再生丝素蛋白肽/聚乙烯醇膜材料性能的实验研究

采用不同配比的再生丝素蛋白肽(SFP)与聚乙烯醇(PVA)水溶液共混的方法制备了再生丝素蛋白肽/聚乙烯醇(SFP/PVA)膜材料,对SFP/PVA膜材料进行了红外表征。通过电子拉力试验机进行了不同配比SFP/PVA膜材料的力学性能试验,结果显示配比为30/70的膜最大承受力为10.57N,拉伸强度为35.2MPa,力学性能最佳。膜材料降解性实验在人工体液中进行,结果显示其降解从SFP开始,随后与SFP结合部分的PVA在接触到水介质后逐步溶失。MTT法对HepG2细胞的促生长试验结果表明,各配比SFP/PVA膜材料均具有良好的促HepG2细胞快速黏附和生长性。综合各性能指标,配比为30/70的SFP/PVA膜具有作为组织工程支架载体的应用前景。

桑蚕茧丝素蛋白肽对大鼠离体过氧化肝组织的修复及对小鼠过氧化肝损伤的预防作用观察

目的观察桑蚕茧丝素蛋白肽(SFP)对大鼠离体过氧化肝组织的修复作用及对小鼠过氧化肝损伤的预防作用。方法 1SFP对离体大鼠过氧化肝组织抗氧化作用观察:Sprague-Dawley大鼠3只,处死后制备肝微粒体,加入抗坏血酸和亚铁离子溶液诱导过氧化后分为5个组,实验1、2、3组分别加入10、15、30μg/m L的SFP,阳性对照组加入10μg/m L的抗氧化剂BHT,空白对照组加入PBS缓冲液;37℃水浴孵育2 h后检测丙二醛(MDA),计算各组过氧化抑制率。2SFP对小鼠过氧化肝损伤的干预作用观察:选取BALB/c健康成年小鼠50只,随机分为A、B、C、D、E组。A、B、C组分别注射37.5、75、112.5 mg/kg的SFP、1次/d,D组注射生理盐水、1次/d,E组常规饲养;给药33 d后将小鼠饥饿过夜,按上述方法给药0.5~1 h后,A、B、C、D组以溴代苯油灌胃制作过氧化肝损伤模型,24 h后处死5组动物,取小鼠肝组织,检测血清及肝组织中的MDA、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)。在实验过程中,每天记录小鼠体质量,观察小鼠精神、饮食及活动状况。结果实验1、2、3组及阳性对照组肝组织中MDA含量均低于空白对照组,且实验1、2、3组肝组织中MDA含量逐渐降低(P均<0.05)。实验1、2、3组脂质过氧化抑制率逐渐升高,且均低于阳性对照组(P均<0.05)。A、B、C组血清及肝组织中MDA含量低于D、E组,SOD、GSH-Px活性高于D、E组;A、B、C组血清及肝组织中MDA含量逐渐降低,SOD、GSH-Px活性逐渐升高(P均<0.05)。实验过程中,小鼠均未出现消瘦、精神萎靡甚至死亡的情况。结论 SFP对大鼠离体过氧化肝组织有修复作用,并可预防小鼠过氧化肝损伤,作用呈一定剂量相关性,其机制可能与减少过氧化产物生成、提高抗氧化酶活性有关。

家蚕丝素蛋白肽生物制备技术

随着生物技术和其它高新技术的迅速发展,国内外对家蚕丝的食用研究越来越重视,并已取得许多有价值的成果。家蚕丝(含制丝工业的主要副产品下脚蚕茧和废丝)蛋白质含量高达96％以上,主要由丝素和丝胶两部分组成。丝素又称丝心占72％左右,由18种氨基酸组成,其中7％左右为人体必须的8种氨基酸,85％左右为甘氨酸、丙氨酸和酪氨酸。

再生蚕丝丝素蛋白纳米颗粒的制备及抗菌性

采用一种高效简便新工艺，用特定的溶剂将家蚕丝素蛋白溶解，透析浓缩后用a-糜蛋白酶酶解，制备了蚕丝丝素蛋白纳米级颗粒，进行了4种不同溶剂溶解的筛选性实验。结果表明：采用LiBr／CH3OH／H2O溶剂溶解，透析浓缩后用a-糜蛋白酶酶解的整体工艺效果最优。对生成的纳米粒子尺寸用扫描电镜、场发射扫描电镜进行表征，观察到4种混合溶剂溶解得到的丝素蛋白肽颗粒大小在20-50μm之间；再用a-糜蛋白酶酶解后，丝素蛋白肽颗粒的大小降解为80—300nm。测定了丝蛋白肽粉末的抗菌性，其纳米级颗粒比微米级颗粒具有更优异的抗菌效果。

丝素降解生成的低分子多肽对细胞生长性能的影响

分析丝素降解生成的低分子多肽(low-molecular-weight silk fibroin peptides,LMW-SF)对细胞生长的影响。LMW-SF通过中性蛋白酶酶解丝素蛋白(silk fibroin,SF)获得,分别采用过滤除菌和高压蒸汽灭菌处理后,在0.1~5.0 mg/m L体积浓度条件下,检测LMW-SF对人正常肝细胞(L02)、人肝癌细胞(HepG2)的生长影响,计算相对增殖率(relative growth rate,RGR)。结果显示:当LMW-SF体积浓度较低(0.1 mg/m L和0.5 mg/m L)时,LMW-SF对细胞生长影响较小;当其体积浓度较高(2.5 mg/m L和5.0 mg/m L)时,RGR值最低至8.3%,呈强抑制细胞生长作用;高压蒸汽灭菌处理后,RGR最高达227.4%,呈强促细胞生长作用。研究结果表明:高压蒸汽处理可以使LMW-SF变性失活,并实现强促细胞生长作用,可成为蛋白类物质应用于组织工程支架时的必需工艺环节。