生命早期使用头孢曲松对小鼠后期糖脂代谢的影响及两歧双歧杆菌TMC3115的改善效果研究

目的探究生命早期使用头孢曲松和两歧双歧杆菌TMC3115(TMC3115)对小鼠后期糖脂代谢的影响以及TMC3115可能的改善作用。方法36只2周龄雌性BALB/c小鼠随机分为空白组、抗生素组和实验组(n=12),分别以生理盐水、头孢曲松(100mg/kg)、头孢曲松(100mg/kg)+TMC3115(含菌量为109CFU/d)持续灌胃至4周龄后停止灌胃,继续喂养至16周龄。最后一周测定空腹血糖并进行口服糖耐量实验,实验结束后测定血清和肝脏的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、血清空腹胰岛素水平,并计算内脏脂体比和胰岛素抵抗指数。结果各组间体重、血糖、糖耐量、血脂和胰岛素的结果无统计学差异(P>0.05);与空白组相比,抗生素组的卵巢脂体比、肠系膜脂体比和总脂体比分别上升45.5%、35.8%和39.1%(P<0.05),而实验组与抗生素组相比无统计学差异;抗生素组的肝脏TG和TC水平与空白组相比分别升高44.4%和6.5%,而实验组的肝脏TG与抗生素组相比降低28.4%(P<0.05)。结论生命早期头孢曲松干预可引起小鼠后期脂体比和肝脏甘油三酯增加,而TMC3115可能有一定的改善作用。

两歧双歧杆菌TMC3115冻干菌粉生产工艺优化

为制备高活性两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)TMC3115冻干菌粉,对培养基初始pH值和初始接种量进行研究,同时对不同碳源和氮源进行初步筛选,进而以发酵16 h发酵液pH值、光密度和活菌数为评价指标,通过正交试验对碳源和氮源组合进行筛选。考察18种冻干保护剂对两歧双歧杆菌TMC3115的冻干保护效果,并通过正交试验确定复合冻干保护剂配方。结果表明:两歧双歧杆菌TMC3115在培养基初始pH值7.2、接种量4%时所得发酵液活菌数最高;两歧双歧杆菌TMC3115发酵培养基配方为葡萄糖添加量25 g/L、胰酪蛋白胨20 g/L、酵母蛋白胨10 g/L、酵母浸粉FM90215 g/L、柠檬酸氢二铵2 g/L、无水乙酸钠5 g/L、磷酸氢二钾2 g/L、吐温-801 g/L、硫酸镁0.58 g/L、硫酸锰0.25 g/L、L-半胱氨酸盐酸盐0.5 g/L;最佳冻干保护剂配方为:脱脂乳添加量12%、海藻糖12%、丙三醇1.2%、谷氨酸钠0.6%、L-半胱氨酸盐酸盐0.15%,此条件下,两歧双歧杆菌TMC3115冻干粉活菌数达到4.26×1011 CFU/g。

妊娠期母体使用抗生素和益生菌对后代小鼠肠道发育和肠道菌群的影响

目的 探究妊娠晚期使用头孢曲松和两歧双歧杆菌TMC3115对断乳期小鼠肠道上皮组织发育及肠道菌群构建的影响。方法 24只妊娠10~13 d BALB/C小鼠随机分为对照组、头孢曲松组和TMC3115组(n=8)。妊娠期小鼠分别每日用生理盐水、头孢曲松(30 mg/d)、TMC31115菌悬液(含菌量为109 CFU/d)灌胃至分娩,新生小鼠由母鼠母乳喂养至断乳期(PND21)。采用HE染色观察小鼠结肠绒毛和隐窝深度;RT-PCR法检测各组小鼠肠道上皮组织发育相关蛋白(Ki67、Muc2)和紧密连接蛋白(ZO-1、Claudin-1、Claudin-2、Occludin)表达;二代测序法分析小鼠肠道菌群组成。结果 和对照组和头孢曲松组相比,TMC3115组小鼠的结肠隐窝深度、KI67 mRNA表达量显著(P<0.05)升高。TMC3115组小鼠紧密连接蛋白Occludin mRNA表达量也显著高于对照组(P<0.05)。对照组和TMC3115组肠道菌群中厚壁菌门相对丰度,头孢曲松组拟杆菌门相对丰度最高。和头孢曲松组相比,TMC3115组厚壁菌门和乳杆菌属相对丰度显著升高(P<0.05),梭菌属和肠球菌属相对丰度明显减少(P<0.05)。结论 妊娠期头孢曲松干预对子代肠道发育无明显影响,但能显著破坏子代肠道菌群结构,以潜在致病菌肠球菌属、梭菌属等增加为特征;而TMC3115干预能显著增加肠道厚壁菌门和乳杆菌属并促进肠道组织发育和屏障功能。