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严重急性呼吸综合征冠状病毒2膜蛋白对宿主细胞pre-mRNA 3'UTR加工的影响 被引量:1
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作者 欧阳歆 曾先燕 +7 位作者 谷斌 娄哲琦 黄进 谭正宗 于倩 车雨 钱昱舟 朱勇 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1866-1873,共8页
目的研究严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)膜蛋白对宿主细胞mRNA前体(pre-mRNA)3’非翻译区(UTR)加工的影响。方法本研究以人肺上皮细胞系A549为模型,利用瞬时转染在细胞内过表达SARS-CoV-2膜蛋白;利用RNA-Seq测序技术及生物信... 目的研究严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)膜蛋白对宿主细胞mRNA前体(pre-mRNA)3’非翻译区(UTR)加工的影响。方法本研究以人肺上皮细胞系A549为模型,利用瞬时转染在细胞内过表达SARS-CoV-2膜蛋白;利用RNA-Seq测序技术及生物信息学分析方法,系统性描绘宿主细胞选择性多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation,APA)事件;Metascape数据库对发生显著APA变化的基因进行功能富集分析;RT-qPCR验证靶基因3’UTR长度变化;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测目的蛋白表达水平。结果SARS-CoV-2膜蛋白外源表达后宿主细胞内共813个基因发生显著APA变化。GO和KEGG分析显示,差异APA基因广泛参与有丝分裂细胞周期、调节细胞应激等生物过程,涉及病毒感染和蛋白质加工等。从中进一步筛选出AKT1基因,在IGV软件中显示3’UTR延长;RT-qPCR验证AKT1基因的3’UTR长度变化趋势;Western blot结果显示AKT1蛋白磷酸化水平增加。结论SARS-CoV-2膜蛋白潜在影响宿主pre-mRNA的3’UTR加工,其中参与多种病毒性生物过程的AKT1基因3’UTR延长,且其编码的蛋白质功能在细胞内被激活。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2膜蛋白 选择性多聚腺苷酸化 PRE-MRNA 3’非翻译区
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染后突发性耳聋发生机制研究进展
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作者 陈晓奉 谢兰丰 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期150-153,共4页
严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒感染(COVID-19)传播迅速,影响范围广,除了肺部并发症外还包括突发性耳聋。然而,其病理机制尚不清楚。可能的机制包括:病毒直接侵入并损伤耳蜗神经或耳蜗组织;耳蜗微血管血栓... 严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒感染(COVID-19)传播迅速,影响范围广,除了肺部并发症外还包括突发性耳聋。然而,其病理机制尚不清楚。可能的机制包括:病毒直接侵入并损伤耳蜗神经或耳蜗组织;耳蜗微血管血栓形成并导致耳蜗血管阻塞;病毒引起细胞因子风暴,导致耳蜗炎症。研究SARS-CoV-2作为突发性感音神经性听力损失病因的作用,可能为疾病的早期诊断、制定治疗策略以最大限度地提高临床恢复和避免不良反应提供机会。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 突发性感音神经性听力损失 发生机制 临床意义
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布地奈德/福莫特罗粉吸入剂联合复方甲氧那明治疗急性呼吸综合征冠状病毒-2感染亚急性咳嗽的临床疗效分析
3
作者 倪孔守 费英明 +1 位作者 王汝团 矫捷 《福建医科大学学报》 2024年第4期263-265,共3页
目的回顾性分析信必可都保[布地奈德/福莫特罗粉吸入剂(Ⅰ)=320μg/9.0μg]联合阿斯美(复方甲氧那明)治疗急性呼吸综合征冠状病毒-2(SARS-COV-2)感染后亚急性咳嗽的临床疗效。方法收集2022年12月—2023年6月确诊的SARS-COV-2(Omicron BA... 目的回顾性分析信必可都保[布地奈德/福莫特罗粉吸入剂(Ⅰ)=320μg/9.0μg]联合阿斯美(复方甲氧那明)治疗急性呼吸综合征冠状病毒-2(SARS-COV-2)感染后亚急性咳嗽的临床疗效。方法收集2022年12月—2023年6月确诊的SARS-COV-2(Omicron BA.5.2、BF.7感染)亚急性咳嗽患者220例,分为观察组和对照组,每组各110例。观察组给予信必可都保吸入(1吸/次,2次/日),阿斯美口服(2粒/次,3次/日);对照组给予咳必清、酮替芬和孟鲁司特钠三联药物常规止咳、平喘对症治疗。采用咳嗽程度评分表(CET)观察并记录治疗后第3、5、7天咳嗽缓解情况,检测呼出气一氧化氮(FeNO),并进行疗效评价。结果治疗后第3、5、7天患者的CET评分、FeNO值均较前下降。观察组临床控制86例,显效11例,有效9例,无效4例,总有效率96%;对照组临床控制68例,显效17例,有效13例,无效12例,总有效率89%。2组的总有效率比较,差别有统计学意义(P<0.05)。结论信必可都保和阿斯美联合治疗SARS-COV-2(Omicron BA.5.2、BF.7感染)亚急性咳嗽,可明显改善患者的咳嗽症状。 展开更多
关键词 布地奈德/福莫特罗粉吸入剂 复方甲氧那明 联合治疗 急性呼吸综合征冠状病毒-2 咳嗽 咳嗽程度评分表
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2型4种结构蛋白特性分析
4
作者 李雪 任林柱 《中国动物检疫》 CAS 2020年第10期92-98,共7页
为深入了解严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)S、M、E、N蛋白的分子生物学特征和基本结构特征,选取S、M、E、N蛋白序列进行生物信息学分析和预测,使用DNAstar、SignalP、TMHHM、PSORT Prediction、BUSCA和ABCpred软件,分析并... 为深入了解严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)S、M、E、N蛋白的分子生物学特征和基本结构特征,选取S、M、E、N蛋白序列进行生物信息学分析和预测,使用DNAstar、SignalP、TMHHM、PSORT Prediction、BUSCA和ABCpred软件,分析并相互验证4种蛋白的结构域特征和S蛋白的潜在B细胞抗原表位,结果预测出了4种结构蛋白的功能结构域,并分析预测出S蛋白潜在的B细胞抗原表位为25~29、75~81、112~116、148~152、773~779 aa。研究结果可为SARS-CoV-2相关的分子生物学和结构生物学研究提供参考,并为疫苗开发等提供理论依据。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2) 结构蛋白 结构域特征 抗原表位 生物信息学分析 分子生物学
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靶向严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2的人工microRNAs设计与思考
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作者 高之煜 曹鑫艳 +8 位作者 顾兰英 范文雨 张镱娴 杜非凡 曹继睿 蒋松 盛金良 孙延鸣 张彦兵 《畜牧兽医科技信息》 2024年第4期59-62,共4页
动植物人工miRNAs(artificial miRNAs,amiRNAs)在抗病毒感染中发挥重要作用。然而,有关amiRNAs靶向抑制重症急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)的相关研究未见报道。目的:本研究旨... 动植物人工miRNAs(artificial miRNAs,amiRNAs)在抗病毒感染中发挥重要作用。然而,有关amiRNAs靶向抑制重症急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)的相关研究未见报道。目的:本研究旨在设计靶向SARS-CoV-2的amiRNAs,进一步分析amiRNAs对不同变异株的匹配程度。方法:利用Invitrogen Block-iT RNAi Designer成功设计靶向SARS-CoV-2的amiRNAs。结果:分别命名为amiR-Cov23utr-1、2、3、4;其中amiR-Cov23utr-1、3和4在Omicron BA.5/2022中靶向区域序列十分保守;amiR-Cov23utr-2在Omicron BA.5/2022中的靶点缺失。结论:本研初步设计和分析了靶向SARS-CoV-2的amiRNAs,为后续深入研究amiRNAs抗SARS-CoV-2感染提供了重要基础资料。 展开更多
关键词 重症急性呼吸综合征冠状病毒2 靶向 人工microRNAs 病毒 3′非翻译区
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严重急性呼吸道综合征冠状病毒包膜蛋白的研究
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作者 唐小龙 江振友 +2 位作者 蔡淑玉 周昕 张荣波 《热带病与寄生虫学》 2004年第2期110-113,126,共5页
2002年11月以来,中国大陆、中国香港和台湾地区等地先后经历一次严重急性呼吸道综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)感染的流行,由于其传播快,病情凶险,病死率高,又是新发现的传染病,目前世界上尚... 2002年11月以来,中国大陆、中国香港和台湾地区等地先后经历一次严重急性呼吸道综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)感染的流行,由于其传播快,病情凶险,病死率高,又是新发现的传染病,目前世界上尚不清楚其真正的传染源,未明确其确实的传播途径;还不完全清楚其致病和机体对其免疫的机制;尚未开发出可靠的疫苗,也未找到特效的治疗药物.因此研究SARS-CoV结构蛋白的结构及其功能,对研究其入侵宿主细胞机制、开发特异性抗SARS药物和疫苗等具有十分重要的意义.现就SARS-CoV基因组所编码的S、M、E和N等主要结构蛋白的研究现状作一综述. 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 病毒膜蛋白 2002年11月 SYNDROME 新发现的传染病 acute 中国大陆 冠状病毒 台湾地区 中国香港 SARS 传播途径 治疗药物 病死率 传染源
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严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒核蛋白的鉴定与分析 被引量:7
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作者 周世力 卫灿东 +7 位作者 熊朝晖 段淑敏 李德新 王建伟 冷文川 梁米芳 金奇 侯云德 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期100-103,共4页
利用蛋白质组学技术,对纯化的严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒颗粒所含核蛋白进行初步分离与鉴定。质谱分析结果最终表明,SARS冠状病毒核蛋白的分子量位于47kD与52kD之间,所获得的SARS冠状病毒核蛋白的质谱分析数据覆盖了所预测病毒... 利用蛋白质组学技术,对纯化的严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒颗粒所含核蛋白进行初步分离与鉴定。质谱分析结果最终表明,SARS冠状病毒核蛋白的分子量位于47kD与52kD之间,所获得的SARS冠状病毒核蛋白的质谱分析数据覆盖了所预测病毒核蛋白氨基酸序列的87%,且符合率为100%。从而首次从蛋白质水平对SARS冠状病毒核蛋白的氨基酸序列进行了证实。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 SARS 冠状病毒 蛋白 鉴定 蛋白质组学
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严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒刺突蛋白基因片段的表达及其初步应用 被引量:3
8
作者 伊瑶 段淑敏 +5 位作者 张明程 周永东 高阳 杨焕明 董小平 毕胜利 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期267-268,共2页
SARS virus spike gene fra gment was expressed by Ecoli expr ession systemThe fragment enclose s major neutralization epitope of the virusThe expressed protein wa s purified and an ELISA method was set upBy... SARS virus spike gene fra gment was expressed by Ecoli expr ession systemThe fragment enclose s major neutralization epitope of the virusThe expressed protein wa s purified and an ELISA method was set upBy using the recombinant,tw elve patients’ sera were detected The recombinant SARS coronavirus s pike protein offers an efficient wa y for serological diagnosis and is useful for epidemiological survey and vaccin e 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 SARS 冠状病毒 刺突蛋白 基因片段 表达
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严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒N蛋白基因的表达及其初步应用 被引量:3
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作者 张明程 段淑敏 +5 位作者 伊瑶 周永东 高阳 杨焕明 董小平 毕胜利 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期269-270,共2页
SARS coronavirus N gene w as expressed by Ecoli expression systemThe expressed protein was p urified and an ELISA method was se t up for detection of SARS virus i nfected patient’s serum antibodyT he recomb... SARS coronavirus N gene w as expressed by Ecoli expression systemThe expressed protein was p urified and an ELISA method was se t up for detection of SARS virus i nfected patient’s serum antibodyT he recombinant SARS coronavirus N protein offers an efficient way fo r serological diagnosis and is use ful for epidemiological study and vaccine 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 SARS 冠状病毒 N蛋白 基因表达
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2019新型冠状病毒与严重急性呼吸综合征冠状病毒及中东呼吸综合征冠状病毒相关肺炎研究进展 被引量:5
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作者 郭丽娅 王玉光 +6 位作者 刘建 袁怀平 韩雪 霍建伟 马家驹 卢幼然 焦以庆 《心肺血管病杂志》 2020年第5期500-504,513,共6页
严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)、2019新型冠状病毒(2019-nCoV)同属于可感染人类的冠状病毒,并分别造成了20世纪之后人类历史上三次传染病的流行,对公共卫生构成了严重威胁。本文通过对SARS-... 严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)、2019新型冠状病毒(2019-nCoV)同属于可感染人类的冠状病毒,并分别造成了20世纪之后人类历史上三次传染病的流行,对公共卫生构成了严重威胁。本文通过对SARS-CoV、MERS-CoV、2019-nCoV的生物学特征,流行病学特征,以及其所引起肺炎的诊断、影像以及治疗等临床特征进行综述,比较异同点,以期对2019-nCoV导致的肺炎的临床诊治提供帮助。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒 中东呼吸综合征冠状病毒 2019新型冠状病毒 肺炎 临床特征
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2疫情期间儿童肾脏病房感染防控思维导图 被引量:3
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作者 王墨 陈学兰 +10 位作者 阳海平 黎小芹 张高福 陈晓凤 王梅 麦先英 蒲向阳 曹霞 温恩懿 李秋 《儿科药学杂志》 CAS 2020年第4期14-18,共5页
严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)感染的疫情已经持续了近2个月,现处于疫情胶着的状态。因儿童SARSCoV-2感染症状不典型,慢性肾脏疾病(CKD)患儿是高危感染人群,儿童肾脏专科病房的管理在复工、返校压力下,面临疫情防控的新挑战... 严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)感染的疫情已经持续了近2个月,现处于疫情胶着的状态。因儿童SARSCoV-2感染症状不典型,慢性肾脏疾病(CKD)患儿是高危感染人群,儿童肾脏专科病房的管理在复工、返校压力下,面临疫情防控的新挑战,国家临床研究中心肾脏病房、重庆市医学会儿科专委会肾脏学组,为进一步做好肾脏专科病房的疫情防控工作,结合目前疫情和相关防控建议,推荐SARS-CoV-2疫情期间儿童肾脏病房感染防控思维导图,以供儿童肾脏专科病房参考。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 传染病控制 肾脏病房 儿童
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2流行期间儿童实体肿瘤诊治中的防控策略 被引量:2
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作者 郑丽丽 王金湖 +6 位作者 吕丹尼 茅君卿 蔡嘉斌 熊洁妮 傅藏藏 单晓敏 叶阿琴 《临床小儿外科杂志》 CAS 2020年第2期104-110,共7页
自2019年12月湖北出现新型冠状病毒感染(corona virus disease 2019,COVID-19)患者以来,该病毒现已逐步扩散至全国各地及境外多个国家。国际病毒分类委员会将致病病毒命名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndr... 自2019年12月湖北出现新型冠状病毒感染(corona virus disease 2019,COVID-19)患者以来,该病毒现已逐步扩散至全国各地及境外多个国家。国际病毒分类委员会将致病病毒命名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2),人群普遍易感,包括儿童和孕产妇。恶性实体肿瘤患儿因肿瘤本身及化疗、放疗、免疫治疗等综合治疗手段的影响,免疫力较正常儿童低,可能更容易发生感染并进展为重症病例,而保障恶性实体肿瘤综合治疗计划实施的延续性和规范性是提高疗效、获得良好预后的关键之一。疫情期间,如何在做好疫情防控工作的同时保障肿瘤诊疗工作有序进行,是摆在每一个病患和医务人员面前的难题。本文结合COVID-19的传播特点以及有关部门防控COVID-19的要求,针对儿童实体肿瘤诊疗工作中的主要环节,提出疫情期间应考虑实施的措施和策略,建议制定科学的实体肿瘤门诊和病房管理制度,保障急诊手术,合理安排限期手术,适当延期择期手术,保障化疗规律进行,在保护患儿免受SARS-CoV-2感染的同时,确保儿童实体肿瘤综合诊疗工作的连续性。 展开更多
关键词 实体肿瘤 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 新型冠状病毒感染 防控策略 儿童
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严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒S蛋白的鉴定与分析 被引量:1
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作者 周世力 熊朝晖 +8 位作者 冷文川 段淑敏 李德新 王健伟 梁米芳 卫灿东 喻子牛 金奇 侯云德 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期320-323,共4页
利用293细胞对SARS病人样品进行病毒扩增,培养上清中病毒颗粒经过纯化后,利用蛋白质组学技术,对纯化得到的SARS冠状病毒颗粒蛋白进行初步分离与鉴定。其中质谱分析结果最终表明,分子量约150kD的蛋白质的氨基酸序列与SARS-CoV基因组所预... 利用293细胞对SARS病人样品进行病毒扩增,培养上清中病毒颗粒经过纯化后,利用蛋白质组学技术,对纯化得到的SARS冠状病毒颗粒蛋白进行初步分离与鉴定。其中质谱分析结果最终表明,分子量约150kD的蛋白质的氨基酸序列与SARS-CoV基因组所预测S蛋白质序列高度吻合,从而首次从蛋白质水平对SARS冠状病毒S蛋白的氨基酸序列进行了证实。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 冠状病毒 S蛋白 蛋白质组学 SARS
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严重急性呼吸综合征冠状病毒Spike蛋白诱发小鼠免疫损伤的实验研究 被引量:2
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作者 要国华 杨新艳 徐军 《中国呼吸与危重监护杂志》 CAS 2008年第2期81-87,161,162,共9页
目的研究严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)的Spike蛋白(S蛋白)引起免疫病理损伤的分子机制。方法采用信号转导通路发现者基因芯片筛选相关诱导免疫炎症的信号转导通路基因的表达,通过RT-PCR对基因芯片筛选基因进一步验证并观察信... 目的研究严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)的Spike蛋白(S蛋白)引起免疫病理损伤的分子机制。方法采用信号转导通路发现者基因芯片筛选相关诱导免疫炎症的信号转导通路基因的表达,通过RT-PCR对基因芯片筛选基因进一步验证并观察信号分子阻断剂干预的影响;将SARS-CoV的S蛋白及信号分子阻断剂分别经气管滴注、尾静脉注射的途径感染BALB/c小鼠,通过免疫组织化学观察肺及免疫器官的病理变化。结果S蛋白诱导了与γ干扰素(IFN-γ)类似的JAK-STAT的信号通路相关基因的表达,RT-PCR证实S蛋白诱导了人支气管上皮细胞的γ干扰素诱导蛋白10(IP-10)基因表达,该作用能够被JAK3抑制剂完全阻断。经气管滴注或尾静脉注射S蛋白均可引起小鼠肺损伤和脾脏损伤。JAK3抑制剂能够抑制S蛋白诱导小鼠肺内IP-10表达,减轻病理损伤。结论JAK-STAT信号转导通路的激活可能在SARS-CoV的S蛋白诱导的以IP-10为代表的炎症级联中起重要作用,该发现可为发展抗SARS病毒诱导的免疫损伤治疗提供新的策略。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 冠状病毒 SPIKE蛋白 γ干扰素诱导蛋白10
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严重急性呼吸综合征冠状病毒S蛋白启动急性肺损伤的可能机制 被引量:2
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作者 要国华 杨新艳 徐军 《医学研究生学报》 CAS 2005年第8期677-681,共5页
目的:研究严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(CoV)S蛋白作用于呼吸道上皮及免疫细胞后对趋化因子IP-10和其他细胞因子生成的影响。方法:通过昆虫-杆状病毒表达系统表达SARS-CoV的S蛋白,并经镍亲和磁珠纯化,将重组的S蛋白分别作用于人支... 目的:研究严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(CoV)S蛋白作用于呼吸道上皮及免疫细胞后对趋化因子IP-10和其他细胞因子生成的影响。方法:通过昆虫-杆状病毒表达系统表达SARS-CoV的S蛋白,并经镍亲和磁珠纯化,将重组的S蛋白分别作用于人支气管上皮细胞16HBE、外周血单个核细胞和单核细胞、肺泡单核-巨噬细胞,观察其形态学变化,并检测IP-10和其他细胞因子的变化。结果:基础状态下16HBE并不生成IP-10,S蛋白作用于人支气管上皮细胞16HBE,引起部分细胞变圆、空泡形成并裂解,12h后即可见IP-10生成达(79.97±13.81)pg/ml,呈显著量效关系。但对其他参与免疫反应的Th1/Th2细胞因子及趋化因子影响不明显。S蛋白并不诱导外周血单核细胞和单个核细胞(主要为淋巴细胞)合成释放IP-10。比较而言,干扰素-γ(IFN-γ)不仅能诱导16HBE,而能诱导免疫细胞生成IP-10。结论:①SARS-CoV可通过其S蛋白早期诱导肺上皮细胞合成释放IP-10,从而启动免疫病理过程。②SARS-CoVS蛋白诱导IP-10在宿主细胞的生成不依赖IFN-γ。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 冠状病毒 S蛋白 支气管上皮细胞
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基于暴露分析与关键控制点方法对医院开展严重急性呼吸综合征冠状病毒2型检测的可行性研究 被引量:1
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作者 崔泽林 Sebastian Leptihn +9 位作者 李明月 郭明权 高晶 李擎天 曾令兵 周与华 韦艳霞 郭晓奎 Nigel Temperton 冯婷婷 《微生物与感染》 CAS 2021年第1期26-36,共11页
评估2019新型冠状病毒病暴发期间在医院开展严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)核酸检测的可行性,为最终在医院开展核酸检测提供参考。熟悉暴露分析和关键点控制(exposure ana... 评估2019新型冠状病毒病暴发期间在医院开展严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)核酸检测的可行性,为最终在医院开展核酸检测提供参考。熟悉暴露分析和关键点控制(exposure analysis and critical control points,EACCP)工作框架的专业人员在基于医院现实条件下,对SARS-CoV-2检测过程中可能的感染暴露风险和途径进行梳理,建立整个检测流程,验证在配备有发热门诊的医院开展的可行性,并明确降低暴露风险的关键控制点。高风险是在发热门诊标本的采集和灭活处理,中风险是未灭活标本的储运,低风险是灭活标本的储运和检测。优化检验流程能降低检测过程中感染暴露风险,对于高风险的操作,可在生物安全二级实验室(发热门诊或移动采集点等)和相应的安全防护等级下进行操作;EACCP分析方法可用于新发感染性疾病暴发期间的管理。 展开更多
关键词 2019冠状病毒 严重急性呼吸综合征冠状病毒2型 医院 检测 发热门诊
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2核衣壳蛋白原核表达、纯化及其抗血清制备 被引量:4
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作者 秦照玲 彭浩然 +3 位作者 丁翠玲 肖爱军 戚中田 赵平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期481-486,共6页
目的表达并纯化重组的严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳(N)蛋白,通过免疫小鼠制备SARS-CoV-2 N蛋白抗血清。方法将含有SARS-CoV-2 N基因的pET28a-N原核表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导蛋... 目的表达并纯化重组的严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳(N)蛋白,通过免疫小鼠制备SARS-CoV-2 N蛋白抗血清。方法将含有SARS-CoV-2 N基因的pET28a-N原核表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导蛋白表达,用Ni-NTA亲和层析柱纯化SARS-CoV-2 N重组蛋白;将SARS-CoV-2 N重组蛋白联合锰佐剂通过肌内和皮下多点注射免疫BALB/c小鼠,获得抗血清;用蛋白质印迹分析检测SARS-CoV-2 N重组蛋白与SARS-CoV-2 N单克隆抗体及严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)N多克隆抗体的反应;用间接免疫荧光实验检测小鼠抗血清与真核表达质粒转染细胞中SARS-CoV-2 N重组蛋白的反应。结果成功诱导大肠杆菌表达出可溶性的SARS-CoV-2 N重组蛋白,相对分子质量约为55000,纯化出该重组蛋白;蛋白质印迹分析结果显示SARS-CoV-2 N重组蛋白能与SARS-CoV-2 N单克隆抗体及SARS-CoV N多克隆抗体结合;间接免疫荧光实验检测结果表明制备的小鼠抗血清能与哺乳动物细胞中表达的SARS-CoV-2 N重组蛋白结合。结论成功表达、纯化出SARS-CoV-2 N重组蛋白,并制备出该蛋白的小鼠抗血清,为后续建立SARS-CoV-2的快速诊断方法及开展SARS-CoV-2 N蛋白的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 核衣壳蛋白 原核表达 免疫血清
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)入胞机制及基于刺突蛋白的疫苗研制策略 被引量:4
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作者 王杨 薛亚娟 符兆英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期178-184,共7页
严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)利用其刺突(S)吸附与穿入细胞,冠状病毒S蛋白为同源三聚体,每一条肽链分为S1和S2两个区,S1通过其受体结合域(RBD)与细胞膜上的受体结合,S2介导病毒包膜与细胞膜或内体膜融合使病毒核衣壳进入细... 严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)利用其刺突(S)吸附与穿入细胞,冠状病毒S蛋白为同源三聚体,每一条肽链分为S1和S2两个区,S1通过其受体结合域(RBD)与细胞膜上的受体结合,S2介导病毒包膜与细胞膜或内体膜融合使病毒核衣壳进入细胞质。冠状病毒疫苗设计的主要出发点是诱导机体产生针对S蛋白的中和抗体,从而阻止病毒对细胞的吸附与穿入。动物实验和临床试验都已证实,冠状病毒S蛋白能刺激机体产生中和抗体,后者对机体具有保护作用。基于S蛋白的新冠病毒疫苗可以是病毒载体疫苗、重组蛋白疫苗、DNA疫苗、mRNA疫苗或病毒样颗粒疫苗,可以针对S蛋白的全长设计或针对RBD或S蛋白的其他区域设计。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2) 刺突(S)蛋白 中和抗体 疫苗 综述
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2流行期间小儿骨科门急诊及住院手术感染防控建议 被引量:3
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作者 吴春星 宁波 《临床小儿外科杂志》 CAS 2020年第2期98-103,共6页
2019年12月以来,严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染导致的肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)开始肆虐武汉,并且波及全国。我院作为上海市儿童SARS-CoV-2感染唯一... 2019年12月以来,严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染导致的肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)开始肆虐武汉,并且波及全国。我院作为上海市儿童SARS-CoV-2感染唯一定点接收治疗单位,要求各科室、各部门科学防治,精准施策,全面做好抗疫防疫工作。我们查阅国家公布的有关条例和最新研究,根据SARS-CoV-2理化性质和传染特点,遵从国家、医院制定的防控方案,结合小儿骨科临床实际,制定出适合小儿骨科临床实践的SARS-CoV-2感染防控措施,从小儿骨科门诊、急诊、住院和手术等各环节防控SARS-CoV-2感染,也希望能够为其他小儿外科亚专业及其他医院防控SARS-CoV-2感染提供参考。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 新型冠状病毒感染 小儿骨科 防控策略
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严重急性呼吸综合征冠状病毒2的Spike蛋白点突变后与受体蛋白质及潜在抗病毒药物结合能力的同源建模分析
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作者 曹泽 王乐童 刘振明 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期150-158,共9页
目的:分析严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)的全长测序信息中,其刺突蛋白(Spike protein,S蛋白)的自发突变情况,以及S蛋白突变前后与宿主相关受体蛋白质和潜在抗病毒药物结合... 目的:分析严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)的全长测序信息中,其刺突蛋白(Spike protein,S蛋白)的自发突变情况,以及S蛋白突变前后与宿主相关受体蛋白质和潜在抗病毒药物结合能力的变化。方法:对SARS-CoV-2的一级序列进行生物信息学分析,确定高频突变位点,利用PolyPhen-2软件逐一对S蛋白突变后的功能进行预测和分析。使用SWISS-MODEL系统对突变后的S蛋白序列进行基于相似性的同源建模,利用ZDOCK程序对所建模型与血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)、二肽基肽酶-4(dipeptidyl peptidase-4,DPP4,又称CD26)以及氨基肽酶N(aminopeptidase N,APN,又称CD13)进行蛋白质对接,用FiPD软件对结合能力评价结果进行分析,最后采用AutoDock-Chimera 1.14对突变前后的S蛋白与潜在抗病毒药物的结合能力进行预测和比较分析。结果:S蛋白的某些特定区域发生突变能够更大程度地影响其功能,突变之后,S蛋白与ACE2的结合能力趋向于减弱,而与DPP4的结合能力趋向于增强,与APN的结合能力无显著变化。抗人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)药物aplaviroc与S蛋白的亲和能力显著高于其他候选小分子药物。结论:SARS-CoV-2在自然状态下发生突变,其S蛋白第400~1100个氨基酸的区域为点突变高频区,突变趋势为与DPP4结合力增强,DPP4可能成为SARS-CoV-2感染细胞的新受体,aplaviroc可能成为一种SARS-CoV-2治疗药物的潜在选择。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 刺突糖蛋白 冠状病毒 突变 序列比对 分子对接模拟
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