丫蕊花皂苷P的抗白色念珠菌活性研究

目的本实验对Y蕊花皂苷P进行体外及体内抗白色念珠菌活性研究,为丫蕊花中甾体皂苷的研究及抗真菌药物的研发提供参考。方法测定丫蕊花皂苷P的MIC及MBC值,棋盘法检测Y蕊花皂苷P与抗菌药物的联用效果。采用时间杀菌曲线试验检查丫蕊花皂苷P与抗菌药联合起来的动态杀菌效果。观察丫蕊花皂苷P在小鼠内的抗白色念珠菌作用。结果体外试验结果表明,丫蕊花醇提物在白色念珠菌中的MIC值为0.25~1 mg/ml。丫蕊花皂苷P对多种白色念珠菌的MIC值分布2~4μg/ml,MBC值分布4~8μg/ml。棋盘法的测定结果表明,丫蕊花皂苷P与氟康唑联合使用时,对菌株CAY0109、CA632和CA152有协同杀菌的作用;体内试验结果表明,丫蕊花皂苷P组小鼠中位存活时间都比感染对照组延长,其中丫蕊花皂苷P 2 mg/kg小鼠中位存活时间和感染对象组的中位存活时间有统计差异(P<0.05)。在局部脏器菌落数实验中,心脏和肾脏组结果显示2 mg/kg Y蕊花皂苷P的菌落数与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论丫蕊花皂苷P对白色念珠菌具有较佳的抗菌作用,对其进一步研究具有重要意义。

丫蕊花甾体皂苷YB16促进A549细胞凋亡及其机制研究

目的观察丫蕊花甾体皂苷YB16对人肺癌细胞A549凋亡的影响,并探讨其促凋亡的作用机制。方法体外培养A549细胞,给予不同浓度的YB16干预,采用MTT比色法检测A549细胞增殖;荧光显微镜观察吖啶橙(AO)、5,5′,6,6′-四氯-1,1′,3,3′-四甲基咪唑并羰花青碘化物(JC-1)染色的细胞荧光变化;流式细胞术检测碘化丙啶(PI)单染、Annexin V-FITC/PI双染、细胞线粒体膜电位(JC-1染色)的变化;采用2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)法检测细胞活性氧(ROS)量的变化,免疫印迹法(Western blotting)检测YB16对细胞凋亡相关蛋白表达的影响。结果丫蕊花甾体皂苷YB16显著抑制A549细胞的生长(P<0.05),呈量效关系;随着药物浓度的增加,与对照组相比,细胞形态有显著变化;不同浓度YB16作用A549细胞后,细胞凋亡率上升(P<0.05);细胞线粒体膜电位下降明显;细胞内ROS水平上升,具有显著性差异(P<0.05);YB16作用A549细胞24 h后,抗细胞凋亡蛋白Bcl-2表达下降,促细胞凋亡蛋白Bax的表达增加,激活型半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)表达增加(P<0.05)。结论丫蕊花甾体皂苷YB16能抑制细胞增殖,降低细胞线粒体的膜电位,提升细胞ROS水平,促进细胞凋亡,具有良好的抗肿瘤活性。

丫蕊花甾体皂苷YB16对人前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响

目的:探讨丫蕊花甾体皂苷YB16对人前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养PC-3细胞,给予不同浓度的YB16(0.125~16μmol·L-1),以噻唑蓝(MTT)比色法检测YB16对PC-3的细胞毒性,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,吖啶橙(AO)染色、流式细胞术检测YB16对PC-3的凋亡影响,逆转录-聚合酶链式反应(RTPCR)检测YB16对PC-3细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),B细胞淋巴瘤-xl(Bcl-xl),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2,Bcl-xl,Bax,激活型Caspase-3(cleaved-Caspase-3)蛋白表达,并对结果进行分析。结果:YB16能显著抑制PC-3细胞的生长,具有剂量依赖性(P<0.05);YB16能促进细胞的凋亡,相差显微镜,AO染色法观察可见细胞具凋亡特征性改变;YB16能下调Bcl-2,Bcl-xl,上调Bax,Caspase-3 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论:YB16能抑制PC-3细胞增殖,促进PC-3发生凋亡,其机制可能与促进Caspase-3表达有关,具有良好的抗肿瘤作用。

丫蕊花甾体皂苷YB16诱导人结肠癌细胞凋亡作用

目的探讨丫蕊花甾体皂苷(YB16)对人结肠癌细胞HCT15凋亡的作用及其机制。方法体外培养HCT15细胞,以不同浓度的YB16(0.125~16.000μmol/L)干预24 h,噻唑蓝(MTT)法检测HCT15细胞存活率,光镜下观察细胞形态变化,吖啶橙(AO)染色观察细胞凋亡情况,JC-1染色观察细胞膜电位改变,蛋白免疫印迹检测细胞内B淋巴细胞瘤–2(Bcl-2)、多聚ADP–核糖聚合酶(PARP)、激活型PARP(cleaved-PARP)、半胱氨酸蛋白酶–3(caspase-3)、激活型caspase-3(cleaved-caspase-3)蛋白表达。结果与对照组比较,各剂量YB16组细胞存活率明显下降,呈剂量效应关系(P <0.05);与对照组比较,YB16组细胞出现凋亡特征性改变,凋亡细胞明显增多;与对照组比较,0.500、1.000μmol/L YB16组HCT15细胞内Bcl-2蛋白表达[分别为(0.542±0.04)、(0.351±0.03)]明显下降,cleaved-PARP、cleaved-caspase-3蛋白表达[分别为(0.647±0.05)、(0.686±0.03)和(0.677±0.03)、(0.762±0.04)]均显著上升,差异有统计学意义(均P <0.05)。结论 YB16可抑制HCT15细胞增殖、促进细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2蛋白表达、上调cleaved-PARP、cleaved-caspase-3蛋白表达有关。

重楼替代药材丫蕊花研究进展

百合科(Liliaceae)丫蕊花属植物具有和重楼属十分相似的化学成分及药理活性。丫蕊花和重楼活性成分主要为甾体皂苷,具有抗菌、止血、抗肿瘤等药理作用,因此丫蕊花具有替代重楼的药效物质基础,可在一定程度上缓解重楼资源危机。综述丫蕊花的研究进展,以期为加快丫蕊花的研究开发和利用提供参考。