丝裂原激活的蛋白激酶在脑缺血预适应中的作用:ERK、JNK和p38作用的比较

目的初步探讨丝裂原激活的蛋白激酶(MAPKs)3条主要信号通路在大鼠脑缺血预适应中(IPC)的作用。方法将大鼠随机分为正常对照(control)、假手术(SH)、缺血预适应/缺血耐受(IT)3组,每组6只。应用SDS-PAGE、Westernblot等实验方法,借助GelDoc和VersaDoc凝胶成像系统,半定量检测大鼠大脑躯体感觉皮层ERK、JNK、p38磷酸化水平和蛋白表达量的变化。结果IT组大鼠躯体感觉皮层内ERK1和JNK46KD的磷酸化水平增高(P<0.05)。结论大鼠躯体感觉皮层内MAPKs信号通路中ERK1和JNK46KD激活可能参与了脑缺血预适应的形成,但也不能排除p38在其中的作用。

茯苓多糖对2型糖尿病大鼠丝裂原激活的蛋白激酶通路及胰岛素抵抗的影响

目的探究茯苓多糖(PAC)对2型糖尿病(T2DM)大鼠丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)通路及胰岛素抵抗(IR)的影响。方法2019年3—10月,采用高脂高糖喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立T2DM大鼠模型,采用随机数字表法分为模型(T2DM)组、二甲双胍(MET)组(0.65 g·kg^(−1)·d^(−1))和PAC低(PAC-L,0.05 g·kg^(−1)·d^(−1))、中(PAC-M,0.10 g·kg^(−1)·d^(−1))、高剂量(PAC-H,0.20 g·kg^(−1)·d^(−1))组,每组12只。另取12只正常非T2DM大鼠为正常组(NC组),干预8周后测定空腹血糖、空腹血清胰岛素(FINS)、三酰甘油及肝组织均浆丙二醛、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用蛋白质印迹法检测肝脏组织磷酸化p38丝裂原激活的蛋白激酶(p-p38MAPK)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)蛋白表达水平。结果与NC组比较,T2DM组大鼠血清空腹血糖、FINS、三酰甘油含量、胰岛素抵抗指数(HOMA-IRI)(62.56±5.11比5.81±1.05)、肝脏组织丙二醛含量、p-p38MAPK(1.35±0.08比0.16±0.03)和p-JNK(1.29±0.08比0.17±0.02)蛋白水平均显著升高(P<0.05),胰岛素敏感指数(ISI)[(0.86±0.05)×10^(−3)比(7.69±0.14)×10^(−3)]、肝脏组织GSH-Px、SOD活性均显著降低(P<0.05);与T2DM组比较,PAC-L组、PAC-M组、PAC-H组大鼠血清空腹血糖、FINS、三酰甘油含量、HOMA-IRI(49.47±4.56、31.14±3.03、26.59±2.16比62.56±5.11)、肝脏组织丙二醛含量、p-p38MAPK(1.04±0.06、0.89±0.03、0.39±0.02比1.35±0.08)和p-JNK(0.85±0.02、0.72±0.05、0.31±0.01比1.29±0.08)蛋白水平均显著降低(P<0.05),ISI[(1.51±0.11)×10^(−3)、(2.14±0.12)×10^(−3)、(3.73±0.15)×10^(−3)比(0.86±0.05)×10^(−3)]、肝脏组织GSH-Px、SOD活性均显著升高(P<0.05),呈剂量依赖性(P<0.05)。PAC-H组均优于MET组(P<0.05)。结论PAC可改善T2DM大鼠胰岛素抵抗,该作用可能与其抑制MAPK通路减轻氧化应激有关。

多途径丝裂原激活的蛋白激酶介导一氧化氮引起的肝癌细胞凋亡

目的 研究非离子型的diazeniumdiolate类一氧化氮供体引起肝癌细胞凋亡的分子机制。方法 利用免疫印迹、免疫沉淀、凝胶阻滞实验研究一氧化氮供体处理Hep3B肝癌细胞后,丝裂原激活的蛋白激酶、AP-1的激活以及和Hep3B肝癌细胞凋亡的关系。结果 一氧化氮可引起细胞外信号调节蛋白激酶、c-jun N末端激酶和p38激酶的激活,特别是细胞外信号调节的蛋白激酶的持续激活,其中细胞外信号调节的蛋白激酶和c-jun N末端激酶的特异的阻断剂U0126和JNK抑制剂Ⅱ可阻断AP-1的激活和Hep3B细胞的凋亡,而p38激酶的阻断剂SB203580不能阻断AP-1的激活和Hep3B肝癌细胞的凋亡。结论 一氧化氮通过激活细胞外信号调节蛋白激酶、c-jun N末端激酶,进而激活AP-1而引起Hep3B肝癌细胞的凋亡。

丝裂原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶2在心血管系统中的作用

心血管疾病的发生发展与慢性炎症有关。p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)介导的信号通路在心血管细胞炎症、增殖、分化、迁移和代谢中起着重要作用。抑制p38MAPK可有效抑制炎症介质的表达,由于p38抑制剂在安全性方面不可接受,故研究其下游底物是很有必要的。丝裂原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶2(MK2)是p38MAPK重要的下游底物且参与了心血管疾病的发生发展。因此抑制MK2的活性在心血管疾病的治疗及预防中具有重大的临床意义。文章主要对MK2的结构功能和在心血管疾病中的作用展开综述。

EGF诱导人RPE细胞表达整合素α_5过程中丝裂原激活的蛋白激酶的作用

目的探讨表皮生长因子(EGF)诱导人视网膜色素上皮(RPE)细胞表达整合素α5过程中丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)的作用。方法将人RPE细胞分为对照组、EGF组和PD98059组,RT-PCR及流式细胞术观察各组整合素α5mRNA和蛋白的表达;Western blot法检测各组人RPE细胞中MAPK的磷酸化水平。结果对照组的整合素α5mRNA/β-actin mRNA像素值的比值为0.93±0.06,PD98059组为1.06±0.07,EGF组为1.97±0.09,EGF组与其他2组相比,差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞术检测显示,24 h后整合素α5的荧光强度分别为1.94±0.22、4.56±0.25、2.39±0.14,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测显示,30 min后EGF组细胞外信号调节激酶(ERK)1/2的磷酸化激活水平最高,PD98059组抑制ERK1/2的磷酸化激活,对照组ERK1/2的磷酸化激活作用很弱。结论ERK1/2的磷酸化激活参与EGF诱导人RPE表达整合素α5的过程。EGF激活ERK1/2通路刺激人RPE细胞整合素α5mRNA的表达。

丝裂原激活的蛋白激酶信号转导通路与肝纤维化

多种信号分子通过丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号转导通路(包括ERK、JNK、P38和BMK1),对肝星状细胞(HSC)的活化、增殖、凋亡、细胞周期产生影响,由此在多个环节干预肝纤维化的形成和逆转过程。

大鼠脑内远位触液神经元p38丝裂原活化蛋白激酶的分布及在噪声应激时的表达

目的:观察脑内远位触液神经元内p-p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的分布及其在噪声应激时的表达。方法:用霍乱毒素亚单位B与辣根过氧化物酶复合物(CB-HRP)标记和免疫组织化学相结合的双重标记技术,观察SD大鼠脑实质内远位触液神经元中p-p38MAPK的分布。进一步制作噪声应激动物模型,观察噪声应激后该类神经元中p-p38MAPK的表达变化。结果:在脑干的特定部位恒定出现被CB-HRP标记的两组神经细胞簇,其他脑区未见CB-HRP标记神经细胞簇。不予应激刺激,该细胞簇内仅有个别神经元见有CB-HRP/p-p38MAPK;噪声应激刺激1d时,上述特定部位细胞簇的CB-HRP/p-p38MAPK双重标记神经元数目没有明显变化;噪音应激刺激5d时,CB-HRP/p-p38MAPK双重标记神经元数目较对照组显著增多(P<0.05);噪音应激刺激10d时CB-HRP/p-p38MAPK双重标记神经元数目较对照组显著增多(P<0.05);噪音应激刺激20d时,CB-HRP/p-p38MAPK双重标记神经元数目较对照组显著增多(P<0.01)。结论:在脑干特定部位恒定存在的两组被CB-HRP标记的细胞团为远位触液神经元,其中少数触液神经元有p-p38MAPK表达,且当给予动物噪声应激刺激时,p-p38MAPK免疫阳性神经元和CB-HRP/p-p38MAPK双重标记神经元数量显著增加,提示脑实质内的这种远位触液神经元中的p-p38MAPK可能参与了机体对噪声应激的信息传递或调控,其作用随应激天数增加而日趋增强。

心肌特异性丝裂原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶2基因敲除对小鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响及其机制

目的研究心肌特异性丝裂原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶2(MK2)基因敲除对小鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的影响及其机制。方法将野生型C57BL/6J小鼠随机分为MK2^(+/+)组、MK2^(+/+)+I/R组,心肌特异性MK 2基因敲除的C57BL/6J小鼠随机分为MK2^(-/-)组、MK2^(-/-)+I/R组,每组12只。采用左冠状动脉前降支夹闭的方法建立小鼠心肌I/R损伤模型。比较各组小鼠心肌中MK2、磷酸化MK2(p-MK2)蛋白质相对表达量,心功能超声指标[左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短分数(LVFS)),血清心肌损伤标志物[心肌肌钙蛋白I(cTnI)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平],心肌组织结构、心肌梗死面积[梗死区域(IA)面积/左心室(LV)面积],心肌细胞凋亡情况[心肌细胞凋亡率、裂解型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase-3)相对表达量],心肌组织炎症反应指标[NF-κB相对表达量及TNF-α、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)含量]和氧化应激反应指标[活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量]。结果MK2^(+/+)组与MK2^(+/+)+I/R组间小鼠心肌中MK2蛋白质相对表达量的差异无统计学意义(P>0.05),MK2^(+/+)+I/R组小鼠心肌中p-MK2蛋白质相对表达量显著高于MK2^(+/+)组(P<0.05),MK2^(-/-)组、MK2^(-/-)+I/R组小鼠心肌中均不表达MK2、p-MK2。与MK2^(+/+)组比较,MK2^(+/+)+I/R组小鼠的LVEF、LVFS均显著降低(P值均<0.05),血清cTnI、CK-MB水平均显著增高(P值均<0.05);与MK2^(+/+)+I/R组比较,MK2^(-/-)+I/R组小鼠的LVEF、LVFS均显著增高(P值均<0.05),血清cTnI、CK-MB水平均显著降低(P值均<0.05)。MK2^(+/+)组和MK2^(-/-)组小鼠心肌纤维排列整齐,细胞形态正常;MK2^(+/+)+I/R组和MK2^(-/-)+I/R组小鼠均有明显的心肌纤维断裂、细胞肿胀且排列混乱,但MK2^(-/-)+I/R组小鼠的病理改变程度较MK2^(+/+)+I/R组轻。MK2^(+/+)组及MK2^(-/-)组小鼠均无心肌梗死灶,MK2^(-/-)+I/R组小鼠的IA/LV值显著低于MK2^(+/+)+I/R组(P<0.05)。与MK2^(+/+)组比较,MK2^(+/+)+I/R组小鼠的心肌细胞凋亡率,心肌中leaved caspase-3、NF-κB蛋白质相对表达量及TNF-α、ICAM-1含量,以及心肌中ROS、MDA含量均显著增高(P值均<0.05),SOD含量显著降低(P<0.05);与MK2^(+/+)+I/R组小鼠比较,MK2^(-/-)+I/R组小鼠的心肌细胞凋亡率,心肌中cleaved caspase-3、NF-κB相对表达量及TNF-α、ICAM-1含量,以及心肌中ROS、MDA含量均显著降低(P值均<0.05),SOD含量显著增高(P<0.05)。结论MK2参与心肌I/R损伤的发生,敲除MK 2基因可显著减轻心肌I/R损伤,并减少细胞凋亡,减轻炎症反应和氧化应激反应。

吡格列酮对脂多糖引起的大鼠海马有丝分裂原激活蛋白激酶p38信号传导通路的影响

吡格列酮（pioglitazone，Pio）能抑制脂多糖诱导的原代培养的星形胶质细胞炎症因子的释放，对抗谷氨酸诱导的神经细胞损伤，也有研究显示Pio通过抑制p38MAPK信号传导通路抑制LPS诱导的小胶质细胞炎症反应。但关于Pio对大鼠脑内炎症反应的抑制作用是否与p38MAPK信号传导通路有关目前尚未见报道，本研究通过大鼠脑室内注射LPS建立炎症反应动物模型，应用Western blot方法研究Pio对LPS引起的p38MAPK信号传导通路的影响。

磷脂酰肌醇-3-激酶在胰岛素与表皮生长因子激活MAPK信号通路中的不同作用

目的 研究磷脂酰肌醇 3 激酶 (phosphatidylinositol3 kinase, PI3K)在胰岛素和表皮生长因子 (epidermalgrowthfactor, EGF)刺激丝裂原激活的蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinase,MAPK)信号通路中的作用。方法 主要应用免疫印迹方法分析MAPK的磷酸化水平,利用PI3K特异性抑制剂wortmannin了解PI3K在其中所起的作用。结果 胰岛素和EGF均能有效、快速地刺激MAPK的磷酸化;wort mannin抑制胰岛素刺激的MAPK磷酸化,但对EGF刺激的MAPK磷酸化却没有明显影响。与此相反,胰岛素和EGF刺激的蛋白激酶B的磷酸化,均可被wortmannin同样有效地抑制。另外,wortmannin抑制胰岛素刺激的MAPK磷酸化具浓度依赖性;其不能抑制EGF刺激的MAPK磷酸化的性质并不随EGF刺激浓度的改变而改变。结论 PI3K在胰岛素和EGF刺激的MAPK磷酸化信号通路中起不同的作用。

蛋白激酶MSK在表观遗传学调控中的作用及其生物学意义

丝裂原和应激激活的蛋白激酶(MSK)是一类核内丝/苏氨酸蛋白激酶,参与丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路介导的下游基因转录调控和表观遗传学调控.首先,MSK是MAPK通路的下游媒介分子.在丝裂原或应激刺激下,p38或ERK激酶通过级联磷酸化激活MSK蛋白.然后,活化的MSK介导转录因子磷酸化活化和组蛋白H3的10位丝氨酸磷酸化.MSK介导的组蛋白H3磷酸化,可引发组蛋白乙酰化和甲基化修饰的动态变化,相互协同或拮抗,开放染色质结构,利于诱导型基因的表达.除组蛋白H3外,MSK直接磷酸化的下游底物还包括CREB、NF-κB等转录因子以及多个非转录相关蛋白.因此,MSK能在多层次调控基因表达和细胞功能,广泛参与肿瘤转化、炎症反应、神经突触可塑性以及心肌肥大等生物学事件.本文将简要介绍MSK蛋白的研究进展,探讨其在转录调控、表观遗传学修饰等生物学事件中的作用.

丝裂原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶2基因在白色念珠菌诱导急性肺损伤中的作用及其机制

目的:丝裂原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶2(MK2)基因在白色念珠菌(CA)诱导急性肺损伤中的作用及机制。方法:野生型C57/b6小鼠分为MK2组和MK2+CA组;MK2基因敲除C57/b6小鼠分为MK2 KO组和MK2 KO+CA组;MK2+CA组和MK2 KO+CA组小鼠麻醉后经气管注射50μl白色念珠菌,MK2组和MK2 KO组小鼠麻醉后器官注射50μl生理盐水。分析4组小鼠存活情况;采用苏木精-伊红染色分析炎症情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量聚合酶链反应(qPCR)分析血清炎性因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白和mRNA水平;分离肺组织,采用蛋白质免疫印迹分析肺组织磷酸化p55和p65表达水平;采用流式细胞术分析巨噬细胞激活情况。组间比较采用t检验。结果:MK2+CA组肺病理损伤评分(8.74±1.54)明显高于MK2 KO+CA组小鼠(3.98±0.99),差异有统计学意义(t=5.412,P<0.05)。MK2组和MK2 KO组小鼠肺组织湿重/干重比值(3.39±0.15、3.42±0.20)比较,差异无统计学意义(t=0.267,P>0.05)。MK2 KO组小鼠肺组织湿重/干重比值(3.42±0.20)明显低于MK2 KO+CA组(4.32±0.20),差异有统计学意义(t=9.439,P<0.05)。MK2+CA组小鼠肺组织湿重/干重比值(5.79±0.21)明显高于MK2 KO+CA组(4.32±0.20),差异有统计学意义(t=14.300,P<0.05)。MK2+CA组小鼠血清炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平[(76.84±7.57)、(97.47±8.85)、(51.63±4.24)ng/ml]明显高于MK2 KO+CA组[(51.90±6.51)、(42.67±4.65)、(28.63±3.35)ng/ml],差异有统计学意义(t=7.058、15.500、12.030,P<0.05)。MK2+CA组小鼠血清F4/80+/CD11b+/CD80+巨噬细胞比例[(87.26±4.70)%]明显高于MK2 KO+CA组[(53.05±10.95)%],差异有统计学意义(t=8.120,P<0.05)。MK2+CA组小鼠肺组织肺组织磷酸化p65和p50蛋白表达水平(1.82±0.10、1.33±0.06)明显高于MK2 KO+CA组(1.23±0.10、1.00±0.07),差异有统计学意义(t=11.780、9.810,P<0.05)。结论:MK2参与白色念珠菌诱导急性肺损伤进程,敲除MK2可显著缓解巨噬细胞激活,降低急性肺损伤炎性反应。

植物雌激素金雀异黄酮通过p38MAPK通路促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化

目的研究丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases,MAPKs）的亚型p38 MAPK在植物雌激素金雀异黄酮（Genistein）促进小鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells ,BMSCs）向成骨细胞分化过程中的作用.方法 BMSCs用无酚红α-MEM（含经活性碳吸附的10% FBS、β-磷酸甘油、维生素C）培养,先用Genistein处理细胞,观察BMSCs向成骨细胞分化情况,然后用SB203580（p38 MAPK通路阻断剂）以及PD98059（p44/42 MAPK通路阻断剂）阻断相应的通路后,再用Genistein处理细胞,观察BMSCs向成骨细胞分化情况,并同时观察上述处理后MAPK通路的变化.测定碱性磷酸酶（ALP）活性和钙（Ca）沉积量反映BMSCs向成骨细胞分化状况,用Western blot来检测MAPK通路是否激活.结果 Genistein（0.01,0.1,1 μmol·L-1）剂量依赖性增加小鼠BMSCs细胞内ALP活性和细胞外Ca沉积量,并同时引起p38MAPK通路的激活和p44/42MAPK通路的抑制.SB203580预处理能减弱Genistein刺激引起的p38MAPK通路的激活并同时阻止Genistein诱导的BMSCs向成骨细胞分化.结论 Genistein在0.01～1 μmol·L^-1剂量范围内可通过p38MAPK通路促进小鼠BMSCs向成骨细胞分化.

丹参酚酸B对大鼠肝星状细胞中丝裂原激活的蛋白激酶通路的抑制作用

目的 探讨丹参酚酸B(SA-B)对活化的大鼠肝星状细胞(HSC)中丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号传导通路的抑制作用。 方法 分离大鼠HSC,于无包被塑料培养皿中原代培养7 d,继以10-6mol/L浓度的SA-B孵育,再加10 ng/ml的转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激。以蛋白印迹法观察SA-B对TGF-β1刺激的HSC内细胞外调节的蛋白激酶(ERK)表达及其磷酸化和对HSC表面TGF-β1Ⅰ型受体(TβRⅠ)、Ⅱ型受体(TβpRⅡ)表达的影响,观察由此改变致HSC合成Ⅰ型胶原蛋白的变化。ELISA法测定HSC培养液中Ⅰ型胶原的含量;酶谱法观察基质金属蛋白酶2、9、13(MMP-2、MMP-9、MMP-13)的活性。 结果10-6mol/L浓度的SA-B可抑制原代正常培养9 d的HSC及TGF-β1刺激的HSC中ERK1/2的磷酸化,对TβRⅠ和TβRⅡ的表达无影响。SA-B可抑制原代正常培养的HSC合成Ⅰ型胶原,抑制TGF-β1刺激的HSC Ⅰ型胶原的合成及分泌。SA-B对HSC培养液中MMP-2和MMP-13的活性无明显作用,对MMP-9活性则有明显的促进作用。 结论 SA-B抑制了正常原代培养已活化的HSC和经TGF-β1刺激的HSC内ERK信号传导通路,这一抑制作用与HSC的TGF-β1受体表达无关。SA-B通过抑制TGF-β1的信号传导,减少了HSC对Ⅰ型胶原的合成与分泌,此种细胞功能的改变可能与基质金属蛋白酶的降解作用无关。

p38MAPK对轻度热应激大鼠脾脏巨噬细胞免疫功能的影响

目的:探讨p38MAPK在Bip蛋白介导的体外轻度热应激大鼠巨噬细胞功能改变中的信号作用.方法:p38MAPK抑制剂预处理大鼠脾脏巨噬细胞,将细胞置于41℃恒温箱中,使细胞轻度热应激,1h后恢复到37℃(抑制组),以未应激(对照组)和41℃热应激1h后60min巨噬细胞(应激组)为对照,分别检测3组巨噬细胞吞噬、杀伤、趋化功能,同时检测p38MAPK蛋白和Bip蛋白的表达.结果:p38MAPK抑制剂预处理大鼠脾脏巨噬细胞,与应激组比较,轻度热应激后巨噬细胞吞噬、趋化和杀伤活性明显降低(0.17±0.01vs0.74±0.03,33.32±3.55vs82.07±5.17,24.20%±2.39%vs60.80%±4.02%,均P<0.01);应激组p38MAPK蛋白表达明显上调,p38MAPK抑制剂预处理后,抑制组p38MAPK蛋白表达受到抑制,与应激组比较差异有显著性(p38/β-actin:2.863±0.794vs4.752±1.386,P<0.01);Bip蛋白的表达(Bip/β-actin)也因p38MAPK抑制剂预处理而由应激组的1.270±0.535降至抑制组的1.028±1.061(P<0.05).结论:p38MAPK抑制剂可显著抑制轻度热应激大鼠巨噬细胞吞噬、趋化和杀伤功能以及p38MAPK和Bip蛋白的表达.

皮肤鳞状细胞癌STAT3和MAPK磷酸化及cyclinD1蛋白表达的意义

目的探讨磷酸化信号传导和转录激活因子3(p-STAT3)、磷酸化丝裂原激活的蛋白激酶(p-MAPK)、细胞周期蛋白D1(cyc linD1)在皮肤鳞状细胞癌(SCC)的水平和意义。方法免疫组化方法观察30例SCC中p-STAT3,p-MAPK和cyc linD1蛋白的水平。结果①p-STAT3的水平在SCC中呈明显上调(P<0.001);而p-MAPK在正常皮肤和表皮良恶性肿瘤中的水平差异无统计学意义。②p-STAT3在皮肤SCC中的阳性强度与肿瘤的分化程度有关(P<0.05),阳性率与肿瘤浸润的深度有关(P<0.05),与肿瘤的大小无关。③皮肤SCC中,p-STAT3和cyc linD1的阳性强度呈正相关(P<0.05)。p-MAPK和cyc linD1的阳性强度无相关性。结论①STAT3的磷酸化可能在皮肤SCC的发生发展中起重要作用,并可作为皮肤SCC预后判断的辅助指标之一。②在皮肤SCC中,p-STAT3可能通过诱导cyc linD1过度表达,从而促使肿瘤细胞维持高增殖状态。

右美托咪定对内毒素诱导的急性肺损伤大鼠p38丝裂原激活的蛋白激酶的活化及炎症反应的影响

目的探讨右美托咪定（dexmedetomidine，Dex）对内毒素（1ipopolysaccharides，LPS）诱导的急性肺损伤（acutelunginjury，Au）大鼠肺部P38丝裂原活化蛋白激酶（p38mitogen-activatedproteinkinase，p38MAPK）和炎症反应的影响。方法健康成年雄性SD大鼠采用完全随机分组法分为5组，每组10只：生理盐水组（C组），LPS组，0．2μg·kg^-1·h^-1Dex处理组（Dex0．2组），1μg·kg^-1·h^-1Dex处理组（Dexl组），5μg·kg^-1·h^-1Dex处理组（Dex5组）。各Dex处理组在给予LPS（腹腔注射LPS8ms／kg）诱导ALI之前输注Dex负荷剂量1μg·kg^-1·h^-1 10min，然后持续按各处理组相应剂量输注Dex至各时间点。C组与LPS组输注等体积的生理盐水（1ml·kg^-1·h^-1）至各时间点。收集肺泡灌洗液（bronchoalveolarlavagefluid，BALF），动脉血和肺组织标本，进行动脉血气分析，测量肺组织湿，干重比，观察肺病理学改变，检测支气管BALF中肿瘤坏死因子-a（turnoutnecrosisfactor-a，TNF啾）和白介素（interleukin，IL）．10的浓度，利用Westernblot检测各组大鼠肺组织中p38MAPK和磷酸化水平。结果在注射了LPS后，各组大鼠的动脉氧分压均明显降低（61．3±1．2）VS（131．7±4．7）（P〈0．05）；C组大鼠肺部未见明显的病理改变，LPS组、Dex0．2组和Dexl组大鼠肺部有明显的病理改变，而Dex5组大鼠肺部病理改变较LPS组明显减轻；肺组织湿／干重比LPS组明显的高于C组（5．4±0．3）VS（3．6±0.3）（P〈0．05），Dex5组明显低于LPS组（4．4±0．4）VS（5．4±0．3）（P〈0．05）；磷酸化的p38MAPK、支气管BALF中TNF-α和IL-10水平，LPS组、DexO．2组和Dexl组明显高于c组（P〈0．05），Dex5组明显低于LPS组（P〈0．05）。结论Dex能够减轻LPS造成的大鼠ALI，其机制可能部分与阻断P38MAPK的活化及肺部炎症有关。

内皮素-1通过一种不依赖于p38 MAPK的信号转导机制刺激心肌细胞起搏通道I_f的表达

目的探讨血管活性肽内皮素-1（ET-1）对新生鼠心室肌细胞起搏通道If表达的影响及其细胞内信号机制。方法采用酶消化法急性分离1～3d龄新生大鼠心室肌细胞，用全细胞膜片钳技术记录If电流，定量RT-PCR技术检测介导If电流的、超极化激活的环核苷酸门控通道亚型HCN2和HCN4的表达。结果ET-1呈剂量和时间依赖性增强了HCN2和HCN4通道亚型的表达，ET-1的这-作用可被其ETA受体阻断剂BQ-123阻断，而非ETR受体阻断剂BQ-788，而且特异性p38MAPK抑制剂SB．203580也不影响ET-1的作用。结论ET-1通过-种ETA受体介导的、不依赖于p38MAPK的信号转导机制刺激了心肌细胞起搏通道，f的表达。这-作用与ET-1致心律失常机制有关。

p38丝裂原活化蛋白激酶在应激性溃疡发病中的作用

目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在应激性溃疡发生中的作用。方法80只SD大鼠分成正常对照组(10只)、浸水-束缚(WIR)应激模型组(0.5、1、2、4和6h时间点各10只)和p38特异性抑制剂CNI1493处理组(低剂量和高剂量组各10只)。CNI1493处理组于应激前2h尾静脉注射1或10mg/kg的CNI1493。胃黏膜病变程度采用溃疡指数计分评价,磷酸化和总p38MAPK表达采用蛋白印迹法(Westernblot)检测,肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素1β(IL1β)基因表达采用Northernblot方法检测。结果WIR应激后大鼠胃黏膜p38MAPK发生持续活化,其最大活化发生于应激后1h,为正常水平的(6.8±3.2)倍(P<0.01)。使用CNI1493阻断p38MAPK活化后,胃黏膜损伤程度显著减轻,同时促炎性细胞因子TNFα和IL1β基因表达也明显下调。结论p38MAPK活化在实验性应激性溃疡的发生中发挥了重要作用。