体外透析两步酶解法测定菜粕粗蛋白消化适宜酶促反应条件的建立

通过建立体外透析胃蛋白酶 胰酶制剂两步酶解法测定菜粕粗蛋白消化率的标准测定步骤及适宜酶促反应条件 ,并研究在所建立条件下测得菜粕粗蛋白体外与体内消化率间的相关关系。结果表明 ,建立适宜酶促反应条件为 :1g菜粕在 10mL胃蛋白酶溶液 (10mg·mL-1)、pH2 .0、37℃条件下水解 1h ,调至中性后转入透析袋内 ,再加入 10mL胰酶溶液 (4mg·mL-1) ,在 0 .0 1mol·L-1、pH 7.5、37℃磷酸缓冲溶液中水解 2 4h ,期间更换 5次缓冲液。菜粕干物质和粗蛋白体外消化率与相应回肠表观 (真 )消化率之间显著相关 (r=0 .86～ 0 .99) ,粗蛋白体外消化率与赖氨酸、苏氨酸回肠表观 (真 )消化率与蛋氨酸回肠表观消化率之间显著相关 (r=0 .80～ 0 .87)。

两步酶解法制备拟南芥保卫细胞原生质体

用两步酶解法提取拟南芥保卫细胞原生质体。首先使用作用比较缓和、浓度为0．8％的绿木酶Cellulysin 25℃，120r／min水浴振荡30min，促使原生质体游离出来；然后再使用1．5％的纤维素酶Cellulase RS和0．02％的果胶酶Y-23组成的酶解液，22℃，60-70r／min，酶解40～60min，制备拟南芥保卫细胞原生质体。结果表明，两步酶解法可以制备出活性较高、适于进行膜片钳等后续试验的原生质体。

利用包含乙酐酰化步骤的两步酶促裂解法转化DAC成为7-ACA

在头孢菌素C(CPC)(3)的精制过程中,CPC发酵液中脱乙酰头孢菌素C(DAC)(6)的存在一直是个棘手的问题。为了将其去除,需要增加特定的操作步骤。Wildfeuer注意到,在有大大过量的乙酐存在的情况下,水溶液中DAC的3’-羟基可被乙酰化。但不出所料,DAC侧链上的氨基也会被乙酰化,从而形成N-乙酰头孢菌素C。

单个人心房肌细胞的分离、鉴定及影响因素分析

目的探讨分离、鉴定单个人心房肌细胞的最佳方法及其影响因素。方法人心房肌组织取自5例先天性心脏病（PCHD）、8例冠心病（CHD）、15例瓣膜性心脏病（VHD）手术患者，采用两步酶解法分离制备心房肌细胞，光学显微镜下观察细胞形态，全细胞膜片钳技术记录乙酰胆碱敏感钾电流（Ik,Ach）情况。结果两步酶解法分离所得杆状、横纹清楚、折光性好、静止、贴壁良好的心肌细胞产率为30％～50％。PCHD记录Ik,Ach成功率最高（9／10个细胞），其次为CHD（6／10个细胞），VHD最低（3／10个细胞）。结论两步酶解法可用于人心房肌细胞的分离，全细胞膜片钳技术有助于细胞活性的鉴定，其分离数量和活性受酶解情况、年龄、病种等因素影响。

加工工艺对紫薯饮料淀粉转化率和花青素保留率的影响

以紫薯为原料采用两步双酶法制备紫薯饮料,研究双酶解过程中还原糖和淀粉含量的变化,采用邓肯氏新复极差法比较不同加工工艺对花青素稳定性的影响。结果表明:采用两步双酶法淀粉转化率可达到79.79%(一次糖化)或82.945%(二次糖化),解决了淀粉等大分子物质沉淀问题;两步酶解过程对花青素的稳定性存在显著性影响,最终产品中花青素的保留率为78.40%,含量为2.180 mg/100 m L。采用两步双酶法制备的天然低糖高花青素含量的紫薯饮料,甜度适宜,口感自然。