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基于SYBR Green检测小麦黄花叶病毒的两步法qPCR
1
作者
刘成
铃木孝子
+8 位作者
佐久间俊
宋健民
李豪圣
刘爱峰
曹新有
韩冉
宫文萍
刘建军
小松田隆夫
《山东农业科学》
2016年第7期118-124,132,共8页
小麦黄花叶病毒病是其常发病,常造成严重减产。为建立可用于定量检测小麦黄花叶病毒(WYMV)拷贝数的q PCR方法,本研究对不同来源的WYMV小种序列进行比对分析,在序列保守区域设计引物11对,对其退火温度进行优化,进而建立各引物的q PCR...
小麦黄花叶病毒病是其常发病,常造成严重减产。为建立可用于定量检测小麦黄花叶病毒(WYMV)拷贝数的q PCR方法,本研究对不同来源的WYMV小种序列进行比对分析,在序列保守区域设计引物11对,对其退火温度进行优化,进而建立各引物的q PCR标准曲线。结果发现,11对引物的扩增效率在50.60%~116.04%之间,仅2对引物可用于后续研究,扩增效率分别为97.21%(WY-05和WY-06)和91.85%(WY-F2和WY-R2)。利用其中的WY-F2和WY-R2对高抗和高感WYMV的小麦品种进行分析,结果显示,抗感小麦品种WYMV拷贝数差异极显著。对抗感分离群体266个单株进行分析,发现该q PCR方法灵敏度显著高于酶联免疫吸附剂测定法,更适用于抗感杂交分离群体的表型鉴定,因而可以用于抗WYMV基因的遗传定位与图位克隆工作。
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关键词
小麦黄花叶病毒
两步法qpcr
酶联免疫吸附剂测定法
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职称材料
题名
基于SYBR Green检测小麦黄花叶病毒的两步法qPCR
1
作者
刘成
铃木孝子
佐久间俊
宋健民
李豪圣
刘爱峰
曹新有
韩冉
宫文萍
刘建军
小松田隆夫
机构
山东省农业科学院作物研究所/农业部黄淮北部小麦生物学与遗传育种重点实验室/小麦玉米国家工程实验室
日本国立农业生物资源研究所
北海道中央农业试验站
出处
《山东农业科学》
2016年第7期118-124,132,共8页
基金
日本农林水产省和学术振兴会项目(TRS1003、P11515)
国家现代农业产业技术体系专项(CARS-03-1-8)
+2 种基金
山东省农业科学院青年拔尖人才科研启动费(1-18-24)
泰山学者种业计划项目
山东省自主创新重大关键技术项目(2-5-68、1-5-12)
文摘
小麦黄花叶病毒病是其常发病,常造成严重减产。为建立可用于定量检测小麦黄花叶病毒(WYMV)拷贝数的q PCR方法,本研究对不同来源的WYMV小种序列进行比对分析,在序列保守区域设计引物11对,对其退火温度进行优化,进而建立各引物的q PCR标准曲线。结果发现,11对引物的扩增效率在50.60%~116.04%之间,仅2对引物可用于后续研究,扩增效率分别为97.21%(WY-05和WY-06)和91.85%(WY-F2和WY-R2)。利用其中的WY-F2和WY-R2对高抗和高感WYMV的小麦品种进行分析,结果显示,抗感小麦品种WYMV拷贝数差异极显著。对抗感分离群体266个单株进行分析,发现该q PCR方法灵敏度显著高于酶联免疫吸附剂测定法,更适用于抗感杂交分离群体的表型鉴定,因而可以用于抗WYMV基因的遗传定位与图位克隆工作。
关键词
小麦黄花叶病毒
两步法qpcr
酶联免疫吸附剂测定法
Keywords
Wheat yellow mosaic virus
Two-step real time quantitative PCR
Enzyme-linked immunosorbent assay
分类号
S435.121.49 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
基于SYBR Green检测小麦黄花叶病毒的两步法qPCR
刘成
铃木孝子
佐久间俊
宋健民
李豪圣
刘爱峰
曹新有
韩冉
宫文萍
刘建军
小松田隆夫
《山东农业科学》
2016
0
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