丹皮酚对大脑中动脉缺血模型小鼠行为功能障碍的改善作用研究

背景中风是严重危害人体健康的心脑血管系统疾病之一,具有高患病率、高致残率和高致死率的特征。牡丹皮是毛茛科植物牡丹干燥根皮,具有清热凉血、活血化瘀之功效。丹皮酚是牡丹皮的主要活性成分,已有研究证实在缺糖缺氧条件下,丹皮酚对神经元有一定保护作用。目的观察丹皮酚对大脑中动脉缺血(MCAO)模型小鼠的干预效果,探究丹皮酚溶液灌胃在治疗中风行为功能障碍的神经生物学机制。方法本研究时间为2019年12月—2021年12月。缺血性中风模型的建立与评价:将20只SPF级雄性C57BL/6小鼠,采用随机数字表法分成假手术组(n=10)、模型组(MCAO组,n=10),采用线栓法制成小鼠MCAO模型,造模24 h后,通过Longa评分评价各组小鼠神经功能受损情况;激光散斑血流成像系统监测各组小鼠在MCAO术后大脑血流改变状况;对MCAO术后的小鼠进行TTC染色,在病理上观察小鼠大脑的损伤情况。探究丹皮酚对MCAO小鼠的行为功能保护作用:将50只SPF级、雄性C57BL/6小鼠进行随机分组:假手术组(n=10)、模型+玉米油组(n=20)、模型+丹皮酚组(n=20)。造模后24 h,验证模型稳定后,模型+丹皮酚组用丹皮酚玉米油溶液灌胃,给药浓度为100 mg·kg^(-1)·d^(-1),其余组灌服等量玉米油。在造模28 d后,统计三组小鼠的存活情况,绘制生存曲线;使用Longa评分判断小鼠神经功能恢复情况;尼氏染色法检测小鼠大脑梗死面积;行为学测试小鼠在造模前及造模后7、14、21、28 d 5个时间点的运动感觉功能改变。探究丹皮酚对MCAO小鼠行为功能改善的机制:随机将30只SPF级、雄性C57BL/6小鼠分成假手术组(n=6)、模型+玉米油组(n=12)、模型+丹皮酚组(n=12)。造模后24 h,验证模型稳定后,药物组用丹皮酚玉米油溶液灌胃,给药浓度为100 mg·kg^(-1)·d^(-1),其余组灌服等量玉米油。造模后2 d,用Western blotting法测定小鼠大脑纹状体白介素1β(IL^(-1)β)蛋白表达情况,探究急性期内丹皮酚是否能降低大脑炎性反应;造模后14 d,采用免疫荧光法检测小鼠大脑半暗带离子钙结合衔接分子1(IBA1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果模型+玉米油组小鼠干预28 d的生存率为66.47%,丹皮酚组小鼠生存率为81.43%。Log-rank检验结果显示,三组小鼠干预28 d的生存曲线比较,差异有统计学意义(χ^(2)=1.436,P<0.05)。造模28 d后,模型+丹皮酚组Longa评分低于模型+玉米油组(P<0.05)。三组小鼠造模后14 d脑组织中IBA1、GFAP表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);模型+玉米油组、模型+丹皮酚组小鼠造模后14 d脑组织中IBA1、GFAP表达水平高于假手术组(P<0.05);模型+丹皮酚组小鼠造模后14 d脑组织中IBA1、GFAP表达水平低于模型+玉米油组(P<0.05)。模型+玉米油组小鼠造模后2 d纹状体IL^(-1)β蛋白表达水平高于假手术组(P<0.05);模型+丹皮酚组小鼠造模后2 d纹状体IL^(-1)β蛋白表达水平低于模型+玉米油组(P<0.05)。结论丹皮酚可控制MCAO模型中小鼠在急性阶段的发症反应,减少了小鼠急性脑梗死面积,延长了小鼠生存期、改善了其运动感觉功能。

大鼠短暂局灶性大脑中动脉缺血后calpain的表达

目的 :研究calpain在缺血性脑损伤中的作用 ,进一步探讨缺血性脑血管病的分子机制 ,为治疗研发提供理论依据。方法 :用Belayev改良的Langa线栓法制备大鼠局灶性大脑中动脉 (MCA)缺血 /再灌注模型 ,TTC染色观察梗死灶的形成 ,分别用原位杂交及免疫组化技术检测鼠脑中calpainmRNA与活性蛋白的表达。 结果 :缺血 2h再灌注 2 4h ,TTC染色见明显的梗死灶形成 ,正常脑组织、假手术组及MCAO缺血对侧脑中有少量的calpainmRNA表达 ,但活性蛋白几无表达 ;缺血脑组织calpainmRNA表达及蛋白质活化均显著增加 ,呈双峰式 ,MCA缺血 2h增加 ,再灌注 4h减少 ,至 2 4h更明显增高 ,而 4 8h又有所下降。结论 :Calpain参与了缺血性脑损伤过程 ,尤其在迟发性神经元死亡中起重要作用。

症状性大脑中动脉缺血患者脑血管储备能力改变的相关性研究

目的探讨症状性大脑中动脉(MCA)缺血患者脑血管储备能力(CVR)改变情况及其相关因素。方法将该院经颅多普勒(TCD)和(或)MRI检查发现MCA狭窄的患者80例根据临床表现分为无症状组(n=52)和有症状组(n=28),并选择无脑血管狭窄及卒中危险因素的健康人30例作为对照组。所有受试者行TCD联合屏气试验检测患者CVR,比较脑血管狭窄患者的临床资料,应用单因素和多因素Logistic回归分析。结果有症状组屏气指数(BHI)为0.44±0.14,显著低于无症状组0.75±0.22和对照组0.98±0.27(P<0.05)。有症状组患者吸烟指数、饮酒指数、高血压、高血脂、糖尿病、脑卒中家族史、颈动脉内膜中层厚度(IMT)显著高于无症状组(P<0.05)。经Logistic回归分析显示吸烟、高血压、高血脂、糖尿病、IMT与BHI相关(P<0.05)。结论症状性MCA缺血患者CVR下降,患者CVR改变与吸烟指数、饮酒指数、高血压等脑卒中危险因素相关,CVR降低对脑缺血性事件预测具有一定价值。

复方白花前胡液对大脑中动脉缺血再灌注大鼠Caspase-3蛋白表达的影响

目的 :探索复方白花前胡液对大脑中动脉缺血再灌注大鼠Caspase 3蛋白表达的影响。方法 :线栓法制备大脑中动脉缺血再灌注大鼠模型 ,术后2 4、4 8、72h分别检测大鼠的神经功能缺损 ;并采用免疫组织化学法检测凋亡相关基因Caspase 3蛋白表达。结果 :MCAO R 2 4、4 8、72h后 ,所有动物都出现程度不同的运动障碍 ,且大鼠脑组织中Caspase 3蛋白表达显著升高 ,复方白花前胡液可明显改善大脑中动脉缺血再灌注大鼠的神经功能缺损症状 ,抑制大鼠Caspase 3蛋白表达水平。结论 :复方白花前胡液能有效抑制凋亡相关基因Caspase 3蛋白的表达 ,减轻或消除缺血级联反应中迟发性神经元死亡 ,复方白花前胡液是其治疗缺血性中风病的机理之一。

头针对大脑中动脉缺血再灌注模型大鼠Cyt-c、Caspase-3表达的影响

目的:探讨针刺对大鼠脑缺血后神经元凋亡的影响,揭示针刺脑保护机理。方法:选择SD大鼠,用线栓法复制右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,并进行头穴透刺,"百会"透"曲鬓",测定缺血半暗带Cyt-c、Caspase-3表达变化。结果:头穴透刺"百会"透"曲鬓"能下调缺血半暗带脑组织Cyt-c、Caspase-3表达水平。结论:针刺脑保护作用与下调Cyt-c、Caspase-3表达有关。

大脑中动脉缺血对脑表面血管密度的影响

目的研究大脑中动脉缺血性损伤对脑表面血管密度变化的影响。方法雄性Wistar大鼠 41只 ,随机分为空白对照组 (n =3)、假手术组 (n =3)、缺血损伤再灌注组 (n=35)。采用线栓模型造成右大脑中动脉血供阻断 2h ,缺血损伤再灌注组的再灌注时间点为 1d、2d、3d、7d和 1 4d。测定局部脑血流量 ,观察大脑表面的血管形态 ,测定右大脑半球单位面积的血管数目和总长度。结果随再灌注时间延长 ,右侧半球的血管数目、长度显著增加。

复方通络胶囊对大脑中动脉缺血再灌注大鼠的预防性保护作用

目的:观察复方通络胶囊对大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)大鼠的预防性保护作用。方法:采用MCAO大鼠模型,造模前大鼠灌胃给药1周,以神经行为学评分、脑梗死率、脑指数、脑含水量及脑组织伊文氏蓝含量为指标观察复方通络胶囊对MCAO大鼠是否有保护作用。结果:复方通络胶囊能明显降低模型动物神经行为学评分、脑梗死率及脑组织伊文氏蓝含量,与模型组比较差异显著。结论:复方通络胶囊对MCAO大鼠有预防性保护作用。

复方通络胶囊预处理大脑中动脉缺血再灌注大鼠后血浆vWFTM含量和MMP-2 mRNA表达的变化

目的:观察复方通络胶囊对大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)大鼠的预防性脑保护作用。方法:采用MCAO大鼠模型,造模前大鼠灌胃给药1周,以血浆血管性血友病因子(vWF)、血栓调节蛋白(TM)含量和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA的表达为指标,观察复方通络胶囊对MCAO大鼠的作用机制。结果:复方通络胶囊能明显降低模型动物血浆vWF、TM含量,与模型组比较差异显著(P<0.05),并且能抑制MMP-2 mRNA的表达。结论:复方通络胶囊能够降低模型动物血浆vWF、TM含量,抑制MMP-2 mRNA的表达,对MCAO大鼠有预防性脑保护作用。

症状性大脑中动脉缺血患者脑血管储备能力的变化及其相关因素

目的:观察症状性大脑中动脉(MCA)缺血患者脑血管储备能力(CVR)的变化,探讨其相关影响因素。方法:收集症状性MCA缺血患者50例为观察组,同时选取健康成年人50例为对照组。比较2组CVR的差异,分析不同临床病理特征的MCA患者CVR能力的差异,分析影响MCA患者CVR能力的因素。结果:观察组的CVR明显低于对照组,有显著性差异(t=6.276,P<0.001);年龄≥65岁、合并高血压、合并高脂血症、有吸烟史的症状性MCA患者其CVR较低;多因素分析显示,合并高脂血症、合并高血压和吸烟史是影响患者CVR能力的因素。结论:症状性MCA缺血患者CVR较低,且与患者是否合并高脂血症、高血压、吸烟史密切相关。

复方通络胶囊预处理大脑中动脉缺血再灌注大鼠后脑组织NOS SOD活性和MDA含量变化

目的:观察复方通络胶囊对大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)大鼠的预防性脑保护作用。方法:采用MCAO大鼠模型,造模前大鼠灌胃给药1周,以脑组织一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量为指标,观察复方通络胶囊对MCAO大鼠的作用机理。结果:复方通络胶囊能明显降低模型动物MDA含量,提高SOD活性,与模型组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01),并且能降低NOS活性。结论:复方通络胶囊能够降低模型动物NOS活性和MDA含量,提高SOD活性,对MCAO大鼠有预防性脑保护作用。

瑞替普酶联合丁苯肽胶囊改善急性进展性大脑中动脉缺血性脑卒中患者的临床预后

目的研究瑞替普酶(R-PA)联合丁苯肽胶囊在治疗进展性大脑中动脉急性缺血性脑卒中患者临床预后改善情况。方法通过倾向性匹配法选取2015年1月1日~2017年5月31日在我科接受治疗的急性进展性大脑中动脉缺血性脑卒中患者87例,根据治疗方法不同分为两组:观察组44例,采用R-PA联合丁苯肽胶囊进行治疗;对照组43例,采用阿替普酶(rt-PA)联合丁苯肽胶囊进行治疗,其他治疗及康复两组患者保持一致。比较评价两组患者不同阶段的近期临床预后(NIHSS评分)和远期临床预后(GOS和ADL评分)情况。结果观察组和对照组患者在性别构成、平均年龄、发病距开始治疗时间、脑梗死范围、入院时GCS评分等病情信息的差异均无统计学意义(P>0.05),具有较好的一致性;观察组和对照组患者在溶栓治疗后2h、24h、7d3个时间点的神经功能缺失情况差异无统计学意义(P>0.05),但是在第1月时观察组组患者的NIHSS评分均值更低,差异有统计学意义(P<0.05);观察组较对照组在第3、6、9月时GOS、ADL评分均更高,在第3月时差异无统计学意义(P>0.05),在第6、9月时差异有统计学意义(P<0.05)。以GOS评分在4分以上、ADL评分在75分以上为临床预后恢复良好,两组临床预后良好率差异虽无统计学意义(P>0.05),但观察组较对照组良好率更高,GOS评分两组良好率分别为70.45%、53.49%,ADL评分两组良好率分别为70.45%、60.47%。结论R-PA联合丁苯肽相比较rt-PA联合丁苯肽治疗急性进展性大脑中动脉缺血性脑卒中患者的远期临床预后更好,作为rt-PA的衍生物,R-PA在急性进展性大脑中动脉缺血性脑卒中的治疗表现出一定的治疗优势。

大脑中动脉缺血再灌注后nNOS的表达

①目的 探讨神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)与脑缺血的关系。②方法 制备Wistar大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型 ,用苏木精 伊红染色观察缺血后脑组织的形态学改变 ,用免疫组织化学法显示nNOS的变化。③结果 缺血再灌注后皮质及壳尾核nNOS免疫阳性神经元细胞表达增多 ,以再灌注 3h最多 ,6h开始下降。组织学观察可见缺血区内有神经元的变性、肿胀及坏死。④结论 在局灶性脑缺血再灌注早期nNOS表达增多 。

TCD与MRA及CTA对大脑中动脉缺血的评估

目的探讨经颅多普勒(TCD)与核磁共振(MRA)及CT血管造影(CTA)对大脑中动脉缺血事件的临床意义的异同。方法对54例短暂性脑缺血发作及脑梗死的病人分别进行及检查.结果TCD与CTA及MRAM对诊断M1段狭窄无显著性,对于诊断M2段狭窄具有显著性,MRA与CTA诊断大脑中动脉完全断流具有显著差异。结论CTA诊断M2段狭窄可能优于TCD,CTA诊断大脑中动脉完全断流优于MRA。

雌激素对小鼠大脑中动脉缺血后海马星形胶质细胞动态变化的影响

探讨雌激素对小鼠大脑中动脉缺血后海马星形胶质细胞动态变化的影响。方法:选取120只雄性成年昆明小鼠作为研究对象,将其随机分为参照组和实验组(各60只),前者给予腹腔注射0.9%生理盐水,后者在术前7天,每天定时腹腔注射17β雌二醇,剂量为0.1ml/10g。两组小鼠均接受永久性右侧大脑中动脉阻塞术,并于术后3小时、6小时、12小时、24小时、48小时以及72小时取材,观察脑梗死体积、神经功能损伤、海马星形胶质细胞情况。结果:术后不同时间点,实验组脑梗死体积明显低于参照组(P<0.05)。随着缺血时间的延长,海马区神经功能损伤程度越严重,除72小时时间点外,其他时间点,实验组海马区神经功能损伤评分明显低于参照组(P<0.05)。随着缺血时间的延长,两组海马星形胶质纤维酸性蛋白表达水平呈上升趋势,实验组缺血侧胶质纤维酸性蛋白表达水平高于参照组(P<0.05)。结论:雌激素能保护小鼠大脑中动脉缺血后的神经功能,减少脑梗死体积,可促进胶质纤维酸性蛋白的表达,有效延长突起。

脑络清对大脑中动脉缺血再灌注大鼠的保护作用

目的观察脑络清对大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)大鼠的保护作用。方法采用MCAO大鼠模型,以神经行为学评分、脑梗死率、脑指数、脑含水量及病理组织学检查为指标观察脑络清对MCAO大鼠是否有保护作用。结果脑络清能明显降低模型动物脑梗死率、脑含水量,保护神经元细胞与模型组比较差异显著(P<0.05)。结论脑络清对MCAO大鼠有保护作用。

症状性大脑中动脉缺血患者脑血管储备能力改变的相关性研究

目的探讨症状性大脑中动脉(MCA)缺血患者脑血管储备能力(CVR)改变的相关因素。方法从我院2012-03—2014-03收治的MCA缺血患者中选取84例进行回顾性分析,以42例未出现临床症状患者为无症状组,42例出现典型症状患者为有症状组,对其资料与临床特征进行对比,并通过多因素Logistic回归分析,总结CVR改变原因。结论有症状组患者BHI及IMT同无症状组比较,差异有统计学意义(P<0.05),有症状组中具有饮酒、吸烟史,糖尿病、高血脂及高血压史患者同对照比较,明显较多(P<0.05),多因素Logistic回归分析结果表明吸烟、糖尿病、高血脂、高血压及IMT与CVR改变具有相关性(P<0.05)。结论 CVR改变可提示症状性MCA缺血,而吸烟、糖尿病、高血脂、高血压及IMT与CVR改变具密切相关性。

蒙药萨乌日勒对大脑中动脉缺血再灌注模型损伤大鼠的神经保护作用研究

目的:探讨蒙药萨乌日勒对大脑中动脉缺血损伤模型大鼠的神经保护作用。方法:将30只Wistar雄性大鼠(体重220±20g)随机分为3组:空白组(NT)、模型组(IS)、萨乌日勒组(SA)。采用Zea-Longa线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血模型(MCAO),脑缺血90min后实施灌注。治疗方法:大鼠清醒24h后进行治疗。NT组和IS组:按1mL/100g·d灌胃蒸馏水;SA组:61.7mg/100g·d剂量灌胃。各组连续给药2周,第15天取材进行实验观察。①观察各组大鼠神经功能评分;②将大鼠脑组织HE染色,观察脑组织形态学改变;③检测血清的AST、ALT的含量,观察肝毒性。结果:①神经功能评分(Bederson):治疗前,模型组大鼠神经功能缺损障碍明显,与空白组比较差异显著(P<0.01);治疗2周后,与模型组比较,萨乌日勒组大鼠Bederson评分显著降低(P<0.01);②HE染色结果显示:NT组大鼠大脑皮质神经细胞分布规则,细胞胞浆丰满、细胞核内染色质清晰。IS组大鼠大脑皮质病变区色泽苍白,与周围分界明显;细胞胞浆浓缩红染,胞核固缩软化明显;细胞密度下降,分布较正常组织稀疏,排列不规则,水肿、疏松明显。SA组大鼠大脑病变区与周围分界明显,皮质神经细胞轻度减少,细胞浆与细胞核改变接近正常脑组织。与IS组比较SA组大鼠大脑正常细胞数量增多。各组大鼠肝组织HE染色结果显示:各组大鼠肝组织未见明显的异常。③检测血清AST、ALT含量结果示:模型组、萨乌日勒组血清肝功生化指标AST和ALT水平变化不大,与空白组比较无显著差异(P>0.05),表明萨乌日勒无肝毒性。结论:蒙药萨乌日勒可明显减轻大鼠神经功能障碍,对大脑中动脉缺血再灌注损伤具有较好的保护作用。

针刺结合游泳训练对大脑中动脉缺血再灌注大鼠认知功能的影响

目的探讨针刺百会穴结合游泳训练对大脑中动脉缺血再灌注大鼠认知功能的影响。方法将SD大鼠手术制成右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,将手术模型成功后的28只大鼠进行神经功能评定及水迷宫测试后按照随机数字表分为模型组、针刺组、游泳组和针游结合组,每组7只;另设假手术组7只。假手术组及模型组不给予任何治疗;针刺组给予百会穴针刺治疗,1次/d;游泳组给予游泳训练,1次/d;针游结合组给予针刺百会穴结合游泳训练,1次/d。共治疗6 d。每天治疗前测量体重进行神经功能评分,治疗6 d后进行水迷宫测试其学习记忆能力,测试结束取脑,采用TUNEL染色观察海马区细胞凋亡情况。结果治疗后针刺和游泳治疗无明显交互作用(P>0.05),但针游结合组大鼠神经功能评分低于模型组(P<0.05);针游结合组大鼠水迷宫穿越平台次数多于模型组(P<0.05)。结论针刺结合游泳训练对于大脑中动脉缺血再灌注大鼠认知功能的影响可能优于单纯针刺或游泳,需要更深入的研究探索。

蒙药希木德呼乌日勒对大脑中动脉缺血再灌注损伤的作用

目的:实施蒙药希木德呼乌日勒对大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤的改善作用。方法:把SD大鼠随机分为假手术组、模型组、希木德呼乌日勒组。对模型组、希木德呼乌日勒组大鼠实施大脑中动脉缺血再灌注。对希木德呼乌日勒组大鼠灌胃给希木德呼乌日勒,假手术组及模型组予生理盐水,1次/d,连续给药7天。结果:希木德呼乌日勒组大鼠大脑梗死面积小于模型组。模型组的神经功能评价评分(3.17±0.68)大于希木德呼乌日勒组(2.17±0.68)(P<0.051)。结论:蒙药希木德呼乌日勒能改善大鼠大脑急性缺血再灌注损伤。

儿童动脉缺血性卒中的研究进展

儿童动脉缺血性卒中(Pediatric Arterial Ischemic Stroke, PAIS)是一种在儿科神经疾病中相对罕见但重要的疾病,导致包括偏瘫、智力障碍和癫痫在内的长期神经系统后遗症。儿童AIS病因及危险因素不同于成人,目前临床工作者对儿童缺血性卒中的认识不足,住院期间诊断、影像方面的延误,以及许多“假性卒中”疾病,导致儿童动脉缺血性卒中诊断率并不高。与成人相比,儿童溶栓和机械取栓经验有限。因此提高医疗工作者对儿童AIS的认识,优化诊断和治疗流程,以及加强多学科合作是当前儿童AIS研究和临床实践的重要方向。