苦参素对肝癌Bel-7404细胞的增殖、丝裂原活化蛋白激酶1及细胞周期蛋白D1表达的影响

目的 探讨苦参素对肝癌Bel-7404细胞的增殖、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)1及细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达的影响。方法 体外培养肝癌细胞Bel-7404。实验分为苦参素组、阴性对照组、空白对照组(不含细胞),经阴性对照组与空白对照组校正后得到对照组,苦参素组加入含不同浓度(0.5mg/mL、1mg/mL、2mg/mL、4mg/mL、8mg/mL)苦参素的培养液,阴性对照组、空白对照组加入等体积培养液。干预48h、72h后,采用四甲基偶氮唑盐法检测苦参素对肝癌细胞Bel-7404的抑制作用。应用半数抑制浓度的苦参素作用72h后,检测细胞的MAPK1及CyclinD1mRNA表达。结果 苦参素分别作用48h及72h后,各浓度苦参素组的抑制率均高于对照组,并随苦参素浓度的增加而升高(均P<0.05);2mg/mL、4mg/mL、8mg/mL苦参素组中,72h的抑制率均高于48h(均P<0.05)。苦参素组CyclinD1mRNA相对表达量与对照组差异无统计学意义(P>0.05),而MAPK1mRNA相对表达量高于对照组(P<0.05)。结论 苦参素可抑制肝癌Bel-7404细胞的增殖,且呈一定的浓度及时间依赖,其作用机制可能与MAPK信号通路有关。

细胞周期素D1、S期激酶相关蛋白2与p27^(kip1)在结直肠癌中的表达及相关性研究

细胞周期调控机制是由复杂的网络调控系统组成,其调控紊乱是肿瘤发生发展的重要分子事件。参与细胞周期调控的主要因子有：

辛基酚对MDA-MB-231乳腺癌细胞周期及周期蛋白表达的影响

目的:观察辛基酚(OP)对细胞周期及周期蛋白表达的影响,探讨OP抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖的可能分子机制.方法:以MTT试验、流式细胞分析、免疫细胞化学和RT-PCR等方法观察OP对MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖、细胞周期、CDK2,CDK4,cyclinD1和cyclinD3表达的影响.结果:4,8μmol/LOP作用MDA-MB-231乳腺癌细胞48h时,其抑制率为(17.1±4.1)%,(40.3±8.7)%,cyclinD1表达量荧光值为55.1±10.2,41.4±11.2,比对照组(89.9±11.2)明显降低(P<0.05).8μmol/LOP作用MDA-MB-231乳腺癌细胞24h和72h,G0/G1期细胞为(67.0±17.6)%和(44.4±11.9)%,G0/G1期细胞比对照组[24h,(46.6±12.8)%;72h,(15.3±3.1)%]明显增高(P<0.05).OP导致MDA-MB-231乳腺癌细胞中CDK2,CDK4,cyclinD1和cyc-linD3mRNA的表达降低,且cyclinD1蛋白的表达也降低.结论:OP能抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖,其机制可能与OP能降低乳腺癌细胞中CDK2,CDK4,cyclinD1和cyclinDmRNA及其蛋白的表达有关.

Tob与细胞周期蛋白D1在喉癌细胞增殖过程中调控关系的研究

目的探讨Tob与细胞周期蛋白(cyclin)D1的调控关系及其对喉癌细胞增殖的影响。方法荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测74例喉癌及相应癌旁正常组织中Tob与cyclinD1的表达;应用U0126处理Hep2细胞,检测处理后细胞中磷酸化的Tob蛋白和Tob蛋白总量的改变,以及cyclinD1的表达量,并用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞毒性指数;RNA干扰(RNAi)抑制Hep2细胞中Tob蛋白的表达后,检测cyclinD1的表达改变,MTT法测定细胞毒性指数。结果Tob和cyclinD1分别在喉癌组织中表达下降和增加,且二者呈负相关;U0126处理后,磷酸化的Tob减少,Tob蛋白总量无明显改变,cyclinD1表达降低,且细胞增殖下降;siR-NA-Tob转染后可使磷酸化的Tob和Tob总量减少,而cyclinD1表达增加,细胞增殖亦增强。结论Tob和cy-clinD1都与喉癌的发生相关。Tob接受细胞外信号调节激酶(ERK1)的调控,并调节下游cyclinD1基因的表达,影响喉癌细胞的增殖能力,发挥其肿瘤抑制基因的作用。

皮肤鳞状细胞癌STAT3和MAPK磷酸化及cyclinD1蛋白表达的意义

目的探讨磷酸化信号传导和转录激活因子3(p-STAT3)、磷酸化丝裂原激活的蛋白激酶(p-MAPK)、细胞周期蛋白D1(cyc linD1)在皮肤鳞状细胞癌(SCC)的水平和意义。方法免疫组化方法观察30例SCC中p-STAT3,p-MAPK和cyc linD1蛋白的水平。结果①p-STAT3的水平在SCC中呈明显上调(P<0.001);而p-MAPK在正常皮肤和表皮良恶性肿瘤中的水平差异无统计学意义。②p-STAT3在皮肤SCC中的阳性强度与肿瘤的分化程度有关(P<0.05),阳性率与肿瘤浸润的深度有关(P<0.05),与肿瘤的大小无关。③皮肤SCC中,p-STAT3和cyc linD1的阳性强度呈正相关(P<0.05)。p-MAPK和cyc linD1的阳性强度无相关性。结论①STAT3的磷酸化可能在皮肤SCC的发生发展中起重要作用,并可作为皮肤SCC预后判断的辅助指标之一。②在皮肤SCC中,p-STAT3可能通过诱导cyc linD1过度表达,从而促使肿瘤细胞维持高增殖状态。

青蒿琥酯通过抑制ERK1/2蛋白活化负性调控HSC-T6细胞cyclin D1的表达和AP-1活性

目的:通过观察青蒿琥酯(artesunate,Art)对肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)细胞外信号调节蛋白激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)、激活蛋白1(activator protein 1,AP-1)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的影响,探讨Art抗肝纤维化的分子机制。方法:用血小板源性生长因子BB(platelet-de-rived growth factor BB,PDGF-BB)诱导HSC-T6细胞的增殖。实验分为对照组、PDGF-BB组、PDGF-BB+Art组(Art终浓度6.25 mg/L、25 mg/L、50 mg/L)和PDGF-BB+ERK抑制剂PD98059组。ELISA法测定细胞上清液中Ⅰ型胶原的含量,RT-PCR检测各组ERK1/2和cyclin D1 mRNA水平变化,Western blotting法检测各组p-ERK1/2和cyclin D1蛋白表达水平,凝胶电泳迁移率实验(EMSA)检测AP-1的活性。结果:(1)PDGF-BB可明显促进HSC-T6细胞的增殖,PDGF-BB+Art各剂量组和PDGF-BB+PD98059均可抑制HSC-T6细胞上清液中Ⅰ型胶原的含量(P<0.05,P<0.01)。(2)PDGF-BB+Art组(50 mg/L)ERK1/2 mRNA的表达低于PDGF-BB组(P<0.05),其中PDGF-BB+PD98059组ERK1/2 mRNA的表达最低(P<0.01);PDGF-BB+Art组(25 mg/L、50 mg/L)和PDGF-BB+PD98059组cyclin D1 mRNA的表达明显低于PDGF-BB组(P<0.05,P<0.01)。(3)p-ERK1/2、cyclin D1蛋白表达水平在PDGF-BB组最高,而PDGF-BB+Art各剂量组和PDGF-BB+PD98059组降低(P<0.05,P<0.01)。(4)Art可使AP-1与DNA结合活性下降。结论:Art可抑制HSC-T6细胞增殖,其机制可能与其抑制ERK1/2蛋白活化从而降低AP-1的活性和下调cyclin D1的表达有关。

人类肝癌发生过程中cyclinD1和CDK4及p16蛋白的表达

目的研究肝细胞癌(HCC)发生过程中细胞周期调控因子cyclinD1、CDK4和p16蛋白表达及其意义。方法应用免疫组织化学SP染色法检测正常肝组织、慢性肝炎、肝硬化、癌周肝硬化和肝癌组织中cyclinD1、CDK4和p16蛋白表达。对免疫组化结果进行计算机图象定量分析。结果cyclinD1、CDK4和p16蛋白的阳性单位(positive unit,PU)和面数密度(area number density,NA)从慢性肝炎(PU分别为39.4、41.0和33.3;NA分别为236.7、272.7和237.4)、肝硬化(PU分别为40.8、45.2和43.6;NA分别为313.8、354.6和322.9)、癌周肝硬化(PU分别为55.5、59.4和54.4;NA分别为481.9、488.9和432.6)到肝癌(PU分别为59.6、63.7和58.1;NA分别为549.2、587.7和451.3)表达逐渐增强。癌周肝硬化和肝癌组织中cyclinD1、CDK4、p16的表达明显高于慢性肝炎和肝硬化(P值分别为0.034、0.020、0.030、0.007、0.003和0.005),但癌周肝硬化和肝癌组织之间差异无统计学意义,P值分别为0.433、0.535和0.447。慢性肝炎和肝硬化中cy-clinD1、CDK4、p16阳性信号主要定位于胞核,而癌周肝硬化和HCC中主要定位于胞质。p16与HCC的分化程度有关,但未发现cyclinD1、CDK4与肿瘤分化程度之间有相关性。结论cyclin-细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)-细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(CKIs)调控网络中,相关调控因子的异常可能参与了HCC的发生、发展。cyclinD1、CDK4的过度表达可能是肝癌发生过程中的早期事件。在HCC的发生过程中p16高表达可能是细胞周期正反馈调控的结果,在HCC的发生中可能属于早期事件,而p16表达下降或缺失可能是肝癌发生过程中的晚期事件。

丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1在妇产科相关疾病中的研究进展

丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶(mitogen-activated kinase phosphatase,MKPs)是一类在细胞内水解丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)的家族,通过负向调控MAPKs参与细胞的应激、分化、增殖、凋亡等细胞过程,其异常表达与肿瘤的发生、发展密切相关。MKP-1是MKPs家族中被报道最多的成员,具有最强的去磷酸化能力。综述MKP-1在妇产科相关疾病,包括生殖器肿瘤、子宫内膜异位症以及子痫前期的研究进展,阐述MKP-1在疾病中的表达特征、病理作用及其机制;重点讨论了MKP-1在子宫内膜异位症发生发展中的作用,阐述了MKP-1与MAPKs的相互作用对子宫内膜异位症发生、发展过程的影响,为今后的研究方向提供参考。

不同临床病理特征非小细胞肺癌中miR-1269的表达及其对细胞周期的靶向调控作用

目的研究不同临床病理特征非小细胞肺癌(NSCLC)中miR-1269的表达及其对细胞周期的靶向调控作用。方法收集2015年3月至2018年12月商丘市第一人民医院手术切除的NSCLC病灶和对应的癌旁病灶58例,检测miR-1269及细胞周期蛋白的表达量;培养肺癌A549细胞株,转染miR-1269的模拟物和抑制物后检测细胞周期蛋白的表达量。结果NSCLC病灶中miR-1269的表达量明显高于癌旁病灶(P<0.05)且低未分化、有淋巴结转移、有脉管浸润、有胸膜侵犯的NSCLC病灶中miR-1269的表达量明显高于高中分化、无淋巴结转移、无脉管浸润、无胸膜侵犯的NSCLC病灶(P<0.05);NSCLC病灶中Cy-clinD1、CDK4、CDK6的表达量明显高于癌旁病灶且与miR-1269呈正相关,p21Cip1、p27Kip1的表达量明显低于癌旁病灶且与miR-1269呈负相关(P<0.05)。miR1269模拟物组A549细胞中CyclinD1、CDK4、CDK6的表达量明显高于空白对照组、NC模拟物组,p21Cip1、p27Kip1的表达量明显低于空白对照组、NC模拟物组(P<0.05);miR-1269抑制物组A549细胞中CyclinD1、CDK4、CDK6的表达量明显低于空白对照组、NC抑制物组,p21Cip1、p27Kip1的表达量明显高于空白对照组、NC抑制物组(P<0.05)。结论miR-1269的高表达与NSCLC病理特征的变化有关且miR-1269能够靶向调节细胞周期蛋白的表达。

双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠细胞周期的双重调控作用及其机制

目的:探讨双黄升白颗粒对化疗所致骨髓抑制荷瘤小鼠骨髓和肿瘤细胞周期双重调控的作用机制。方法:本研究采用Lewis肺癌荷瘤小鼠,30只小鼠随机分为空白组、模型组和治疗组。除空白组外,腹腔注射环磷酰胺制作骨髓抑制模型。治疗组用40g/(kg.d)双黄升白颗粒治疗6d后,流式细胞仪检测细胞周期情况,并计算增殖指数(proliferationindex,PI);蛋白印迹法和免疫组织化学法检测骨髓及肿瘤组织中细胞周期蛋白依赖激酶4(cyclin-dependent kinase4,CDK4)、细胞周期蛋白依赖激酶6(cyclin-dependent ki-nase6,CDK6)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达。结果:模型组骨髓及肿瘤的G0/G1期细胞比例均低于空白组(P<0.05),PI和CDK4、CDK6、cyclin D1表达高于空白组(P<0.05)。治疗组骨髓G0/G1期细胞比例低于模型组及空白组,PI及CDK4、CDK6、cyclinD1表达均高于模型组及空白组;肿瘤组织G0/G1期细胞比例高于模型组及空白组,PI及CDK4、CDK6、cyc-lin D1表达均低于模型组及空白组。结论:双黄升白颗粒对骨髓抑制Lewis肺癌荷瘤鼠的细胞周期具有双重调控作用,其机制可能与双重调节cyclin D1、CDK4和CDK6表达有关。

胃癌组织中细胞周期蛋白D1和细胞周期蛋白质依赖激酶6的表达与预后的关系

目的检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和细胞周期蛋白质依赖激酶6(CDK6)在胃癌组织中的表达情况,分析其表达与胃癌的临床病理因素和预后之间的关系。方法用Western blot 法测定48例胃癌组织及其邻近的正常胃黏膜中cyclinD1和CDK6的表达量。结果 Cyclin D1在 58％的胃癌组织中呈异常高表达,且其表达与胃癌的浸润深度、淋巴转移和TNM分期相关。CDK6 的表达水平在69％的胃癌组织中异常升高,并与组织学分类、淋巴转移和TNM分期相关。未发现 cyclin D1和CDK6在胃癌组织中的表达存在线性相关关系。包括cyclin D1和CDK6过表达在内的多个因素与胃癌患者的5年生存率相关,但只有TNM分期和CDK6是患者预后的独立影响因素。结论 Cyclin D1和CDK6的异常高表达有可能在胃癌的发生、发展过程中发挥重要作用。

Vk3对宫颈癌Hela细胞mTOR信号转导蛋白基因表达的影响

目的:观察维生素K3(Vk3)对Hela细胞雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其底物p70S6激酶(p70S6K)α1、α2、β1、β2和细胞周期素D1(cyclinD1)mRNA表达的变化及N-乙酰半胱氨酸(NAC)对mTOR及其底物的影响,探讨mTOR信号转导蛋白在人宫颈癌的发生、发展过程中的作用。方法:实验分为对照组(Con)、Vk3处理组(Vk3)、Vk3与NAC联合作用(Vk3+NAC)组及NAC单独应用组(NAC),MTT法检测各组Hela细胞存活率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组Hela细胞中mTOR、p70S6K-α1、p70S6K-α2、p70S6K-β1、p70S6K-β2及cyclinD1mRNA表达。结果:与Con组比较,Vk3组Hela细胞存活率显著降低(P<0.01),mTOR、p70S6K-α1、p70S6K-α2、p70S6K-β1、p70S6K-β2及cyclin D1 mRNA表达量均明显下降(P<0.05);而与Vk3组比较,Vk3+NAC组Hela细胞存活率显著增加(P<0.01),上述指标mRNA表达量均明显增加(P<0.05)。结论:Vk3通过其氧化应激作用抑制Hela细胞的增殖,其机制与降低mTOR信号转导蛋白及cyclinD1的基因表达有关。

丝裂原细胞外信号反应激酶阻断剂对缺氧诱导人视网膜色素上皮细胞增殖的影响

目的:观察特异性丝裂原细胞外信号反应激酶1(MEK1)阻断剂(PD98059)对缺氧刺激的人视网膜色素上皮细胞增殖的影响,并初步探讨其作用机制。方法:实验于2004-11/2005-11在江苏省人民医院中心实验室完成。①利用体积分数为0.95的N2和0.05的CO2混合气体建立培养的人视网膜色素上皮细胞细胞缺氧模型。②用3种不同浓度(10,50和100μmol/L)的P42/P44MAPK特异性阻断剂PD98059处理视网膜色素上皮细胞细胞。③在缺氧24h后用四甲基偶氮唑盐的方法检测细胞的增殖情况。④用反转录-聚合酶链反应的方法检测周期蛋白DmRNA的表达。⑤收集细胞进行流式细胞仪的检测,判断细胞的周期情况。结果:①缺氧刺激24h后视网膜色素上皮细胞增殖,缺氧组比正常组增加4.71%。②PD98059对视网膜色素上皮细胞细胞增殖有明显的抑制作用,并具有浓度依赖性;与缺氧组相比,缺氧+10mmol/L组、缺氧+50mmol/L组及缺氧+100mmol/L组抑制率分别是5.11%,11.66%和16.36%。③缺氧24h后,细胞周期蛋白DmRNA的浓度明显增加,不同浓度的PD98059对周期蛋白D的mRNA生成有明显的抑制作用,并且呈浓度依赖性,缺氧组与正常组比较周期蛋白D增加26.67%,与缺氧组比较,缺氧+10mmol/L组、缺氧+50mmol/L组及缺氧+100mmol/L组抑制率分别为18.93%,37.72%,57.58%。④缺氧时DNA合成前期细胞明显增多,细胞的增殖减少。结论:P42/P44MAPK信号转导通路可能通过对周期蛋白D的影响抑制缺氧时视网膜色素上皮细胞的增殖。

1,25二羟基维生素D_3对肺腺癌细胞株生长及凋亡的影响

目的:研究1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2VitD3]对肺腺癌细胞株A549生长及凋亡的影响。方法:应用流式细胞仪、免疫组织化学和RT-PCR等方法观察1,25二羟基维生素D3对人肺腺癌A549细胞株生长、细胞周期、调控细胞周期基因和调控凋亡基因表达水平的影响。结果:1μmol/L的1,25二羟基维生素D3对A549细胞的生长有抑制作用,1μmol/L的1,25二羟基维生素D3作用后A549细胞G1期比例由59·7%增加至73·2%,P=0·001;S期比例由26·4%降至21·1%,P=0·018;细胞凋亡率由2·6%增至7·2%,P=0·015;可明显上调Fas/FasL的表达量,下调bcl-2表达量;可抑制细胞周期蛋白D1的表达量由0·762减至0·207,P=0·001;同时抑制细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶4的表达量由0·642减至0·129,P=0·002。但较低浓度的1,25二羟基维生素D3上述作用不明显。结论:1μmol/L的1,25二羟基维生素D3可通过多种途径发挥抗肺腺癌作用。

妊娠滋养细胞肿瘤中cyclin D1和CDK4的表达及意义

目的 :探讨细胞周期素D1(cyclin dependentkinas ,cyclinD1)和细胞周期依赖激酶 4(cyclin dependentkinase 4,CDK4)在妊娠滋养细胞肿瘤发生、发展中的作用。方法 :采用免疫组化SP法检测cyclinD1、CDK4在妊娠滋养细胞疾病中的表达。结果 :cyclinD1在葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌组织中的阳性表达率分别为 2 0 %、72 2 2 %和88 89% ,CKD4的阳性表达率分别为16 67%、61 11%和 72 2 2 % ,妊娠滋养细胞肿瘤组与葡萄胎比较 ,cyclinD1和CDK4的表达率明显增高 ,差异有统计学意义 ,P <0 0 1;在妊娠滋养细胞肿瘤中 ,cyclinD1和CDK4的表达成正相关 ,r =5 675 ,P =0 0 17;妊娠滋养细胞肿瘤Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期组织中 ,cy clinD1的阳性表达率分别为 70 %和 93 75 % ,CDK4的阳性表达率分别为 5 0 %和 87 5 % ,随肿瘤临床期别的增加 ,cyclinD1和CDK4的表达率逐渐升高。结论 :cyclinD1和CDK4在妊娠滋养细胞疾病中过度表达 。

信号级联分子磷酸化丝裂原活化蛋白激酶及细胞周期蛋白D1在人骨肉瘤中的表达及临床意义

目的本研究通过检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)及信号级联分子磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(p-MAPK)在人骨肉瘤、良性骨肿瘤和正常骨组织中表达情况,探讨P-MAPK以及cyclinD1在人骨肉瘤发生发展中的作用及机制。方法采用免疫组化技术检测32例人骨肉瘤组织、33例良性骨肿瘤组织及11例正常骨组织的p-MAPK以及cyclinD1后分析其表达情况。结果骨肉瘤组织中P-MAPK和cyclinD1染色阳性率分别为81.25%(26/32)和68.75%(22/32),良性骨肿瘤p-MAPK和cyclinD1染色阳性率分别为9.09%(3/33)和3.03%.(1/33),而正常骨组织染色阳性,率为0.00%,均显著低于骨肉瘤组织。p-MAPK和cyclinD1的阳性率在骨肉瘤异常增加(P<0.05),且p-MAPK和cyclinD1表达强度呈正相关(r=0.742,P<0.05)。结论MAPK的磷酸化可能在骨肉瘤发生发展过程中起到很大作用,MAPK的过度激活可能诱导高表达cyclinD1并导致骨肉瘤持续增殖的肿瘤细胞。

蛋白激酶Cα-胞外调节蛋白激酶1／2与人气道平滑肌细胞中周期蛋白D1及P21^cip1表达的关系

目的探究蛋白激酶C（PKC）α-胞外调节蛋白激酶（ERK）1／2级联对支气管哮喘（简称哮喘）患者血清被动致敏的人气道平滑肌细胞（HASMC）周期蛋白D1（cyclinD1）、周期蛋白依赖性激酶（CDK）抑制剂P21^cip1的调节作用及细胞增殖的影响。方法用含10％哮喘患者血清的DMEM培养基被动致敏HASMC后，按随机数字表法分为对照组、12-肉豆蔻酰-13-乙酸佛波酯（PMA）处理组、PMA±PKCα错配寡核苷酸组、PMA±PKCα反义寡核苷酸组以及PMA±U0126组，每组4个样本。用Westernblot方法检测各组细胞磷酸化PKCα（p-PKCα）、ERK1／2、磷酸化ERK1／2（p-ERK1／2）、cyclinDl和P21eipI的蛋白表达水平，用流式细胞术和四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测HASMC增殖。结果PMA处理组p-PKCα水平、ERK1／2和p-ERKl／2蛋白水平高于对照组，cyclinD1、P21^rip1表达明显强于对照组（相对于各对照组的A值分别为2．10±0．29、1．67±0．19、2．20±0．27、1．99±0．22和3．11±0．29，均P〈0．05），HASMC的增殖[S期细胞比例为（30．3±2．4）％，A490值为0．80±0．06]高于对照组[S期细胞比例为（13．9±2．6）％，A490值为0．41±0．04]，均P〈0．05；PMA±PKCct反义寡核苷酸组中p-PKCot水平低于PMA处理组，ERK1／2和p-ERK1／2表达明显弱于PMA处理组，cyclinD1和P21cipl表达也明显低于PMA处理组（相对于各对照组的A值分别为1．23±0．19、1．34±0．18、1．52±0．20、1．45±0．18和1．49±0．18，均P〈0．05），HASMC的增殖显著下降[S期细胞比例为（21．2±2．8）％，A490值为0．51±0．04；g值分别为6．07，12．63；均P〈0．05]；同样与PMA处理组相比，PMA±U0126组中P-PKCα水平无明显改变（A值为1．99±0．18，g=0．94，P〉0．05），但ERK1／2、P—ERKI／2的表达，cyclinD1和P21^eip1的表达明显低于PMA处理组（A值分别为0．95±0．21、1．15±0．19、1．37±0．15和1．96±0．21，均P〈0．05），HASMC的增殖显著下降[S期细胞比例为（22．0±3．2）％，A490值为0．49±0．03；g值分别为5．51、13．45，均P〈0．05]。结论ERK1／2是PKCα的下游信号分子，PKCα-ERK1／2级联参与了PMA所诱导的哮喘患者血清被动致敏的人气道平滑细胞cyclinD1、P21cip1的表达上调及细胞增殖。

磷酸化Stat3和磷酸化Akt及细胞周期蛋白D1在血管肉瘤中的表达

目的 探讨磷酸化细胞信号传导与转录活化因子3（Star3）和磷酸化Akt及细胞周期蛋白D1在血管肉瘤中的表达。方法 采用免疫组化ABC的方法检测磷酸化Star3（p-Stat3）和磷酸化Akt（p-Akt）及细胞周期蛋白D1在21例血管肉瘤和15例毛细血管瘤石蜡包埋切片中的表达。结果 在21例血管肉瘤石蜡包埋切片中，有15例p-Stat3表达阳性，11例p-Akt表达阳性，16例细胞周期蛋白D1表达阳性；而在15例毛细血管瘤中仅有4例p-Stat3表达阳性，2例p-Akt表达阳性，4例细胞周期蛋白D1表达阳性，两组各阳性表达率分别经卡方检验发现，差异均有统计学意义（P〈0．05）。在血管肉瘤中，p-Star3阳性表达与细胞周期蛋白D1的阳性表达有相关性（r=0．62，P=0．003），而p-Akt阳性表达与细胞周期蛋白D1的阳性表达无相关性（r=-0．09，P=0．700）。结论 p-Stat3、p-Akt和细胞周期蛋白D1在血管肉瘤的形成机制中可能起一定的作用。

抑制长链非编码RNA FAL1表达对上皮性卵巢癌细胞生物学行为的影响及其分子机制

目的:探索上皮性卵巢癌细胞与正常人卵巢细胞中长链非编码RNA(lncRNA)FAL1的表达差异及沉默卵巢癌细胞株SKVO3中lncRNA FAL1的表达对卵巢癌细胞侵袭、迁移及凋亡的影响。方法:利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测组织中lncRNA FAL1表达水平;设计并合成FAL1-siRNA引物序列转染SKVO3,通过细胞划痕试验检测卵巢癌细胞的迁移能力,Transwell侵袭实验检测卵巢癌细胞的侵袭能力,流式细胞术检测卵巢癌细胞的凋亡,蛋白质印迹(Western blotting)检测磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)和磷酸化丝裂原细胞外激酶1/2(p-MEK1/2)蛋白的表达水平。结果:lncRNA FAL1在卵巢癌组织中的表达高于正常卵巢组织([15.04±2.24)vs.(2.93±0.39),P<0.05]。沉默lnc RNA FAL1的表达后,卵巢癌细胞的凋亡能力显著增强([18.38±0.73)%vs.(2.86±0.09)%,P<0.05],而卵巢癌细胞迁移、侵袭能力均降低([6.68±1.49)μm vs.(12.85±2.56)μm,(25.80±2.59)个vs.(145.6±5.23)个,均P<0.05],MEK/ERK通路MEK1/2和ERK1/2蛋白磷酸化水平明显降低(P<0.05)。结论:lncRNA FAL1通过激活MEK/ERK通路影响上皮性卵巢癌细胞的侵袭、迁移及凋亡,其表达异常增高可能是卵巢癌发生发展的重要分子机制。

B类1型清道夫受体表达调控与信号转导通路

B类1型清道夫受体(scavenger receptor class Btype1,SR-B1)是一种与清道夫受体CD36具有高度同源性的膜糖蛋白,其表达相对广泛且有着众多生物学作用.体内外多种因素可从转录或转录后水平对SR-B1表达进行调控:PPARα/γ激动剂、部分LXR激动剂、LH/HCG、雌激素等能上调SR-B1的表达;维生素E、INFα、脂多糖、IGF-1、胆酸、PXR激动剂及高糖水平等能下调SR-B1的表达;而血管紧张素Ⅱ则可对SR-B1的表达进行双向调节,且它们具体的调节机制复杂.SR-B1作为一种具有多配体结合特性的膜受体,不同配体与其结合后可介导细胞内不同信号事件及生物学效应,如介导HDL激活细胞内PI3K/Akt及MAPK信号途径,增加内皮型一氧化氮合酶的磷酸化、促进内皮细胞迁移与内皮重构.此外,非HDL类配体如LDL激活p38MAPK途径、凋亡细胞、血清淀粉样蛋白A等激活胞内MAPK途径均可由SR-B1介导.本文对近年来B类1型清道夫受体表达调控机制及信号转导通路的相关研究进行综述.