应用DNA探针检测蚊体内丝虫幼虫的研究

本文用人工合成的寡核苷酸探针，经斑点杂交法检测蚊体内马来丝虫幼虫。可测到丝虫和微丝蚴２ｎｇ的ＤＮＡ量，不与其它动物丝虫标本发生交叉反应。将单个蚊直接压于硝酸纤维素膜上进行检测，感染蚊中含有１条感染期幼虫就可出现阳性反应。将一组蚊虫在裂解液中研磨集体检测时，在２０只蚊虫中有１只感染蚊即可检出。显示该探针可用于马来丝虫地区的蚊媒监测。

影响马来丝虫对长爪沙鼠感染率因素的观察

目的：探讨影响马来丝虫对长爪沙鼠感染率的因素。方法：用含马来丝虫感染期幼虫（Ｌ３）生理盐水感染长爪沙鼠，并分别加用抗生素、葡萄糖或培养液ＲＰＭＩ１６４０，观察接种鼠的存活率、感染率和感染度。结果：用含Ｌ３生理盐水组鼠存活率为８０．９％，存活鼠感染率为６０．５％，高感染度率为４３．４％。加用抗生素组，鼠存活率为９８．８％，存活鼠感染率为５２．９％，高感染度率为３０．６％。加用葡萄糖或ＲＰＭＩ１６４０组，鼠存活率（分别为９８．０％和９１．２％）、感染率（分别为６８．８％和６７．７％）和高感染度率（分别为５０．０％和５１．６％）均较高。长爪沙鼠感染马来丝虫浙江株（６代），存活鼠感染率和高感染度率均较贵州株（３１代）高。结论：加用抗生素能提高感染鼠存活率，但其感染率和感染度降低。加用葡萄糖和ＲＰＭＩ１６４０，能提高感染鼠存活率、感染率和感染度。长爪沙鼠对浙江株（６代）较贵州株（３１代）易感。

寡核苷酸SD_(92)探针用于蚊体内马来丝虫幼虫的检测

寡核苷酸ＳＤ９２探针用于蚊体内马来丝虫幼虫的检测山东省寄生虫病防治研究所＊（济宁２７２１３３）陈锡欣黄炳成刘克义杨宝金韩广东蚊媒体内丝虫幼虫的检测是丝虫病监测的重要内容。传统的蚊虫解剖查幼丝虫费时费力，不适应当前形势的需要。我们以合成寡核苷酸ＳＤ９２...

我国不同地区周期型马来丝虫基因组DNA多态性研究

目的 分析我国不同地区马来丝虫基因组的多态性。 方法 用随机扩增多态 DNA(RAPD)技术对我国 6省区周期型马来丝虫基因组 DNA多态性进行了检测。 结果 经 2 0个引物扩增得到 5 1个多态片段 ,6株丝虫共有片段 2个 ,特有片段 9个。 结论 片段共享度及聚类分析所得的 6株丝虫的亲缘关系与同工酶、电镜及氨基酸研究的结果基本一致 ,即地理位置相距近则亲缘关系密切。

山东省班氏丝虫病防治后期传播潜势的研究

目的探讨山东省班氏丝虫病达到基本消灭后期其传播流行的潜势。方法在不采取防治措施的情况下,进行10年病原、蚊媒和血清学纵向研究。结果班氏丝虫病微丝蚴(mf)率由1980年基本消灭第1年的0.31%,降至第10年的0.01%;蚊媒自然感染率在第1年的0.15%,到第9～10年时均降至0;人群丝虫抗体阳性率由第7年6.85%下降至第10年的1.56%。结论在基本消灭丝虫病后,当监测点mf率在0.17%～1.15%,残存mf血症者mf密度为1～50条/120μl时,在不采取防治措施的情况下,班氏丝虫病传播趋于阻断。

细胞毒作用前后马来丝虫微丝蚴氨基酸组成及含量的测定分析

目的 通过观察马来丝虫微丝蚴 (mf)经细胞毒作用后 ,虫体氨基酸含量的变化 ,进一步探讨宿主体内的杀虫机制。 方法 应用高速氨基酸分析仪对细胞毒作用前后的周期型马来丝虫 mf进行氨基酸组成及含量的分析比较。 结果 马来丝虫 mf含 17种氨基酸 ,缺少色氨酸。经宿主细胞毒作用后的虫体氨基酸绝对含量明显低于细胞毒作用前 (P<0 .0 5 )。其中 ,精氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸下降显著 (P<0 .0 1)。 结论 虫体氨基酸含量下降 ,尤其是碱性氨基酸与酸性氨基酸、芳香族氨基酸之间比率下降可能是宿主体内杀伤丝虫 mf的机制之一。

马来丝虫病流行区防治后期年传播潜势的纵向观察

在以嗜人按蚊为主要媒介的马来丝虫病流行区，进行了与丝虫病传播有关的人群和媒介观察，采用Ⅰ、Ⅱ期幼丝虫发育至Ⅲ期幼丝虫的时间内蚊媒存活概率为校正值参与丝虫病年传播潜势计算。结果为终止防治前流行区内平均每人每年受到嗜人按蚊５０次感染性叮咬，可接种７０条Ⅲ期幼丝虫，终止防治后９年分别降至４次和４条，年传播潜势呈逐年下降，与流行区丝虫病流行趋势分析结果一致。认为用校正值参与年传播潜势的计算方法适用于防治后期丝虫病传播流行趋势的分析。

母体丝虫感染对子代血嗜酸性粒细胞分类结果的影响

本文报告对安徽省人体班氏丝虫病流行区２２８对母子血样和７３例产妇血及其脐带血标本进行的白细胞分类计数和微丝蚴检查结果。结果显示，丝虫感染可使血中嗜酸性粒细胞的分类值明显上升。微丝蚴阳性母亲所生微丝蚴阴性子女其嗜酸性粒细胞分类值明显高于微丝蚴阴性母亲所生微丝蚴阴性子女的分类值（Ｐ＜０．０１）。检查出微丝蚴阳性母亲生育的子女其微丝蚴阳性率是微丝蚴阴性母亲生育的子女的２．８６倍。结果分析表明，宫内抗原的接触可致出生后的子女血中嗜酸性粒细胞升高，且此类子女对丝虫的易感性也增加。

感染丝虫的母亲对子代免疫应答的影响─丝虫循环抗原检测比较

应用抗牛丝虫多抗ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法检测皖北丝虫病流行区１１９对产妇及其婴儿脐带血清和１７０对妇女及其子女血清中丝虫循环抗原（ＦＣＡｇ），其中阳性２３１例，阳性率为４０．０％（２３１／５７８）。８３例微丝蚴（ｍｆ）阳性者中６７例检出ＦＣＡｇ，阳性符合率为８０．７％（６７／８３）。５４例ＦＣＡｇ阳性产妇中３３例婴儿脐带血清中检出ＦＣＡｇ，阳性符合率为６１．１％（３３／５４）。表明母体ＦＣＡｇ有可能通过胎盘屏障进入胎儿体内。８４例ＦＣＡｇ阳性妇女中３５例子女血清中检出ＦＣＡｇ，阳性符合率为４１．７％（３５／８４）。肺吸虫病和日本血吸虫病患者假阳性率分别为２．５％和１６．７％。５０名健康大学生的ＦＣＡｇ检测均为阴性。

马来丝虫非放射性寡核苷酸探针的制备及现场应用研究

目的 寻找一种高度特异、敏感的马来丝虫的检测方法 ,并将其用于现场检测。 方法 根据马来丝虫 Hha 重复序列 ,合成马来丝虫特异性引物 1对和寡核苷酸探针 1条 ,采用地高辛加尾标记试剂盒对人工合成寡核苷酸探针进行非放射性标记 ,并对标记后的探针进行标记效率检测 ;将血液标本和蚊虫标本分别用蛋白酶 K等处理液和 Chelex- 10 0处理后 ,结合 PCR技术 ,对该探针的特异性和敏感性进行检测 ;并将此探针用于平远县马来丝虫病的监测。 结果 经测定 ,标记后探针的有效浓度为 1.5～ 2 fmol/μl;结合 PCR技术 ,该探针可检出 10 0 μl阳性血样中 1条微丝蚴 ;5 0只蚊中含有 1只只感染 1条幼丝虫阳性蚊亦能准确检出。班氏丝虫等其它寄生虫标本的检测结果均为阴性 ;采自平远县的 2 4 0份血液标本和 10 0 8只中华按蚊标本均为阴性。 结论 该探针杂交检测方法特异性强 ,敏感性高 ,可作为一种新的马来丝虫病监测方法在现场中使用。

广东省基本消灭丝虫病后人群丝虫感染及抗体变化情况分析

目的 了解广东省基本消灭丝虫病后(1992-1999年)人群丝虫感染及其抗体变化情况。方法 选择10个监测点采用厚血片法进行病原学监测,并将监测点平均分成两组,分别采用间接免疫荧光抗体试验(IFAT)进行双年(A组)、单年(B组)的血清学监测。结果10个监测点共血检114 437人,未发现微丝蚴血症者。1992-1999年A组血清学监测4次,人群丝虫抗体阳性率依次为6．48%、2．71%、252%及 1.66%。B组共监测4次,人群丝虫抗体阳性率依次为 9．85%、5．42%、2.12%和1.56%。结论 广东省基本消灭丝虫病后10个监测点人群未发现微丝蚴血症者,人群丝虫抗体阳性率呈逐年下降趋势,并已接近非流行区人群的抗体水平。

用牛指状丝虫成虫抗原诊断人和动物丝虫病

国外有用蟠尾丝虫、指状丝虫、棘唇丝虫、犬恶丝虫、唇乳突丝虫等进行人丝虫病抗体检测和用棉鼠丝虫检测犬恶丝虫、鹿腹腔丝虫的报道,说明丝虫都有共同抗原部分。70年代国内医学界运用动物异种抗原诊断人丝虫病,认为用犬恶丝虫抗原皮试,进行人丝虫病普查是可行的。国内外在研究人丝虫病的异种抗原中,亦将牛指状丝虫作为诊断人丝虫病的一个重要的异种抗原来源进行研究,但迄今国内还未见有用一种丝虫抗原对人和动物的丝虫病进行免疫诊断的研究报道。本试验在国内初步报道了用牛腹腔指状丝虫作为诊断抗原以2种生化技术对人和犬、牛、猴、兔丝虫抗体的测试结果。

广东省慢性丝虫病患病率变化情况分析

目的 了解不同防治阶段慢性丝虫病患病率 ,为开展慢性丝虫病防治工作提供科学依据。方法 对广东省丝虫病不同防治阶段的丝虫病患者症状体征调查资料进行统计与分析。结果 防治丝虫病前、基本灭丝考核、防治后期监测、消灭丝虫病后 4个阶段的慢性丝虫病患病率分别为2 92 % (4 79/ 1 6 4 2 3)、0 34% (373/ 1 0 95 6 1 )、0 0 8% (1 72 / 2 0 86 83)、0 0 9% (1 4 / 1 5 5 75 )。慢性丝虫病 3种主要体征鞘膜积液、乳糜尿、象皮肿的构成比随着丝虫病的防治进展而发生改变 ,防治前鞘膜积液占的比例最大 (75 1 6 % ) ,以后逐渐减少 ,到消灭阶段已没有发现 ;而乳糜尿和象皮肿所占比例越来越大 ,到消灭阶段分别占 4 2 86 %和 5 7 1 4 %。结论 通过防治 ,慢性丝虫病患病率已得到有效控制 ,但还存在不少象皮肿和乳糜尿病例 。

对犬心丝虫病的一点认识

2000年我们购家犬50只供实验用。饲养中部分犬出现食欲不佳、胃肠功能紊乱、精神烦躁、呼吸异常等临床症状，并伴有心电图异常，甚至死亡。经解剖观察，在右心室内发现有犬恶丝虫。我们重点观察了犬心丝虫病的症状，结合系统尸体解剖，获得一些体会，供同行参考。

用牛丝虫G抗原的ELISA诊断犬、狨猴、鹿、牛和人丝虫病的研究

根据不同种属问丝虫具有交叉抗原反应的特点，选用牛腹腔丝虫的提纯Ｇ抗原，应用ＥＬＩＳＡ的多种方法检测实验动物和人丝虫病血清抗体，可用于该病的诊断，现场应用并具有灵敏度高、特异性强的特点。尤其是对犬丝虫病和人丝虫病的检出率各为９７％和９５．５８％，假阳性率都在３％以下，与其他几种寄生虫的交叉反应亦极少，可用于现场大规模的人或犬丝虫病诊断。

中西医结合防治犬恶丝虫病

犬恶丝虫病又称恶心丝虫病、犬血丝虫病,是由双瓣科恶丝虫属的犬丝虫寄生于犬的右心室和肺动脉所引起的一种丝虫病。临床主要为血液循环障碍、呼吸困难、贫血、皮肤有结节等症状。猫、狐、狼、猩猩及人体也可感染。1犬恶丝虫生活史犬恶丝虫是一种微白色细长的线虫。犬恶丝虫需要蚊虫作为中间宿主,其幼虫微丝蚴,也可在猫蚤与犬蚤体内发育。成熟雌虫产生微丝蚴,后者进入宿主的血液循环系统。