中华眼镜蛇毒组分C对人肝癌细胞株BEL-7402细胞凋亡及端粒酶活性的影响

目的 :研究中华眼镜蛇毒组分C对人肝癌细胞株BEL 74 0 2细胞凋亡和端粒酶活性的影响 ,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法 :用不同浓度的中华眼镜蛇毒组分C分别处理人肝癌细胞株BEL 74 0 2 ,采用MTT法、流式细胞仪法、TRAP -ELISA、透射电镜等观察其对肝癌细胞的细胞毒、细胞凋亡、细胞周期及端粒酶活性的影响。结果 :中华眼镜蛇毒组分C对人肝癌细胞株BEL 74 0 2有明显的抑制作用 ,且呈时间依赖性及剂量依赖性。用流式细胞仪分析发现中华眼镜蛇毒组分C可诱导BEL 74 0 2肝癌细胞发生凋亡 ,肝癌细胞明显阻滞于G0 /G1 期 ,在G1 峰前出现明显的亚二倍体凋亡峰 ,且其凋亡率随蛇毒浓度的升高而呈上升的趋势。用TRAP ELISA法同步测得蛇毒作用BEL 74 0 2肝癌细胞 8h后的端粒酶活性值明显下降 ,其抑制作用与剂量呈正相关 (r =0 .96 4 ,P <0 0 5 )。在电镜下 ,可观察到肝癌细胞出现明显的凋亡特征性改变 :细胞膜完整、核染色质固缩 ,核碎裂、凋亡小体形成。结论 :中华眼镜蛇毒组分C可显著抑制人肝癌细胞株 (BEL 74 0 2 )的增殖 ,在诱导肿瘤细胞发生凋亡的同时也下调瘤细胞的端粒酶活性 ,这可能是FC抗肿瘤的重要机制之一。

中华眼镜蛇毒组分C与传统化疗药物体外抑制人胶质瘤株作用的对比研究

目的研究中华眼镜蛇毒组分C(FC)体外对人胶质瘤细胞株U251的抑制作用。方法培养箱孵育U251与正常人胶质细胞;加入不同浓度的FC、阿霉素(ADM)和尼莫斯汀(ACNU)。采用细胞毒实验(MTT法),通过细胞生长抑制率评价FC、ACNU和ADM的细胞毒作用。结果FC对胶质瘤细胞的抑制作用突出,24h和48h的IC50分别为2.95μg/ml和2.21μg/ml,而ADM与ACNU远未达到此抑制率。FC对正常胶质细胞的24h、48hIC50分别为8.60μg/ml和6.61μg/ml,两细胞株间存在显著性差异(P<0.05)。结论人胶质瘤细胞对FC的细胞毒性作用是敏感的。FC对胶质瘤细胞的抑制作用优于ADM和ACNU。

中华眼镜蛇毒C组分诱导U251细胞凋亡及P53基因表达的实验研究

目的以人神经胶质瘤细胞系U251为实验对象,研究中华眼镜蛇毒C组分诱导细胞凋亡的机制。方法将中华眼镜蛇毒C组分分为1.5μg/mL(A组),3μg/mL(B组),4.5μg/mL(C组),15μg/mL(D组)和30μg/mL(E组)5个浓度组,以顺铂(DDP)40μg/mL为阳性对照组,另设一阴性对照组,观察光镜下细胞的形态变化,采用DNA凝胶电泳检测法,观察FC诱导细胞凋亡的情况;采用SP免疫组化法和RT-PCR法检查P53基因的表达。结果中华眼镜蛇毒C组分对U251细胞具有诱导凋亡的作用,FC诱导U251细胞凋亡率与药物浓度密切相关(P<0.01),使用FC前后,P53表达有显著增高。结论FC有诱导U251细胞凋亡的作用,但其诱导凋亡依赖于P53基因的改变。

眼镜蛇毒组分C的抗瘤活性及其对肿瘤细胞存活率的影响

目的观察眼镜蛇毒组分Ｃ对ＢＡＬＢ／Ｃ型小鼠腹水型肝癌Ｈ２２的抑瘤作用及其体外对肝癌Ｈ２２细胞存活率的直接影响。方法通过半体内实验，观察眼镜蛇毒组分Ｃ对小鼠腹水型肝癌Ｈ２２的抑瘤率；通过细胞培养，以细胞存活率为指标观察中华眼镜蛇毒组分Ｃ对ＢＡＬＢ／Ｃ型小鼠腹水型肝癌Ｈ２２细胞在体外的直接杀伤作用。结果眼镜蛇毒组分Ｃ能明显抑制ＢＡＬＢ／Ｃ型小鼠腹水型肝癌Ｈ２２细胞的生长，其抑瘤作用随剂量增大而增强，ＩＣ５０为９５ｍｇ／Ｌ。在体外，眼镜蛇毒组分Ｃ的浓度对ＢＡＬＢ／Ｃ型小鼠腹水型肝癌Ｈ２２细胞存活率的影响随其作用剂量的增大而增强，ＩＣ５０为９ｍｇ／Ｌ；同时，这种影响还随其作用时间的延长而增强。结论眼镜蛇毒组分Ｃ对ＢＡＬＢ／Ｃ型小鼠腹水型肝癌Ｈ２２有显著的抑瘤作用。