针刺对大鼠局部筋膜和脊髓细胞外信号调节激酶1/2和P38丝裂酶原活化蛋白激酶信号通路的影响

目的:观察针刺捻转拉伸大鼠皮下筋膜对局部筋膜和脊髓背角细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和丝裂原活化蛋白激酶P38(P38MAPK)信号通路的影响及筋膜结缔组织的形态学变化。方法:20只SD大鼠通过随机分组,每组5只,针刺后三里组和针刺非穴位组进行手针捻转,拉伸刺激组进行拉伸刺激,采用免疫组化技术观察筋膜和脊髓组织中细胞信号蛋白的变化;利用相差显微镜观察拉伸刺激组局部皮下筋膜形态学变化。结果:组织学改变:拉伸刺激组皮下筋膜的纤维以拉伸点为中心呈向心性分布,单位面积内细胞密度增大,细胞骨架和胞核重构成"扁梭形"。细胞信号蛋白变化:针刺组筋膜结缔组织ERK1/2和P38MAPK表达与对照组相比均有增加,但以非穴组增加显著;ERK1/2与P38MAPK在脊髓中的表达位置由胞质转向胞核,ERK1/2与空白对照组相比差异没有显著性意义;P38MAPK的表达有所增加。结论:针刺对局部浅筋膜的ERK1/2和P38有上调作用,但与脊髓中的信号蛋白增加幅度并不完全一致,提示筋膜结缔组织支架可能在微观的信号转导层面对局部细胞分化与增殖具有促进作用。

体内外不同环境下成纤维细胞丝裂素原激活蛋白激酶的变化

目的:观察脱离体内环境因素时成纤维细胞中信号蛋白表达及细胞生物学特性的变化。方法:瘢痕疙瘩和正常皮肤(作为阴性对照)均来自北京大学第三医院成形科手术患者各6例。取小块瘢痕疙瘩和正常皮肤组织,用组织块接种法进行成纤维细胞原代培养后,进行细胞传代。试验所用为第5～8代细胞。①评价信号蛋白的含量,用体外培养的瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞中p44/42丝裂原活化蛋白激酶和磷酸化的p44/42丝裂原活化蛋白激酶的积分吸光度值。②评价信号蛋白的活化强度,用体外培养的瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞中p44/42丝裂原活化蛋白激酶和磷酸化的p44/42丝裂原活化蛋白激酶的平均积分吸光度值。③评价信号蛋白的活化程度用活化率值(磷酸化的p44/42丝裂原活化蛋白激酶积分吸光度值÷p44/42丝裂原活化蛋白激酶积分吸光度值)。结果:①p44/42丝裂原活化蛋白激酶和磷酸化的p44/42丝裂原活化蛋白激酶平均积分吸光度值比较:瘢痕疙瘩成纤维细胞均低于正常皮肤成纤维细胞(0.023±0.005和0.025±0.005,0.030±0.000和0.042±0.004,P<0.05)。②p44/42丝裂原活化蛋白激酶和磷酸化的p44/42丝裂原活化蛋白激酶积分吸光度值比较:瘢痕疙瘩成纤维细胞p44/42丝裂原活化蛋白激酶高于正常皮肤成纤维细胞(6048.7±1576.2,3006.3±174.4,P<0.05),瘢痕疙瘩成纤维细胞磷酸化的p44/42丝裂原活化蛋白激酶与正常皮肤成纤维细胞无差异(4876.0±895.8,3966.5±533.1,P>0.05)。③p44/42丝裂原活化蛋白激酶和磷酸化的p44/42丝裂原活化蛋白激酶活化率比较:瘢痕疙瘩成纤维细胞低于正常皮肤成纤维细胞(0.830±0.134,1.319±0.156,P<0.05)。结论:成纤维细胞在脱离生物体内环境后,其生物学特性发生改变。体外细胞培养中,磷酸化的p44/42丝裂原活化蛋白激酶的表达水平在瘢痕疙瘩和正常皮肤成纤维细胞间无明显差别,而p44/42丝裂原活化蛋白激酶的活化程度和活化强度在正常皮肤成纤维细胞明显高于瘢痕疙瘩成纤维细胞。

燃煤污染型砷中毒患者外周血中丝裂酶原活化蛋白激酶信号通路相关基因mRNA转录表达情况

目的 检测燃煤污染型砷中毒患者外周血淋巴细胞中丝裂酶原活化蛋白激酶（MAPK）中ERK1、ERK2、JNK1、P38基因mRNA的转录表达情况.方法 2006年12月在贵州省燃煤型砷中毒病区兴仁县交乐村选择燃煤污染型砷中毒患者70例,其中轻、中、重度患者分别为31、25、14例,同时选取12 km以外有相似生活习惯、无燃用高砷煤史、经健康体检无异常、年龄性别匹配的大果朵村村民30名作为对照组.检测环境介质、粮食和观察对象尿、发中砷含量；采集外周血,Trizol法提取外周血淋巴细胞中总RNA,反转录获得cDNA.采用实时荧光定量PCR（QT-PCR）检测外周血淋巴细胞中MAPK信号通路中相关基因（ERK1、ERK2、JNK1、P38）mRNA转录表达.结果 燃煤型砷中毒病区环境介质中室内空气、室外空气、煤、辣椒和玉米中砷含量[中位数（四分位数）]分别为0.079（0.053 ～0.117） mg/m3、0.007（0.002～0.015） mg/m3、93.010（39.460 ～ 211.740） mg/kg、3.460（0.550～ 16.760）mg/kg和1.500（0.300 ～4.140） mg/kg,均超出国家卫生标准.土壤、大米和饮用水中砷含量分别为12.130（4.230 ～24.820）、0.650 （0.300～0.980）和0.043 （0.012～0.089） mg/kg,砷含量均在国家卫生参考标准之内.与对照组[（26.97±9.71）μg/g肌酐]相比,燃煤污染型砷中毒患者尿砷含量[（71.48±22.74）μg/g肌酐]较高,差异有统计学意义（F=90.38,P＜0.01）；与对照组[（1.58±1.07） μg/g]相比,砷中毒患者发砷含量[（4.45±2.78） μg/g]增高,差异有统计学意义（F =48.22,P＜0.01）；砷中毒患者外周血淋巴细胞中ERK2、JNKl mRNA相对表达量[中位数（四分位数）]分别为0.0667（0.0378 ～0.1371）、0.0013 （0.0009～0.0025）,低于对照组[0.1744（0.1009 ～0.1985）和0.0022（0.0017 ～0.0030）],差异有统计学意义（x2值分别为15.10,14.25,P＜0.01）.轻、中、重度砷中毒患者外周血淋巴细胞中ERK2mRNA相对表达量分别为0.0818（0.0408 ～0.1509）、0.0582（0.0154～0.1699）、0.0588（0.0399～0.1034）,低于对照组0.1744 （0.1099～0.1985）,差异有统计学意义（Z值分别为-2.89,-3.19,-2.67,P＜0.01）；JNKl mRNA相对表达量分别为0.0012（0.0007～0.001 57）、0.0019 （0.0011 ～0.0035）、0.0013（0.0010 ～0.0026）,与对照组0.0022（0.0017～0.0030）相比,轻度组表达量减少,差异有统计学意义（Z=-3.72,P＜0.01）.结论 砷可致中毒患者外周血淋巴细胞中MAPK信号通路中ERK2和JNK1 mRNA转录水平发生改变,表明MAPK信号通路参与了燃煤污染型砷中毒的发生和发展过程.

乙型肝炎病毒X蛋白对肝癌细胞MKK3,p38MAPK表达的影响

目的:观察乙型肝炎病毒X蛋白对肝癌细胞中丝裂原活化蛋白激酶(MKK3)及其下游分子p38丝裂酶原活化的蛋白激酶(p38MAPK)的表达的影响,探讨相关的信号转导机制,及其对肝癌细胞生物学行为的影响。方法:分别将质粒pCDNA3.1及pCDNA3.1-HBx重组质粒经脂质体介导转染人肝癌细胞株HepG2,G418筛选培养,并用反转录PCR和Western blot鉴定,获得表达X蛋白的稳定细胞株HepG2-HBx和阴性对照细胞株HepG2-pCDNA3.1,以HepG2细胞株作空白对照。通过RT-PCR和Western blot检测上述三种细胞株中MKK3,p38MAPK在mRNA水平和蛋白水平的表达变化,并用细胞免疫荧光法检查磷酸化p38MAPK蛋白在细胞浆及细胞核中的变化;通过MTT实验检测三种细胞株的增殖情况。采用SPSS 12软件进行统计学分析。结果:MKK3在mRNA和总蛋白水平的表达在HepG2-HBx中均高于其他两组,其他两组无明显差异;p38MAPK在mRNA和总蛋白水平三组无明显差异,而其蛋白磷酸化水平和在核蛋白中的表达在HepG2-HBx中较其他两组升高;HepG2-HBx较其他两组细胞有更强的增殖能力。结论:HBx可以通过上调肝癌细胞中MKK3的表达,促进p38MAPK磷酸化和入核,从而进一步激活下游分子发挥生物活性。p38MAPK通路在HBx促进肝癌细胞的增殖中发挥重要作用。可能是导致HBV相关性肝癌与非HBV相关性肝癌临床特点及肿瘤生物学差异的机制之一。

丙戊酸钠对肺癌细胞MICA蛋白表达的影响及其信号转导机制

目的研究丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)作为组蛋白去乙酰酶抑制剂对肺癌A549细胞人类MHCⅠ类分子链相关基因A(human MHC classⅠchain-related A,MICA)蛋白表达的影响,并初步探讨其信号转导机制。方法使用不同浓度的VPA刺激处于对数生长期的肺癌A549细胞,培养24h后使用RT-PCR法检测肺癌A549细胞MICA mRNA水平,Western blot法检测MICA蛋白水平,得出最佳VPA刺激浓度。分别以丝裂素活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路的3条主要通路抑制剂即ERK1/2抑制剂(PD98059)、p38蛋白激酶抑制剂(SB203580)、JNK抑制剂(SP600125)预处理A549细胞,再将VPA依照预定最适浓度分别加入培养24h。使用RTPCR法检测A549细胞MICA mRNA水平,Western blot法检测MICA蛋白水平。使用ELISA法检测上述各组A549细胞培养上清液中分泌型MICA(sMICA)蛋白水平。结果 RT-PCR及Western blot检测结果显示加入VPA后A549细胞中MICA mRNA转录水平、MICA蛋白水平均显著升高(均P<0.05);使用p38蛋白激酶抑制剂SB203580、ERK1/2抑制剂PD98059预处理,均能显著减弱VPA诱导的A549细胞MICA mRNA及蛋白水平的提高(P<0.05);各组细胞培养上清液中sMICA浓度无差异。结论 VPA能增强肺癌A549细胞MICA蛋白的表达,其机制可能与ERK、p38信号通路有关。

miR-143-3p可能经MAPK7途径抑制食管癌细胞的增殖、迁移与侵袭

目的:探讨miR-143-3p通过MAPK7途径对抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:采用脂质体转染法转染miR-143-3p拟似物(拟似组)、阻遏物(阻遏组)和阴性对照物(阴性组)至ECA109细胞,荧光实时定量PCR法检测细胞内miR-143-3p含量,MTT法检测细胞增殖活性,Transwell小室法检测miR-143-3p细胞侵袭,观察裸鼠成瘤质量和瘤内MAPK7表达。结果:miRNA-143-3p表达12、24、48、72h时空白组和阴性组细胞内miRNA-143-3p表达相比较差异无统计学意义(P>0.05),均低于阻遏组,高于拟似组,差异均有统计学意义(P<0.05);空白组和阴性组24、48、72h时ECA109细胞增殖水平相比较差异均无统计学意义(P>0.05),均高于拟似组,低于阻遏组,差异均有统计学意义(P<0.05);空白组和阴性组ECA109细胞侵袭能力相比较差异均无统计学意义(P>0.05),均高于拟似组,低于阻遏组,差异均有统计学意义(P<0.05);空白组和阴性组裸鼠瘤重量均高于拟似组,低于阻遏组,差异均有统计学意义(P<0.05),空白组和阴性组裸鼠瘤重量相比较差异无统计学意义(P>0.05);空白组和阴性组裸鼠瘤组织MAPK7蛋白表达水平相比较差异无统计学意义(P>0.05),均高于拟似组,低于阻遏组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miRNA-143-3p表达异常是影响食管癌增殖侵袭的重要因素,MAPK7信号通路可能是其发挥作用的重要途径,详细机制尚有待进一步研究探讨。

P38MAPK信号通路与uPA在卵巢癌细胞及组织中表达的相关性

背景与目的:P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 mitogen-activated protein kinase,P38MAPK)信号通路参与多种肿瘤的发生、发展和转移过程,尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator,uPA)在肿瘤浸润和转移中发挥着重要作用。本实验研究卵巢癌组织中P38MAPK、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(serine threonine kinase,AKT)及uPA的表达与临床病理特征的关系,并分析上述蛋白与u PA表达的相关性,探讨P38MAPK信号通路与uPA在卵巢癌细胞及组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学法检测49例卵巢癌组织中u PA、P38MAPK、ERK和AKT蛋白的表达,采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测不同卵巢癌细胞系HO8910、HO-8910PM、SKOV3和CAOV3中uPA和P38MAPK蛋白的表达,使用特异性抑制剂SB203580阻断P38MAPK信号通路后检测u PA蛋白表达水平的变化。结果:uPA、P38MAPK、ERK和AKT蛋白在卵巢癌组织中的表达阳性率分别为61.22%、57.14%、53.06%和55.10%。uPA蛋白的表达与P38MAPK呈正相关(r=0.865,P=0.001),且与卵巢癌组织的临床病理分期(P=0.029)、分化(P=0.03)和转移程度(P淋巴=0.022,P大网膜=0.012)有关,而与患者的年龄(P=0.754)及组织学类型(P=0.652)无关。ERK、AKT蛋白的表达与卵巢癌淋巴结转移(PERK=0.011,PAKT=0.022)和大网膜转移(PERK=0.006,PAKT=0.000)有关,而与患者的年龄(PERK=0.000,PAKT=0.022)、组织类型(PERK=0.771,PAKT=0.245)及病理分期(PERK=1.000,PAKT=0.254)无关。卵巢癌细胞系HO-8910PM中uPA蛋白的表达水平明显高于HO8910、SKOV3和CAOV3细胞系,使用SB203580阻断P38MAPK信号通路后可降低uPA蛋白的表达,且随着SB203580浓度升高u PA蛋白表达水平逐渐降低。卵巢癌中P38MAPK及u PA蛋白的表达与卵巢癌的预后显著相关(Log-rank=3.897和11.044,P=0.048和0.001)。结论:卵巢癌组织中P38MAPK信号通路处于激活状态;P38MAPK信号通路的激活可上调u PA的表达,促进卵巢癌的恶性进展;P38MAPK信号通路和u PA可能在卵巢癌侵袭和转移的过程中发挥重要作用。P38MAPK和uPA蛋白有望成为卵巢癌预后评估的重要指标。

MAPK在疾病与组织损伤中的作用

丝裂酶原活化蛋白激酶(MAPK)是生物体内重要的信号转导系统之一。MAPK信号转导通路中3组分激活模件内的激酶,引发一系列的磷酸化级联反应,参与细胞的生长、发育、分裂、分化、死亡以及细胞间的功能等多种细胞过程。本文就MAPK信号转导通路的组成成分、调控方式和作用机制的研究现状作一综述,旨在为组织损伤程度和伤后时间推断的法医学研究提供参考资料。

巨噬细胞p38MAPK的激活与钙通道阻滞剂的关系

目的 探讨p38丝裂酶原活化蛋白激酶 (p38MAPK)在炎症反应细胞内的激活与细胞内第二信使—钙离子的关系。方法 分离大鼠腹腔巨噬细胞 (M) ,分为维拉帕米预处理组、SB2 0 35 80预处理组及对照组 ,再予内毒素 (LPS)刺激 ,观察细胞内磷酸化p38的变化及细胞上清液中肿瘤坏死因子 (TNF -α)含量的变化。结果 LPS处理后M中p38磷酸化水平较高 ,而SB2 0 35 80预处理组细胞内p38磷酸化水平明显低于对照组 (P <0 0 1) ,维拉帕米预处理组细胞内p38磷酸化水平与对照组相比无明显差异 (P >0 0 5 )。维拉帕米预处理组和SB2 0 35 80预处理组细胞上清液中TNF -α的含量均明显低于对照组。结论 钙通道阻滞剂维拉帕米可明显减少LPS刺激后MTNF -α的产生 (P <0 0 1) ;维拉帕米预处理组的M经LPS刺激后 ,磷酸化p38仍有较高水平的表达 ,提示细胞内钙离子并未参与p38的磷酸化过程。

mapk信号通路与缺血再灌注损伤关联性的研究

丝裂原活化蛋白激酶（MAPK3）是一种胞浆内广泛分布的含有丝氨酸和（或）苏氨酸残基的蛋白激酶，在真核细胞中，有4条信号转导通路，即细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）P42／F44通路、c-Jun氨基末端激酶（JNK）和（或）应激活化蛋白激酶（SAPK）通路、P38通路和ERKS／大丝裂原活化蛋白激酶I（BMK1）通路，它们通过转录因子磷酸化而改变基因的表达水平，参与细胞的生长、增殖、分化、死亡及细胞间的功能同步等多种生理病理过程。缺血再灌注损伤使细胞膜受体和其他感应分子激活细胞内的MAPK信号通路，产生一系列应答反应。本文就MAPK信号转导通路的组成成分、调控方式和作用机制的研究现状作一综述，旨在为缺血再灌注损伤在不同器官的表现提供参考资料。

桦木酸通过抑制P38 MAPK磷酸化减轻横纹肌溶解致急性肾损伤

目的:探讨P38丝裂酶原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinases,MAPK)在横纹肌溶解致急性肾损伤中的变化和作用,以及桦木酸的干预效应。方法:将40只Wistar大鼠随机分为五组:正常对照组(C,n=8),AKI组(A,n=8),AKI+桦木酸组(AB,n=8),AKI+SB203580组(AS,n=8),AKI+桦木酸+SB203580组(ABS,n=8)。通过后肢甘油肌注法建立横纹肌溶解致急性肾损伤模型。AB、AS组分别给予腹腔注射桦木酸和SB203580,ABS组两药合用。24小时后,生化分析仪检测血肌酐、尿素、肌酸激酶水平;HE染色观察肾脏病理变化;Western blot法检测肾组织pP38 MAPK、P38 MAPK和cleaved Caspase-3表达;ELISA法检测肾组织TNF-α和IL-6水平。结果:甘油肌注后,肾脏出现急性损伤,pP38/P38比值升高。BA和SB203580干预后pP38/P38比值降低。在本实验剂量下,BA干预组的肾功能指标、病理损伤评分、细胞凋亡、IL-6水平和pP38/P38比值均低于SB203580干预组,而TNF-α水平基本一致。BA+SB203580干预组的总体治疗效果与BA组相比无明显差异。结论:在横纹肌溶解致急性肾损伤中,P38 MAPK被激活,使用SB203580抑制P38 MAPK的磷酸化可降低肌酐尿素水平,抑制肾脏炎症反应,减轻肾病理损伤和细胞凋亡。桦木酸至少部分通过抑制P38 MAPK磷酸化发挥肾脏保护作用。

石英致MAPK／cyclinD1-CDK4信号转导通路的活化

目的 探讨石英诱导的人胚肺成纤维细胞（HELF）中丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）／细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖激酶（cyclinD1-CDK4）信号转导通路的活化。方法 两种处理方式：（1）石英刺激细胞2h后，收获细胞；（2）石英长时间（2个月）作用于细胞，使细胞具有部分转化细胞的特征（S-HELF），检测信号蛋白因子和细胞周期的变化。分别采用Westernblot、免疫细胞化学和流式细胞术方法检测细胞内信号蛋白和细胞周期的改变。选用特异化学抑制剂或分子抑制剂抑制上游激酶，检测下游激酶的变化。结果 HELF暴露于石英粉尘2h后，可以导致MAPK家族中ERK1/2、p38和JNK1／2 3个亚家族的磷酸化水平升高。在SHELF中，只有细胞外调节蛋白激酶（ERK）和C4un氨基末端激酶[JNK1（p46）]较未处理的HELF磷酸化水平增高。而JNK2（p54）的磷酸化水平没有变化，p38的磷酸化水平反而下降。cyclinD1和CDK4蛋白在SHELF中较HELF中表达增多。抑制ERK和JNK活化或者抑制核转录因子活化蛋白1（AP-1）的活化后，S-HELF中cyclin D1和CDK4蛋白过表达得到控制。而抑制p38的活性不能改变cyclinD1和CDK4蛋白过表达。结论 石英刺激HELF2h后可诱导ERK、JNK和p38的活化，而SHELF中ERK、JNK活化，p38没有被活化。SHELF中，cyclinD1和CDK4蛋白质过表达与ERK、JNK和AP-1活化有关。

槲皮素对TNF-α诱导的乳鼠心肌成纤维细胞增殖及P38MAPK、HMGB1蛋白表达的影响

目的研究槲皮素对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的心肌成纤维细胞增殖及P38MAPK、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的影响。方法通过胰酶消化法和差速贴壁法获得纯化的心肌成纤维细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测心肌成纤维细胞的增殖,采用Western blot法测定P38MAPK、HMGB1蛋白的表达。结果槲皮素对基础状态下的心肌成纤维细胞的增殖无影响,但对TNF-α诱导的心肌成纤维细胞的增殖有抑制作用,且各组细胞的吸光度(A)值随槲皮素浓度的增加而减小(P<0.05),各组细胞P38MAPK、HMGB1蛋白表达随槲皮素浓度的增加而减弱(P<0.05)。结论槲皮素对TNF-α诱导的心肌成纤维细胞增殖有一定地抑制作用,其机制可能是通过P38MAPK信号通路抑制HMGB1的表达,参与抑制心肌成纤维细胞的增殖。

U0126对糖尿病全脑缺血大鼠海马区细胞外信号调节激酶1／2和Ku70表达的影响

目的探讨磷酸化细胞外信号调节激酶1／2（extracellularsignalregulatedkinase，ERKl／2）抑制剂U0126对糖尿病大鼠全脑缺血一再灌注后海马区ERKl／2和KuT0表达的影响。方法在河北联合大学神经外科中心实验室，采用链脲佐菌素诱导联合改良的Pulsineli4血管阻断（4一VO）法制作糖尿病全脑缺血一再灌注模型。80只雄性Sprague—Dawlley大鼠随机（随机数字法）分为假手术组（shamoperation，SO）、血糖正常全脑缺血一再灌注组（normoglycemiaischemia／reperfusion，NL／R）、糖尿病全脑缺血一再灌注组（diabetescerebralischemia，DCI）和DCI＋U0126干预组（尾静脉注射（0．01mg／kg）。各组分别在缺血1、6、24、48h取脑组织，HE染色检测海马区神经细胞形态变化；免疫组化法检测海马区磷酸化ERKl／2和Ku70表达水平。以SPSS17．0对实验数据进行统计分析，组间进行析因方差分析，P〈0．05为差异有统计学意义。结果与SO组比较，NI／R组大鼠海马区部分神经细胞出现变性坏死改变；磷酸化ERKl／2表达在1、6、24、48h显著增高（均P〈0．05）；Ku70表达在1h、6h显著增高（均P〈0．05），24、48h降低（均P〈0．05）；与NI／R组比较，DCI组脑组织形态结构损伤程度加重，1、6、24、48h磷酸化ERK1／2显著下降（均P〈0．05）；1、6、24、48hKu70显著下降（均P〈0．05）；与DCI组比较，DCI＋U0126组脑组织形态结构损伤程度加重，1、6、24、48h磷酸化ERK1／2显著下降（均P〈0．05）；1、6、24、48hKu70显著下降（均P〈0．05）。结论U0126通过抑制ERK1／2的激活、降低糖尿病全脑缺血大鼠海马区Ku70表达，加重对神经细胞有损伤作用。

HBV感染与原发性肝细胞癌组织MAPK信号通路蛋白表达水平的关联性

目的探究慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染与原发性肝细胞癌(PHC)病理特征及癌组织丝裂酶原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路蛋白表达的关联性。方法以2016年1月-2021年2月PHC患者78例为研究对象,根据HBV感染情况分为HBV感染组(n=41)及未感染组(n=37),比较不同Edmondson分级患者的HBV DNA载量及乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)定量;比较HBV感染组及未感染组癌组织、癌旁组织MAPK信号通路蛋白表达情况,分析HBV感染与病理特征及癌组织MAPK信号通路蛋白表达情况的关系,并分析PHC患者HBV DNA载量与癌组织MAPK信号通路蛋白表达情况的相关性。结果Edmondson分级Ⅲ级患者的HBV DNA载量及HBsAg、HBeAg定量均高于Ⅱ级患者,差异有统计学意义(t=3.022、3.319、4.934,P均<0.05);HBV DNA载量及HBsAg、HBeAg定量与Edmondson分级成正相关(r=0.440、0.289、0.430,P均<0.05);感染组及未感染组癌组织细胞外信号调节激酶(ERK)1、ERK2、p38的IOD值均大于癌旁组织,且感染组癌组织ERK1、ERK2的IOD值大于未感染组癌组织,差异有统计学意义(P<0.05);感染组及未感染组癌组织c-Jun N端激酶1(JNK1)的IOD值小于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);HBV感染是导致PHC癌组织ERK1蛋白表达量升高的危险因素(P<0.05);HBV感染的PHC患者HBV DNA载量与癌组织ERK1、ERK2、p38蛋白表达成正相关(r=0.580、0.609、0.439,P均<0.05)。结论PHC患者HBV DNA载量及HBsAg、HBeAg定量与Edmondson分级相关,且患者HBV DNA载量与癌组织ERK1、ERK2、p38蛋白表达水平相关。

光线性角化病和鳞状细胞癌表皮生长因子受体与MAPK信号通路的研究

目的探讨磷酸化ERKl／2、JNK和p38MAPK与其上游因子表皮生长因子受体（EGFR）及下游转录因子Elk-1在光线性角化病（AK）和皮肤鳞状细胞癌（scc）中的表达。方法收集确诊为AK和高、中、低分化SCC患者各30例的病变组织，同时收集30例非癌患者正常皮肤组织作为正常对照组。采用免疫组化及Western印迹法分别检测p-EGFR、P—ERKI~、P—JNK、P—p38MAPK及p—Elk-1蛋白在AK和不同分化程度SCC中的表达情况。结果P—EGFR在SCC组中的表达高于AK组及正常对照组（P〈0．05），AK组与正常对照组表达差异无统计学意义；P—ERKl／2、P—JNK、P—p38MAPK及p-Elk-1在SCC的表达均高于AK组及正常对照组（P〈0．05），且在AK中的表达又均高于正常对照组（P〈0．05）。除p-EGFR和p-Elk-1在高分化和中分化SCC中的表达差异无统计学意义，p-ERKl／2、P—JNK、P—p38MAPK随着SCC分化程度的降低，其表达逐渐增高（P〈0．05）。相关性分析显示，在SCC中p-EGFR的表达与p-ERKI~、P—JNK、P—p38MAPK的表达强度呈正相关（r=0．843、0．819、0．902，均P〈0．01），且p-Elk-1的表达与p-ERKl／2、P—JNK、P—p38MAPK的表达强度亦呈正相关（r=0．874、0．843、0．893，均P〈0．01）；在AK中P—EGFR的表达仅与P—p38MAPK的表达强度呈正相关（r=0．707，P=0．022）。结论p-EGFR、P—ERKI、P—JNK、P—p38MAPK及P—Elk-1蛋白在皮肤SCC中的表达与其病理分级有关。磷酸化EGFR--ERKI／2、JNK、p38MAPK---Elk-1信号转导途径可能在AK和SCC的发生发展中起作用。

p38α及β亚型对胰腺癌细胞生物学行为的影响

目的 观察p38亚型α和β对胰腺癌细胞生物学行为的影响。方法 Western blot实验检测人胰腺癌细胞株中p38α、p38β、p38γ、p38δ的表达;建立稳定转染靶向抑制p38α和p38β表达水平的细胞克隆,通过噻唑蓝(MTT)比色、克隆形成实验、运动轨迹、细胞侵袭、裸鼠体内成瘤等实验观察p38α和p38β对胰腺癌细胞增殖、生长、侵袭以及体内成瘤能力的影响。结果 p38 4个亚型在7种胰腺癌细胞株中有不同水平表达;选择性抑制p38α后,Mia Paca-2和Panc-1细胞增殖、运动和侵袭能力显著下降,且裸鼠体内成瘤实验可见肿瘤体积显著增加。选择性抑制p38β后,可以观察到细胞生长和增殖变慢,但未见运动和侵袭能力的变化。体内成瘤实验中,Mia Paca-2两个下调p38β细胞克隆成瘤率分别为18.3%和50.0%,较野生型和空质粒转染组显著下降,且肿瘤体积显著减小(P<0.05);Panc-1两个下调p38β细胞克隆成瘤率为25.0%和12.5%,较野生型和空质粒转染组显著下降(P<0.05)。结论 p38在胰腺癌细胞中表达,其亚型p38α和p38β对胰腺癌Mia Paca-2和Panc-1细胞生物学行为的影响存在不同作用。

依达拉奉对弥漫性脑创伤大鼠的保护作用

目的 观察依达拉奉（Edaravone）对弥漫性脑创伤后大鼠海马区p38丝裂酶原活化蛋白激酶/半胱氨酸蛋白酶-3（p38MAPK/Caspase-3）信号途径的影响,探讨依达拉奉的脑保护作用.方法 在河北省联合大学附属医院神经外科实验室应用Mamarou＇s法建立成年雄性Sprague-Dawlley大鼠弥漫性脑创伤模型,250只实验动物随机（随机数字法）分为对照组、模型组、低剂量依达拉奉治疗组（尾静脉注射给药,剂量5 mg/kg）,高剂量依达拉奉治疗组（尾静脉注射给药,10 mg/kg）.各组分别在伤后1,6,24,48,72 h取脑组织,尼氏染色检测海马区神经细胞组织形态变化;免疫印迹和免疫组化法检海马区磷酸化p38MAPK和Caspase-3的表达;伤后第3-7天应用水迷宫对大鼠学习记忆功能进行评定.SPSS 13.0对实验数据进行统计分析,组间进行重复设计方差分析,以P＜0.05为差异具有统计学意义.结果 与对照组比较,模型组大鼠海马区部分神经细胞出现变性坏死改变;磷酸化p38MAPK表达在1,6,24,48 h显著增高（P＜0.05）、72 h差异无统计学意义;Caspase-3表达在1 h差异无统计学意义（P＞0.05）,6,24,48,72 h增高（P＜0.05）;水迷宫测试中第3,4,5,6天动物搜索安全岛潜伏期延长（P＜0.05）,第7天穿越原平台位置的次数减少（P＜0.05）.与模型组比较,低剂量Edaravone干预组中,脑组织形态结构损伤程度减轻,1 h磷酸化p38MAPK表达下降不显著[（1.66±0.80） vs.（1.85±0.86）,P＞0.05],6,24,48 h显著下降（P＜0.05）;6,24,48,72 h Caspase-3表达显著降低（P＜0.05）;大鼠搜索安全岛潜伏期缩短（P＜0.05）,穿越原平台位置的次数增多[（4.17±1.15） vs.（2.28±1.18）,P＜0.05];高剂量Edaravone组上述指标变化则更为显著（P＜0.05）.结论 Edaravone抑制伤后p38MAPK信号途径的活化,降低Caspase-3表达,对脑创伤有保护作用.

MAPKs异常表达与中耳炎及胆脂瘤的关系

丝裂酶原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPKs）是生物细胞重要的信号转导系统之一。MAPKs信号转导通路激酶可引发一系列的磷酸化级联反应，介导多种刺激（如细菌产物、炎性细胞因子、化学应激、物理等）引起的细胞反应，并与细胞增殖、分化、转化及凋亡等密切相关。中耳炎症性疾病及中耳胆脂瘤形成是中耳最常见的病理改变，本文就以往有关研究MAPKs通路与中耳炎及胆脂瘤形成的相关文献进行综述。