红景天苷对类风湿关节炎患者血清脯氨酸羟化酶2及蛋白磷酸酯酶2A和丝裂原活化蛋白激酶表达水平的影响

目的分析红景天苷对类风湿关节炎(RA)患者血清脯氨酸羟化酶2(PHD2)及蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达水平的影响。方法选取青海省中医院2022年12月至2023年7月收治的RA患者96例。采用随机数字表法分为对照组和观察组,各48例。对照组采用常规西医治疗,观察组在常规西医治疗的同时予以红景天苷治疗,2组均治疗3个月。比较治疗前后2组中医证候评分、临床症状与体征、实验室检查指标[包括红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)]、临床疗效,健康状况评定量表(HAQ)与28个关节疾病活动度评估(DAS28)评分,血清PHD2、PP2A、MAPK水平与基因表达,不良反应。结果治疗后2组主症、次症评分均低于治疗前且观察组均低于对照组(均P<0.05)。治疗后观察组临床症状与体征均轻于对照组,ESR、CRP、RF和anti-CCP水平均低于对照组(均P<0.05)。观察组总有效率高于对照组[95.8%(46/48)比80.4%(37/46)](P=0.020)。治疗后观察组HAQ与DAS28评分均低于对照组[(5.0±1.0)分比(7.2±1.2)分、(3.1±0.5)分比(4.1±0.7)分](t=9.528、7.444,均P<0.001)。治疗后观察组PHD2、MAPK水平及基因表达均低于对照组,PP2A水平及基因表达均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。2组不良反应发生率差异无统计学意义(P=0.528)。结论红景天苷治疗RA可增强临床效果、减轻患者症状、改善实验室指标且安全。推测与降低PHD2和MAPK表达、增加PP2A表达有关。

微小RNA-30a调控丝裂原活化蛋白激酶通路对主动脉夹层大鼠的影响

目的探讨微小RNA(miR)-30a调控MAPK通路对主动脉夹层大鼠模型夹层形成、炎性因子及血管收缩的影响。方法选取SD大鼠50只,建立主动脉夹层大鼠模型,将其随机分为对照组、模型组、miR-NC组、miR-30a组、miR-30a抑制剂组,各组10只。组织病理学染色观察大鼠主动脉组织变化、主动脉中膜弹力纤维与胶原纤维变化;采用PCR、尾动脉压力计、ELISA法对各组miR-30a表达、干预前后收缩压情况、血清炎性因子表达进行检测;采用Western blotting检测各组大鼠基质金属蛋白酶(MMP)-6、MMP-2蛋白表达以及MAPK通路相关蛋白表达。结果MiR-30a抑制剂组血管壁撕裂程度和内动脉壁排列紊乱有所改善;miR-30a抑制剂组改善血管重构;与对照组相比,模型组miR-30a表达较高,与miR-NC组相比,miR-30a组、miR-30a抑制剂组表达较低,P<0.05;干预前,各组收缩压比较差异无统计学意义,P>0.05;与对照组相比,模型组收缩压较高,与miR-NC组相比,miR-30a组表达较高,miR-30a抑制剂组表达较低,P<0.05;与对照组相比,模型组肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β表达较高,与miR-NC组相比,miR-30a组表达较高,miR-30a抑制剂组表达较低,P<0.05;与对照组相比,模型组、MMP-6、MMP-2、Ras、Raf、P38 MAPK及ERK1/2蛋白表达较高,与miR-NC组相比,miR-30a组表达较高,miR-30a抑制剂组表达较低,P<0.05。结论MiR-30a参与主动脉夹层的形成、炎症反应、调控主动脉夹层血管重构,可能是通过调控MAPK信号通路实现的。

甘草次酸通过抑制p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路促进脂多糖诱导的小胶质细胞M2极化

目的探究甘草次酸(GA)通过抑制p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路促进脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞M2极化。方法将小鼠BV2小胶质细胞分为阴性对照(NC)组、LPS组(100μg/ml LPS)、GA组(100μg/ml LPS+10μmol/L GA)、GA+抑制剂组(100μg/ml LPS+10μmol/L GA+10μmol/ml p38 MAPK通路抑制剂)、抑制剂组(100μg/ml LPS+10μmol/ml p38 MAPK通路抑制剂)和GA+激活剂组(100μg/ml LPS+10μmol/L GA+300 ng/ml p38 MAPK通路激活剂)。用细胞计数试剂盒8法测定细胞活力,酶联免疫吸附测定炎性因子水平,倒置显微镜观察细胞形态,Western blot检测精氨酸酶1(Arg-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及p38 MAPK通路相关蛋白表达水平。结果与LPS组比较,GA组和抑制剂组细胞足突增多、胞体变大、细胞间隔缩小,白细胞介素(IL)1β、IL-6、iNOS、P53蛋白、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)表达显著降低(22.53±0.53、24.13±1.00 vs 29.56±1.46,10.37±0.59、10.16±0.21 vs 15.13±1.00,0.39±0.01、0.38±0.01 vs 1.12±0.01,0.34±0.01、0.31±0.01 vs 0.89±0.01,0.40±0.01、0.40±0.02 vs 0.88±0.01,P<0.05),IL-10、Arg-1表达显著升高(177.33±7.57、187.21±6.87 vs 64.67±11.50,0.41±0.01、0.44±0.03 vs 0.10±0.01,P<0.05)。与GA组比较,GA+抑制剂组细胞足突增多、胞体变大,IL-1β、IL-6、iNOS、P53蛋白、p-p38 MAPK表达显著降低,IL-10、Arg-1表达显著升高(P<0.05);GA+激活剂组细胞足突减少、胞体变小,IL-1β、IL-6、iNOS、P53蛋白、p-p38 MAPK表达显著升高,IL-10、Arg-1表达显著降低(P<0.05)。结论GA可通过阻断p38 MAPK信号通路促进LPS诱导的小鼠BV2小胶质细胞M2极化。

重楼皂苷Ⅶ通过p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路对肝癌细胞恶性生物学行为的影响

目的 观察重楼皂苷Ⅶ对肝癌细胞恶性生物学行为的影响,并探讨相关机制。方法 于2021年6月至2022年6月,取对数期人肝癌HepG2细胞,分为对照组(常规培养)、重楼皂苷Ⅶ组(重楼皂苷Ⅶ0.8μmol/L)、SB203580[p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路抑制剂]组(SB203580 10μmol/L)、联合组(重楼皂苷Ⅶ0.8μmol/L、SB203580 10μmol/L)。噻唑蓝法检测细胞增殖能力;膜联蛋白Ⅴ(AnnexinⅤ)/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞凋亡率;划痕实验检测细胞迁移能力;小室实验检测细胞侵袭能力;蛋白质印迹法检测细胞p38 MAPK、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)蛋白表达。结果 与对照组24、48、72 h吸光度值,迁移率(74.33±9.37)%,凋亡率(3.25±0.78)%,p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2及侵袭细胞数(364.92±47.99)个比较,重楼皂苷Ⅶ组24、48、72 h吸光度值,迁移率(11.21±3.35)%降低,凋亡率(39.87±8.94)%,p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2升高,侵袭细胞数(54.84±7.41)个减少(P<0.05);SB203580组24、48、72 h吸光度值,迁移率(89.30±14.56)%升高,凋亡率(1.05±0.15)%,p-p38MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2降低,侵袭细胞数(617.04±75.34)个增加(P<0.05)。与重楼皂苷Ⅶ组比较,联合组24、48、72 h吸光度值,迁移率(40.52±8.18)%升高,凋亡率(11.30±2.80)%,p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2降低,侵袭细胞数(141.36±16.75)个增加(P<0.05);与SB203580组比较,联合组24、48、72 h吸光度值、迁移率降低,凋亡率、p-p38 MAPK/p38MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2升高,侵袭细胞数减少(P<0.05)。结论 重楼皂苷Ⅶ可抑制肝癌HepG2细胞增殖、迁移及侵袭等恶性生物学行为,并诱导其凋亡,作用机制可能与激活p38 MAPK信号通路相关。

丝裂原活化蛋白激酶15纳米抗体的制备及其在B16-F10黑素瘤细胞生长过程中的抑制作用

丝裂原活化蛋白激酶15(mitogen-activated protein kinase 15,MAPK15),又称ERK7或ERK8,是MAPK家族的非典型新成员。MAPK15不同程度地促进不同肿瘤细胞的增殖、迁移、自噬等细胞活动。本研究以MAPK15为靶点,筛选特异性的MAPK15纳米抗体,评估其是否能够作为免疫组织化学和Western印迹中的一抗用于其抗原表达的检测,并探究该纳米抗体在B16-F10黑色素瘤细胞中的作用。通过噬菌体展示技术从B16-F10黑色素瘤细胞纳米抗体文库中进行筛选,得到1株MAPK15特异性纳米抗体,命名为MAPK15-VHH;将该菌株构建原核表达载体,进行优化诱导表达条件时发现,0.6 nmol/L IPTG,15℃,100 r/min条件下该纳米抗体的上清表达量最高。通过竞争ELISA法检测MAPK15-VHH的亲和力,结果显示,该抗体KD值为0.9829。通过Western印迹和免疫组织化学检测脑组织中MAPK15在蛋白质水平的表达量及分布情况,结果表明,MAPK15-VHH可与组织中的MAPK15结合,用于检测MAPK15蛋白的表达情况。在B16-F10黑色素瘤细胞中过表达MAPK15后向其中添加MAPK15-VHH,通过CCK8、Western印迹以及实时荧光定量PCR检测其对该细胞增殖和自噬的影响,结果显示,该MAPK15-VHH能作为MAPK15的拮抗剂,抑制B16-F10细胞的增殖和自噬,从而抑制黑素瘤细胞的生长。综上所述,本研究成功得到一株亲和力较强的MAPK15纳米抗体,可用于Western印迹及免疫组织化学以检测MAPK15在蛋白质水平的表达及分布;此外,该MAPK15纳米抗体可以作为MAPK15拮抗剂,有效地抑制B16-F10细胞的增殖和自噬进程,为临床检测试剂和治疗药物的开发提供理论基础。

丝裂原活化蛋白激酶4、生存素基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其意义

目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶4(MKK4)、生存素(Survivin)基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其意义。方法:选择82例喉癌患为研究对象,取手术切除的喉癌组织及癌旁正常黏膜组织,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法、免疫组织化学法检测MKK4、Survivin基因表达,分析其与临床病理特征的关系,随访记录喉癌患者5年生存率,并用Cox回归模型对喉癌患者预后因素进行分析。结果:喉癌组织中MKK4mRNA表达较癌旁组织下降,喉癌组织中SurvivinmRNA表达较癌旁组织升高(均P<0.05)。癌旁组织和喉癌组织MKK4蛋白阳性表达率分别为71.95%(59/82)和40.24%(33/82),Survivin蛋白阳性表达率分别为23.17%(19/82)和71.95%(59/82)(χ^(2)=16.737,χ^(2)=39.117,均P<0.01)。不同肿瘤分化程度、TNM分期及有无淋巴结转移患者MKK4、Survivin蛋白阳性表达比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。喉癌组织中MKK4和Survivin表达呈负相关(r=-0.403,P<0.05)。MKK4阳性患者5年生存率81.82%(27/33)高于阴性患者65.31%(32/49),Survivin阳性患者5年生存率62.71%(37/59)低于阴性患者82.61%(19/23),影响喉癌患者预后的因素为TNM分期和MKK4、Survivin表达(均P<0.05)。结论:喉癌组织中MKK4表达下调,Survivin表达上调,两者可能是潜在的预后标记物以及治疗靶点。

针对丝裂原活化蛋白激酶信号通路的胃癌靶向治疗研究进展

胃癌在全世界范围内都具有较高的发病率和死亡率,是威胁人类健康的一大难题。靶向治疗药物的出现,使中晚期胃癌治疗得到突破,延长了无数胃癌患者的生存期,但耐药和毒性作用等问题仍然存在,因此需要寻找更加安全可靠的靶向药物。近年来,丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedprotein kinase,MAPK)信号通路被发现与胃癌的发生发展密切相关,能够影响胃癌细胞的增殖、侵袭、凋亡等,也有许多影响MAPK信号通路的药物被相继发现。本文通过查阅相关文献,对针对MAPK信号通路的胃癌靶向治疗药物的研究作一综述,以期为胃癌的靶向治疗提供新的思路。

柚皮苷在促大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化过程中对丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

目的分析补肾活血治则指导下柚皮苷促进骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化及骨段迁移修复能力。方法对60只6月龄双侧卵巢摘除术后12周的大鼠,行单侧胫骨水平切开术,处死后,在无菌条件下取其双侧股骨和胫骨,进行传代培养。培养的第1、2、3、5、7、9、11 d,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定并绘制生长曲线,探讨大鼠MSCs增殖能力。采用MTT法检测第三代MSCs(生长状态良好)被柚皮苷(浓度:10^(-8)mol/L、10^(-7)mol/L、10^(-6)mol/L、10^(-5)mol/L、10^(-4)mol/L)干预后的吸光度(A)值,筛选最优促增值浓度,确认柚皮苷诱导MSCs向成骨细胞分化的能力。结果MTT法测定生长曲线成S形,培养第3天后呈对数生长,第9天后进入平台期。不同浓度柚皮苷对MSCs增殖影响及磷性磷酶酶(ALP)染色阳性细胞表达率两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论柚皮苷可促进实验大鼠骨髓基质细胞的分化与增殖,增加骨钙素的表达,改善卵巢切除大鼠的骨质疏松症状。

丹皮酚通过调节p38丝裂原活化蛋白激酶对缺血性脑卒中大鼠神经炎症的影响

目的探讨丹皮酚对缺血性脑卒中大鼠神经炎症的影响及其机制。方法使用SPF级雄性SD大鼠构建缺血性脑卒中大鼠模型,将大鼠分为假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、丹皮酚组(Paeonol组,20 mg/kg丹皮酚)、丹皮酚联合p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)激活剂组(Paeonol+Anisomycin组,20 mg/kg丹皮酚+2 mg/kg Anisomycin)。造模48 h后观察大鼠神经功能缺损评分,检测脑梗死体积,使用TUNEL染色及免疫荧光染色观察神经元凋亡及小胶质细胞激活情况,酶联免疫吸附测定法检测缺血半暗带区脑组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6水平,Western blot检测p-p38 MAPK、p38 MAPK蛋白表达。结果与Sham组比较,Model组大鼠神经功能损伤严重,脑组织出现白色梗死灶,神经功能缺损评分及脑梗死体积、神经元凋亡率、小胶质细胞数量及TNF-α、IL-1β和IL-6水平、p-p38 MAPK蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与Model组比较,Paeonol组大鼠神经功能缺损评分及脑梗死体积、神经元凋亡率、小胶质细胞数量及TNF-α、IL-1β和IL-6水平、p-p38 MAPK表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与Paeonol组比较,Paeonol+Anisomycin组大鼠神经功能缺损评分及脑梗死体积增加,且丹皮酚改善缺血性脑卒中大鼠脑损伤及炎症反应的作用可被Anisomycin逆转(P<0.05)。结论丹皮酚可能通过抑制p38 MAPK通路,抑制小胶质细胞激活及炎症反应,减轻缺血性脑卒中引起的脑损伤。

核心蛋白聚糖对高糖诱导心肌细胞丝裂原活化蛋白激酶信号通路及纤维化的影响

目的探讨核心蛋白聚糖(DCN)对高糖诱导的心肌细胞H9c2转化生长因子β(TGF-β)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)通路及纤维化的影响。方法将心肌细胞H9c2随机分为5组:正常对照组(使用含5.6mmol/L葡萄糖的无血清培养液培养)、高糖组(使用含33mmol/L葡萄糖的无血清培养液培养)、DCN低浓度组(使用含33mmol/L葡萄糖和0.25μg/mlDCN的无血清培养液培养)、DCN中浓度组(使用含33mmol/L葡萄糖和1.25μg/mlDCN的无血清培养液培养)、DCN高浓度组(用含33mmol/L葡萄糖和2.5μg/mlDCN的无血清培养液培养),MTT法检测心肌细胞H9c2存活率;平板克隆实验检测各组H9c2细胞克隆形成数;流式细胞术检测H9c2细胞周期;划痕实验检测各组H9c2细胞迁移能力;Westernblot法检测H9c2细胞结缔组织生长因子(CTGF)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、纤维连接蛋白(FN)、TGF-β、p38MAPK表达水平以及CREB磷酸化水平。结果高糖组细胞存活率、克隆形成数、S期、G_(2)/M期、MMP-9表达水平显著低于正常对照组,G_(0)/G_(1)期、划痕愈合率、CTGF、FN、TGF-β、p38MAPK及磷酸化CREB表达水平显著高于正常对照组(P<0.05);与高糖组比较,DCN低、中、高浓度组细胞存活率[(90.77±1.13)%、(95.35±2.05)%、(98.70±2.30)%vs(73.23±1.09)%]、克隆形成数[(75.39±8.24)个、(92.28±9.94)个、(112.22±12.42)个vs(54.57±6.19)个]依次上升(P<0.05);高糖组G_(0)/G_(1)期、划痕愈合率、CTGF、FN、TGF-β、p38MAPK及磷酸化CREB水平显著高于DCN低、中、高浓度组,S期、G_(2)/M期、MMP-9表达水平显著低于DCN低、中、高浓度组(P<0.05)。结论DCN能够促进高糖诱导下H9c2细胞增殖,抑制迁移和心肌纤维化,可能与通过阻滞TGF-β/p38MAPK/CREB通路有关。

N-甲基-D-天冬氨酸受体-丝裂原活化蛋白激酶信号通路对心脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的调控作用及其机制

目的探究N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体-丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对心脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的调控作用及其机制。方法选择健康SD大鼠40只,采用随机数字表法将其分为对照组、心脏骤停/复苏组、地卓西平马来酸盐(MK801)干预组、MEK特异性抑制剂(U0126)干预组、联合干预组,每组各8只。除对照组外,其余组大鼠建立心脏骤停-心肺复苏模型,在复苏72 h取各组血样本进行血清白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、肌酸激酶(CK)活性、丙二醛(MDA)测定,并测定各组大鼠脑梗死面积占比、心肌细胞凋亡率以及脑组织和心肌组织的N-甲基-D-天门冬氨酸受体1(NMDAR-1)、p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化氨基末端蛋白激酶(p-JNK)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达情况。结果心脏骤停/复苏组的脑梗死面积占比、心肌细胞凋亡率高于对照组、MK801干预组、U0126干预组、联合干预组,差异有统计学意义(P<0.05)。联合干预组的脑梗死面积占比、心肌细胞凋亡率低于MK801干预组、U0126干预组,差异有统计学意义(P<0.05)。联合干预组复苏72 h后的血清IL-1β、TNF-α、CK-MB、MDA低于MK801干预组、U0126干预组、心脏骤停/复苏组,差异有统计学意义(P<0.05)。联合干预组复苏72 h后的心肌组织、脑组织NMDAR1、p38MAPK、p-JNK、p-ERK蛋白表达低于MK801干预组、U0126干预组、心脏骤停/复苏组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论NMDA受体-MAPK信号通路可能参与介导心脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的调控过程,其机制是通过调节机体炎症反应实现的。

丝裂原活化蛋白激酶类和蛋白激酶C在转化生长因子β1诱导肾小管细胞结缔组织生长因子表达中的作用

目的了解转化生长因子β1（TGF-β1）诱导肾小管细胞结缔组织生长因子（CTGF）表达的机制，特别是蛋白激酶C（PKC）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）在CTGF基因表达中的作用及其对Smad磷酸化的影响。方法分别应用PKC抑制剂G06850以及MAPK的3个组成成分ERK、JNK和p38MAPK的抑制剂PD98059、U0126、SP600125和SB203580阻断相应通路，观察其对TGF．131诱导的CTGF表达以及Smad2／Smad3磷酸化的影响。结果TGF-β1（5μg／L）以时间依赖方式诱导HK-2细胞中Smad2／Smad3的磷酸化，从基础值0．87±0．09上升至2h时高峰2．350±0.11。PKC抑制剂G06850（5μmol／L）和ERK抑制剂PD98059（10μmol／L）、U0126（10μmol／L）可部分抑制TGF-β1诱导的CTGF表达，而p38MAPK抑制剂SB203580（20μmol／L）和JNK抑制剂SP600125（10μmol／L）对TGF-β1诱导的CTGF的表达无影响。PKC抑制剂G06850（5μmol／L）可减少TGF-β1诱导的Smad2／Smad3磷酸化，而ERK抑制剂PD98059（10μmol／L）和U0126（10μmol／L）对Smad2／Smad3的磷酸化没有影响。结论在肾小管上皮细胞中，TGF-β1诱导CTGF的表达需要PKC和Ras／MEK／ERK的参与。PKC以Smad依赖的方式参与肾小管上皮细胞中TGF-β1诱导的CTGF的表达，而Ras／MEK／ERK对CTGF表达的调节不依赖于Smads。

补阳还五汤调控丝裂原活化蛋白激酶信号通路对2型糖尿病大鼠糖脂代谢的影响

目的观察补阳还五汤调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对2型糖尿病(T2DM)大鼠糖脂代谢的影响。方法选取Wistar大鼠60只,随机分为空白组、模型组、阳性对照组及补阳还五汤低、中、高剂量组,每组10只。空白组予基础饲料,其余5组大鼠予高脂饲料喂养,制备T2DM模型。造模成功后,补阳还五汤低、中、高剂量组分别予补阳还五汤药液1.6、3.2、6.4 g/kg生药灌胃,阳性对照组予二甲双胍片混悬液0.2 g/kg生药灌胃,空白组、模型组均予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃,持续给药12周。比较各组大鼠体质量、饮水量、摄食量和尿量,空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbA_(1)c)水平,总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;观察各组大鼠肝脏组织病理学变化,MAPK、磷酸化MAPK(p-MAPK)蛋白表达以及肝脏组织MAPK mRNA、成纤维细胞生长因子21(FGF21)mRNA表达。结果补阳还五汤可明显改善T2DM大鼠体质量、12 h饮水量、摄食量、尿量,FPG、FINS、HbA_(1)c水平,TC、TG、LDL-C、HDL-C水平(P<0.05),随着补阳还五汤剂量增加,大鼠体质量递增,12 h饮水量、摄食量、尿量,FPG、FINS、HbA_(1)c水平,TC、TG、LDL-C水平均递减,HDL-C水平递增。补阳还五汤各剂量组大鼠肝脏组织均在不同程度上有明显改善,且高剂量组效果最显著。补阳还五汤可明显改善T2DM大鼠MAPK、p-MAPK蛋白,MAPK mRNA、FGF21 mRNA表达(P<0.05),随着补阳还五汤剂量增加,MAPK、p-MAPK蛋白,MAPK mRNA、FGF21 mRNA表达均递增。结论补阳还五汤可有效改善T2DM大鼠糖脂代谢,其作用机制可能与激活MAPK信号通路有关。

中药调控p38丝裂原活化蛋白激酶/核因子κB通路治疗肾纤维化研究进展

肾纤维化是一种慢性、动态且不可逆的病理改变,是慢性肾脏病进展的主要病理过程。p38丝裂原活化蛋白激酶/核因子κB(p38MAPK/NF-κB)信号参与炎症反应及氧化应激,在肾纤维化进展中发挥关键的调控作用。近年来中药通过靶向调控氧化应激及相关信号通路防治肾纤维化成为研究热点。研究表明单味中药及中药复方有效成分通过调控p38MAPK/NF-κB信号改善氧化应激损伤和炎症状态,发挥保护肾脏功能作用,且临床疗效较好。通过归纳中药调控p38MAPK/NF-κB信号通路干预肾纤维化机制的研究,为中医药防治本病提供参考。

丝裂原活化蛋白激酶信号通路与子宫内膜异位症关系的研究进展

子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)是子宫内膜腺体和基质种植于子宫腔以外的雌激素依赖性疾病,系育龄妇女常见病。异位内膜的侵袭性种植是一个多因素参与的复杂过程,涉及多条信号转导通路,其中丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路起了非常重要的作用。MAPK信号通路与雌激素受体(estrogen receptor,ER)调控关系密切,两者的相互作用在促异位内膜细胞增殖、促炎症因子生成和促血管生成方面均起了重要作用。就MAPK信号通路与EMs的关系作一综述,为更好地理解EMs的发病机制提供新的思路。

黄连素通过调控丝裂原活化蛋白激酶信号通路治疗各科疾病的药理机制研究进展

黄连素是广泛存在于黄连、黄柏、小檗等中草药的一种异喹啉生物碱,具有多种药理作用。黄连素发挥多种药理机制与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路有关。本文发现黄连素通过调控MAPK信号通路发挥以下作用:抑制癌细胞转移、增殖,增加耐药癌细胞敏感性发挥抗癌作用;抑制病毒复制,抑制细菌诱导的炎症,抑制真菌增殖发挥抗病原体作用;促进组织葡萄糖摄取降血糖,改善胰岛素抵抗,保护胰岛β细胞发挥抗糖尿病作用;抑制血管平滑肌细胞增殖,抑制血管内皮细胞凋亡,降血脂发挥抗动脉粥样硬化作用;抑制心肌缺血,抑制心肌重塑发挥心脏保护作用;抑制β淀粉样蛋白表达,抑制神经炎症,抑制神经细胞死亡,改善糖尿病性神经病变发挥神经系统保护作用;抗胃肠炎,抗胰腺炎,肝保护作用发挥消化系统保护作用;抗糖尿病肾病,抗药物性肾损伤,抗肾缺血发挥肾脏保护作用;抗过敏反应,抗类风湿关节炎,抗骨关节炎,抗牙周炎、鼻息肉等发挥抗炎作用。

RAS/RAF/丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶信号通路在胃癌中的研究进展

胃癌(GC)的发病机制复杂,与多种因素有关,包括环境和遗传因素等。细胞内信号通路失调代表了一种常见的致病机制,可能适合对患者进行靶向药物治疗。RAS/RAF/丝裂原活化蛋白激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在多种恶性肿瘤的发生发展中起到至关重要的作用。但迄今为止,大多数针对此通路的药物研究是基础实验,临床试验有待开展。本文就RAS/RAF/MEK/ERK信号通路在GC中的研究进展进行综述,重点论述其与GC的关系及潜在的作用机制,以及RAS/RAF/MEK/ERK信号通路抑制剂在GC治疗中的应用前景,旨在为GC的早期诊断和治疗提供新思路。

振腹法对多囊卵巢综合征大鼠血糖、胰岛素水平及p38丝裂原活化蛋白激酶蛋白表达的影响

目的探讨振腹法治疗对多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠空腹血糖(Fasting plasma glucose,FPG)、血清胰岛素(fasting serum lisulin,FINS)、胰岛素抵抗指数(Homeostatic model assessment for insulin resistance,HOMA-IR)及卵巢p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 mitogen-activated protein kinase,p-p38 MAPK)蛋白表达与卵巢组织结构的影响,为振腹法的临床应用推广提供科学依据。方法采用芳香酶抑制剂(来曲唑)造模法建立PCOS大鼠模型,将40只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、二甲双胍组、振腹组,每组10只,各组大鼠给予相应药物连续灌胃21天。用葡萄糖氧化酶法测定FPG水平、酶联免疫吸附测定法测定空腹FINS水平,并计算HOMA-IR,比较各组的大鼠卵巢形态结构的差异;用蛋白免疫印迹法测定各组大鼠卵巢组织p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达量。结果与空白组相比,模型组大鼠卵巢出现囊性卵泡,卵巢皮质间质细胞明显增生,颗粒细胞层数减少;FPG、FINS、HOMA-IR水平升高(P<0.05),p38 MAPK、p-p38 MAPK表达量升高(P<0.05)。与模型组相比,二甲双胍组、振腹组大鼠卵巢囊性卵泡减少,颗粒细胞层增厚,可见卵母细胞,可见少量黄体;FPG、FINS、HOMA-IR水平降低(P<0.05),p38 MAPK、p-p38 MAPK表达量降低(P<0.05)。与二甲双胍组相比,振腹组大鼠FPG、p38 MAPK、p-p38 MAPK水平均相近(P>0.05)。结论振腹法可以改善PCOS模型大鼠卵巢结构,降低PCOS卵巢组织p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达水平,对PCOS血糖、胰岛素有一定调节作用,对PCOS伴胰岛素抵抗能有一定治疗作用,且振腹法在降低FPG水平上作用与二甲双胍作用相近。

电针颈夹脊穴对神经根型颈椎病模型大鼠小胶质细胞、P38丝裂原活化蛋白激酶和炎性因子表达的影响

目的:观察电针颈夹脊穴对神经根型颈椎病(CSR)模型大鼠疼痛行为学、脊髓背角中小胶质细胞激活标志物补体受体3(CR3)、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38-MAPK)和炎性细胞因子表达的影响,探讨电针治疗CSR所致神经病理性疼痛的镇痛机制。方法:将72只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、假手术组、电针组、胶质细胞抑制剂L-α-氨基己二酸(LAA)组和电针+LAA组,每组12只。空白组不做任何处置;假手术组仅暴露右侧C7脊神经,不结扎,并进行鞘内置管;模型组、电针组、LAA组及电针+LAA组结扎右侧C7脊神经建立神经根型颈椎病模型并进行鞘内置管。空白组不予任何干预;假手术组与模型组仅在电针组干预同时间点进行捆绑操作;电针组于术后第7天开始电针双侧C6、C7颈夹脊穴,20 min/次,1次/d,连续干预14 d;LAA组于术后第7天开始鞘内注射LAA,5 nmol/次,1次/d,连续干预14 d;电针+LAA组于术后第7天开始同电针组与LAA组进行电针双侧C6、C7颈夹脊穴及鞘内注射LAA干预。术后观察并记录大鼠患侧足底热缩足反射潜伏期(PWTL),采用免疫荧光法观察CR3、P38-MAPK表达水平,采用免疫组化法观察炎性细胞因子白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、白介素18(IL-18)与肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达水平。结果:造模后第7天,模型组、电针组、LAA组与电针+LAA组PWTL明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05);经干预后,电针组、LAA组和电针+LAA组治疗后患侧前足底PWTL均持续升高,术后14 d、21 d患侧前足底PWTL明显高于同时间节点模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。与空白组比较,假手术组大鼠脊髓背角CR3、P38-MAPK、IL-1β、IL-6、IL-18与TNF-α表达差异无统计学意义(P>0.05);与假手术组比较,模型组大鼠脊髓背角CR3、P38-MAPK、IL-1β、IL-6、IL-18与TNF-α表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,电针组、LAA组、电针+LAA组大鼠脊髓背角CR3、P38-MAPK、IL-1β、IL-6、IL-18与TNF-α表达均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:电针颈夹脊穴可抑制小胶质细胞激活,下调P38-MAPK表达,减少炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-18与TNF-α的生成,提示电针可能通过抑制小胶质细胞激活、降低P38-MAPK表达和抑制炎性细胞因子分泌以发挥镇痛作用。

火针对类风湿性关节炎大鼠踝关节JNK、p38丝裂原活化蛋白激酶的影响

目的观察火针对类风湿性关节炎（RA）模型大鼠踝关节c-junN末端激酶（c-jun N-terminal kinease,JNK）和p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）表达的影响,探讨火针治疗RA的作用机制。方法采用雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、火针组、药物（甲氨蝶呤,MTX）组,每组各10只。模型组、火针组、药物组大鼠分别给予建立佐剂性关节炎模型,正常组不造模。火针组点刺腰部夹脊穴和阿是穴,共治疗2次。分别于实验第1、2、4、6、8天检测大鼠右后足足跖肿胀度。实验第9天取血测大鼠血清TNF-α和IL-1β,取踝关节滑膜组织做关节组织病理学切片观察及局部滑膜组织蛋白JNK、p38的免疫组化,Western blot法测定局部滑膜组织JNK、p38的蛋白表达的影响。结果实验第2天,模型组、火针组、药物组足跖肿胀度均与正常组有明显差异（P〈0.01）,实验第8天,火针组的足跖肿胀度明显低于模型组（P〈0.05）;模型组大鼠血清TNF-α和IL-1β（P〈0.05）含量高于正常组,滑膜细胞增生及炎性细胞浸润明显增多,而火针组、药物组较模型组血清TNF-α和IL-1β（P〈0.05）含量有降低,滑膜细胞增生及炎性细胞浸润减少;与正常组比较,模型组大鼠局部滑膜组织JNK、p38的表达均有所升高（P〈0.05-0.01）,与模型组比较,火针组、药物组JNK水平均表现为明显下降（P〈0.05）,这种改变在相应的免疫组化镜下图片中均有所体现。结论火针治疗可以有效地调节丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号系统中JNK、p38蛋白活性的表达,降低MAPK活性,这可能是火针治疗RA起效的作用机制之一。