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题名大肠杆菌染色体上严谨型启动子的构建
被引量:1
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作者
仇焕娜
赵东东
满淑丽
毕昌昊
朱欣娜
张学礼
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机构
天津科技大学生物工程学院
中国科学院天津工业生物技术研究所
中国科学院系统微生物工程重点实验室
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出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第8期1693-1704,共12页
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基金
国家自然科学基金(31770059
31300089)~~
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文摘
【背景】启动子的渗漏表达是代谢工程和合成生物学较为关注的问题,探索严谨型启动子使之能像开关一样控制基因的表达有助于解决这一问题。【目的】为避免在质粒上研究启动子带来的弊端,本研究将在染色体上对严谨型启动子进行构建和评价。【方法】基于4种调控元件四环素tetO、乳糖lacO、阿拉伯糖araC和鼠李糖rhaR的序列,以及2种来源的启动子PL和Plac序列,设计和组合构建了6个启动子PtetO2、PtetO3、PlacO2、PlacO3、PlacO+ara和PlacO+rha。应用CRISPR/Cas9系统将这6个启动子序列整合到大肠杆菌ATCC 8739染色体上,利用绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)的表达,分析这6个启动子的相对表达强度和严谨型控制情况。【结果】GFP表达分析显示,启动子PlacO+rha为最佳严谨型启动子,在无诱导剂时表达为0.02,有诱导剂时最大表达强度为lac Z基因启动子的12倍,相对控制范围为600倍。【结论】研究结果将为代谢工程和合成生物学中的精确调控基因表达奠定良好的应用基础。
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关键词
严谨型
启动子
绿色荧光蛋白
大肠杆菌
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Keywords
Tight regulation
Promoter
Green fluorescent protein
Escherichia coli
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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题名你属于哪一种交往类型
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出处
《医学心理指导》
2004年第5期40-40,共1页
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关键词
交往类型
心理测试
人际交往
严谨型
领袖型
随从型
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分类号
C913
[经济管理]
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