8个省14个产地的木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量比较与相关性分析

目的:为木鳖子良种选育与高产优质栽培提供参考。方法:在2015年版《中国药典》(一部)等文献基础上,优化测定木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量的高效液相色谱(HPLC)法;比较8个省14个产地的木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量并进行聚类分析;采用SPSS 17.0软件分析海拔、经纬度与木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量间的相关性。结果:木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯质量浓度在0.05~0.5 mg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系,回归方程为Y=4 361.95X+67.380 8(R^2=0.999 7);定量限为15.62 ng,检测限为4.67 ng;平均回收率为99.76%(RSD=1.36%,n=9)。8个省14个产地的木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量存在极显著差异(P<0.01)。根据聚类分析结果,将8个省14个产地的木鳖子划分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4个类群,Ⅲ与Ⅳ类群木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量较高,包括广西壮族自治区平南县、贵州省江口县、贵州省德江县、福建省建阳区与湖南省会同县5个产地,其中广西壮族自治区平南县、贵州省江口县、贵州省德江县、湖南省会同县属于高海拔、低经纬度地区,福建省建阳区属于高海拔地区。木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量与海拔呈正相关,与经度、纬度呈负相关。结论:测定木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量的HPLC法简便、准确、重复性好,所测8个省14个产地的木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量均达到2015年版《中国药典》(一部)标准,广西壮族自治区平南县、贵州省江口县、贵州省德江县、湖南省会同县等低经纬度、高海拔地区栽培有利于积累木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯成分。

HPLC同时测定丝石竹药材中丝石竹皂苷元和皂皮酸的含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定丝石竹药材中丝石竹皂苷元和皂皮酸两个齐墩果烷型苷元含量的方法。方法丝石竹药材经酸水解后,采用HPLC测定丝石竹皂苷元和皂皮酸含量。采用Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-0.1%磷酸水溶液(51:9:40)为流动相,流速1.2 m L/min,检测波长210 nm,柱温25℃,进样量10μL。结果丝石竹皂苷元和皂皮酸进样量分别在2.920~17.52μg(r=0.9997)和8.040~48.24μg(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好的线性关系。两者平均回收率分别为99.3%(RSD=0.82%)和98.5%(RSD=1.2%)。结论该方法简便、准确、重复性强,可作为同时测定丝石竹药材中丝石竹皂苷元和皂皮酸含量的方法。

UPLC法测定木鳖子药材中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的含量

目的:建立UPLC法测定木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯含量的方法,并对不同产地样品进行测定。方法:Waters BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,线性梯度洗脱;流速0.25 m L/min,柱温30℃,检测波长203 nm。结果:丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯浓度与峰面积在0.35~5.60μg之间线性关系良好(r=0.999 6),加样回收率为97.98%,RSD为1.60%。结论:该方法简便、快捷、重复性好,可用于木鳖子药材的质量控制。

微波法提取木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的工艺研究

目的:建立木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的微波提取方法,为木鳖子药材的进一步开发利用提供实验依据。方法:实验采用微波提取技术,以丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯含量为指标,考察乙醇浓度、微波功率、提取时间及提取温度对提取工艺的影响。结果:丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的线性范围为0.024~0.120 mg,平均加样回收率为100.2%。微波提取的最佳提取工艺为35%乙醇65℃,400 w提取12 min,平均提取率为0.267%。结论:微波法提取木鳖子中丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯的方法可靠稳定,优选出的提取工艺简单、节能、省时可行。

木鳖子中丝石竹皂苷元-3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯测定

建立测定木鳖子中丝石竹皂苷元-3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯高效液相色谱法,并对木鳖子不同部位进行测定。色谱条件为Agilent HC-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,甲醇-φ(甲酸)=0.2%水溶液(体积比为78∶22)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长210nm,室温测定。结果显示丝石竹皂苷元-3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯质量浓度在6.44×10-2~1.03mg/mL呈良好线性关系(r=0.999 7)。该方法操作简便、重复性好、准确性好,可用于木鳖子药材炮制方法研究过程中的质量控制。

红毛七的皂苷成分研究

目的对红毛七的皂苷成分进行研究。方法将样品采用硅胶柱层析、凝胶柱层析、反相柱层析及高效液相色谱法等分离技术进行纯化得到单体化合物,根据理化性质和波谱数据鉴定其化学结构。结果本文报道5个单体化合物,分别鉴定为葳严仙皂苷C(1)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷-28-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖-常春藤皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)[β-D-吡喃木糖(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-丝石竹皂苷元-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)。结论化合物2、4、5为首次从该属植物中分离得到。

金铁锁三萜类成分对衣霉素诱导RA-FLS细胞内质网应激的影响

目的基于内质网通路探索金铁锁三萜类成分皂皮酸、丝石竹皂苷元对衣霉素诱导类风湿性关节炎成纤维细胞(RA-FLS)的作用机制。方法以衣霉素诱导RA-FLS细胞为研究对象,给予皂皮酸、丝石竹皂苷元进行干预,检测细胞增殖活性,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移能力,Western blot法检测细胞中转录激活因子6(ATF-6)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、半胱氨酸蛋白酶蛋白-12(caspase-12)、抗凋亡Bcl-2蛋白表达,RT-qPCR法检测细胞中ATF-6、GRP78、CHOP mRNA表达。结果与模型组比较,皂皮酸、丝石竹皂苷元各剂量组RA-FLS细胞TNF-α水平均降低(P<0.01),细胞增殖、迁移能力均减弱(P<0.01),凋亡率均升高(P<0.01),细胞ATF-6、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),CHOP、caspase-12蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);皂皮酸、丝石竹皂苷元低、中剂量组GRP78蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);皂皮酸、丝石竹皂苷元中剂量组ATF-6、GRP 78 mRNA表达降低(P<0.01),CHOP mRNA表达升高(P<0.01)。结论皂皮酸、丝石竹皂苷元可能通过调节内质网信号通路,降低相关炎症因子分泌,抑制RA-FLS细胞增殖及迁移,诱导细胞凋亡,起到对类风湿性关节炎的保护作用。

壮药九层风化学成分研究

目的研究壮药九层风化学成分。方法采用硅胶吸附色谱法、重结晶等现代分离方法和技术对其石油醚、乙酸乙酯和正丁醇部位化学成分进行分离和纯化,所得单体化合物利用其理化性质及MS、1H-NMR、13C-NMR等波谱方法进行结构鉴定。结果从九层风石油醚,乙酸乙酯和正丁醇部位共分离得到9个化合物,分别鉴定为:正三十一烷烃(I),α-波甾醇(II),豆甾醇(III),β-谷甾醇(IV),油酸(V),正二十四烷酸(Ⅵ),α-波甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷-6/-十七酸酯(Ⅶ),正十六烷酸(Ⅷ),丝石竹皂苷元(Ⅸ)。结论上述化合物均为首次从该植物中分离得到。

Box-Behnken设计-响应面法优化木鳖子霜炮制工艺

目的采用Box-Behnken设计-响应面法(BBD-RSM)优选木鳖子霜的最佳炮制工艺。方法以丝石竹皂苷元3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯、β-谷甾醇、齐墩果酸含量及脂肪油含量的指标归一值(OD)为综合评价指标,采用3因素3水平的BBD-RSM设计试验,考察烘制时间、烘制温度、压制时间对木鳖子霜炮制工艺的影响。结果优化得最佳工艺条件:烘制时间1.68 h、烘制温度80℃、压制时间30 min,OD值为0.777。考虑实际情况,对烘制时间进行微调得出木鳖子最佳炮制工艺,即烘制时间为1.7 h、烘制温度为80℃、压制时间为30 min。并通过所得条件平行制备3批样品,计算得OD值分别为0.779、0.783、0.766,其RSD为1.15%。结论采用BBD-RSM优选的炮制工艺稳定,模型预测效果良好,建立了木鳖子霜炮制新工艺。