RT-PCR。[结果]扩增的目的片段与已知的菌种相应片段的同源性为100%。以不同稀释度的重组pMD-18T为模板建立的RT-PCR扩增曲线有明显差异,绘制标准曲线的相关系数接近1,熔解曲线呈单一峰值。[结论]成功建立了琥珀酸丝状杆菌的实时荧光定量PCR方法,为进一步研究瘤胃内微生物变化奠定基础。 展开更多
关键词 琥珀酸丝状杆菌 RT-PCR 标准曲线
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大肠杆菌丝状热敏蛋白Z相互作用蛋白A(Ec-ZipA)原核表达、纯化与大鼠多克隆抗体的制备 被引量:7
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作者 陈云雨 牛夏忆 +1 位作者 林媛 刘晓平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期942-948,共7页
目的制备大肠杆菌丝状热敏蛋白Z相互作用蛋白A(Ec-ZipA)第185至328位氨基酸功能蛋白及其特异性大鼠多克隆抗体。方法以基因合成法合成Ec-ZipA第185至328位氨基酸功能蛋白的基因序列,利用DNA重组技术与p ET-30a(+)载体连接构建重组质粒... 目的制备大肠杆菌丝状热敏蛋白Z相互作用蛋白A(Ec-ZipA)第185至328位氨基酸功能蛋白及其特异性大鼠多克隆抗体。方法以基因合成法合成Ec-ZipA第185至328位氨基酸功能蛋白的基因序列,利用DNA重组技术与p ET-30a(+)载体连接构建重组质粒。将重组质粒转化到E. coli BL21(DE3)中进行Ec-Zip A原核表达与表达优化。采用亲和层析方法分离纯化Ec-Zip A后,以荧光偏振(FP)实验进行生物学活性鉴定。以重组Ec-Zip A为抗原免疫大鼠制备多克隆抗体,采用ELISA和Western blot法检测抗体滴度和抗原特异性。结果 SDS-PAGE分析和Western blot实验证实大肠杆菌成功表达Ec-Zip A蛋白。FP实验表明纯化的Ec-Zip A具有良好的生物学活性。ELISA结果表明多克隆抗体具有较高的抗体滴度,效价可达1∶512 000。Western blot实验证实多克隆抗体具有良好的抗原特异性。结论成功进行了Ec-Zip A原核表达、分离纯化并制备了大鼠抗Ec-Zip A多克隆抗体。 展开更多
关键词 大肠杆菌热敏蛋白Z相互作用蛋白A(Ec-ZipA) 原核表达 亲和层析 荧光偏振 多克隆抗体
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肾移植术后并发分支杆菌感染的探讨
7
作者 常东 蒋伟 +1 位作者 刘伟 宋秀伟 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第S1期149-150,共2页
肾移植术后并发分支杆菌感染的探讨常东,蒋伟,刘伟,宋秀伟(解放军304医院检验科,北京100037)随着科学技术的发展,器官移植手术开展的越来越广泛,为减少排斥反应,而应用大量的免疫抑制剂,为防止感染,运用抗生素,也... 肾移植术后并发分支杆菌感染的探讨常东,蒋伟,刘伟,宋秀伟(解放军304医院检验科,北京100037)随着科学技术的发展,器官移植手术开展的越来越广泛,为减少排斥反应,而应用大量的免疫抑制剂,为防止感染,运用抗生素,也引起许多不良反应。我院两例肾移植术... 展开更多
关键词 分支杆菌 器官移植手术 医院检验科 巴西奴卡氏菌 排斥反应 免疫抑制剂 氧哌嗪青霉素 抗酸杆菌 环丙氟哌酸 丝状杆菌
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播散性放线菌病1例报道及文献复习 被引量:8
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作者 刘丽燕 楼俪泓 +1 位作者 姜海琼 周新 《中国感染与化疗杂志》 CAS 北大核心 2012年第6期419-423,共5页
目的通过病例报道及文献复习探讨放线菌病的临床特点,提高临床医师对该病的认识。方法报告上海交通大学附属第一人民医院收治的播散性放线菌病1例并复习相关文献。结果患者临床表现为发热、头痛、恶心、呕吐伴行走不稳,影像学检查示脑... 目的通过病例报道及文献复习探讨放线菌病的临床特点,提高临床医师对该病的认识。方法报告上海交通大学附属第一人民医院收治的播散性放线菌病1例并复习相关文献。结果患者临床表现为发热、头痛、恶心、呕吐伴行走不稳,影像学检查示脑、肺、前列腺多发病灶,多种多次病原学检查阴性。抗感染治疗效果不佳,开颅活检病理示肉芽组织形成伴革兰阳性放射状丝状杆菌,遂诊断为放线菌病。结论放线菌感染罹患率低,而播散性放线菌病临床上更为少见,易误诊为肿瘤或结核,需引起临床医师的重视,以早期诊断、及时治疗,改善预后。 展开更多
关键词 放线菌病 播散性放线菌病 革兰阳性放射丝状杆菌
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纤维素结合域的酿酒酵母表面展示及其黏附位点初探 被引量:1
9
作者 张玉杰 王佳堃 +1 位作者 叶均安 刘建新 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期976-982,共7页
利用酿酒酵母表面展示系统表达产琥珀酸丝状杆菌S85纤维素结合域家族2(CBD2),分析其纤维黏附位点。将CBD2基因插入质粒pYD1的AGA2 3′端,构建pMCBD2重组质粒,化学转化pMCBD2至酿酒酵母EBY100中,2%半乳糖诱导CBD2表达于酿酒酵母表面。利... 利用酿酒酵母表面展示系统表达产琥珀酸丝状杆菌S85纤维素结合域家族2(CBD2),分析其纤维黏附位点。将CBD2基因插入质粒pYD1的AGA2 3′端,构建pMCBD2重组质粒,化学转化pMCBD2至酿酒酵母EBY100中,2%半乳糖诱导CBD2表达于酿酒酵母表面。利用免疫组化技术检测重组酵母细胞在稻草茎细胞壁上的黏附位点。结果表明:利用酿酒酵母表面展示系统可成功表达产琥珀酸丝状杆菌S85的CBD2基因;重组CBD2的pMCBD2-EBY100与稻草茎孵育后,经抗V5异硫氰酸荧光素标记抗体处理可在稻草茎的薄壁、厚壁和维管组织均检测到荧光。产琥珀酸丝状杆菌S85的CBD2黏附稻草多个组织。结果提示:酿酒酵母表面展示技术与免疫组化技术联用研究瘤胃细菌CBD的黏附位点是可行的。 展开更多
关键词 纤维素结合域 酵母表面展示系统 黏附位点 产琥珀酸丝状杆菌
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毕赤酵母不同甲醇利用表型Mut^+和Mut^s表达FsGLUm基因的比较
10
作者 杨玉霞 罗艳丽 +3 位作者 张慧玲 汪艳 陈勇 裴建华 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期220-224,239,共6页
将来源于产琥珀酸丝状杆菌的β-葡聚糖酶基因根据毕赤酵母的偏好性进行密码子优化,通过全基因合成该优化基因(Fs GLUm)并构建重组表达载体p PIC9K-Fs GLUm。将p PIC9K-Fs GLUm分别用SalⅠ和BglⅡ酶切线性化后电击转化入毕赤酵母GS115染... 将来源于产琥珀酸丝状杆菌的β-葡聚糖酶基因根据毕赤酵母的偏好性进行密码子优化,通过全基因合成该优化基因(Fs GLUm)并构建重组表达载体p PIC9K-Fs GLUm。将p PIC9K-Fs GLUm分别用SalⅠ和BglⅡ酶切线性化后电击转化入毕赤酵母GS115染色体DNA中,经过表型筛选和抗性筛选获得不同甲醇利用表型Mut+和Muts阳性菌株。经刚果红平板检测,在摇瓶水平下,Mut+型菌株表达产物产生的水解透明圈明显大于Muts型菌株表达产物。在发酵罐水平下,Mut+型菌株各时间段表达产物酶活性明显高于Muts型菌株。Mut+型菌株表达的酶活性在甲醇诱导96h达到最大值,为6424U/m L,比活性为2607U/mg,菌体干重为123.6g/L。Muts型菌株表达的酶活性在诱导后108h达到最大值,为119U/m L,比活性为1867U/mg,菌体干重为113.5g/L。以上结果表明,Mut+型毕赤酵母更有利于产琥珀酸丝状杆菌β-葡聚糖酶基因的表达。 展开更多
关键词 产琥珀酸丝状杆菌 Β-葡聚糖酶 毕赤酵母 甲醇利用表型
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CAR-bacillus研究概况
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作者 刘英霞 刘兆铭 +1 位作者 宋维汉 王彦平 《中国实验动物学杂志》 CAS 2002年第5期U001-U002,共2页
关键词 丝状杆菌 CAR菌 大鼠 慢性呼吸系统疾病 肺炎 实验动物
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Antibacterial Activity of Lyngbya and Chroococcus Species Isolated from Koya (Hizoop River)
12
作者 Sewgil Saaduldeen Anwer Parween Mohsin Abdulkareem 《Journal of Life Sciences》 2014年第12期925-930,共6页
In the study cyanobacterial strains were isolated from different sites of Hizoop rivers, Koya-Iraq and identified according to their morphological characters by using microscope, two genera which were in filamentous f... In the study cyanobacterial strains were isolated from different sites of Hizoop rivers, Koya-Iraq and identified according to their morphological characters by using microscope, two genera which were in filamentous form identified as Chroococcus sp. and Lyngbya sp.. After identification of genera their optimum growth condition studied by using the effect of temperature and pH to their dry weight. In the result, the optimum temperature and pH for both filamentous cyanobacteria were 25 ℃ and pH 7.5. Both cyanobacterial strains were extracted with ethanol, methanol and diethyl ether at various concentrations (0.2 g/mL, 0.1 g/mL, 0.005 g/mL) which exhibited the antibacterial activities against Staphylococcus aureus, E. coli and B. subtilus. Inhibition activities of the two cyanobacterial extracts were more effective at high concentration against the tested pathogens at the low concentration, especially those ofLyngbya sp. The higher inhibition zone showed with extract by ethanol. 展开更多
关键词 CYANOBACTERIA PH temperature antibacterial activity
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水貂腐败梭菌感染的诊疗试验 被引量:1
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作者 刘旭平 范永鑫 +4 位作者 母连志 赵静 刘晓飞 韩明明 刘慧 《黑龙江畜牧兽医(下半月)》 CAS 2014年第9期122-123,146,共3页
腐败梭菌主要经消化道感染水貂,引起水貂急性致死性传染性疾病,主要症状为胃肠道出血、水肿以及败血症[1]。腐败梭菌病的发生无明显季节性,春、秋季多发,常呈散发或地方性流行。我国腐败梭菌病的发病率较低,但一经暴发会给水貂养殖业带... 腐败梭菌主要经消化道感染水貂,引起水貂急性致死性传染性疾病,主要症状为胃肠道出血、水肿以及败血症[1]。腐败梭菌病的发生无明显季节性,春、秋季多发,常呈散发或地方性流行。我国腐败梭菌病的发病率较低,但一经暴发会给水貂养殖业带来巨大的经济损失。腐败梭菌广泛存在于自然界中,各种动物的肠道及土壤中均有分布并可随灰尘飞扬, 展开更多
关键词 腐败梭菌 消化道感染 性传染性疾病 实验室诊断 临床症 丝状杆菌 杆菌 肺脏充血 气候骤变 临床诊断
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