猪流行性腹泻病毒中和表位区S1D的原核表达及免疫原性分析

为了研究猪流行性腹泻病毒（PEDV）S1蛋白中和表位区S1D的免疫原性,根据PEDV河南株（Gen Bank：YK649107）S1基因序列,设计1对特异性引物,PCR扩增S1D片段,克隆到p ET-28a（＋）中,构建原核表达载体,经优化的IPTG浓度诱导后进行SDS-PAGE分析,利用His标签的特性重组蛋白进行纯化及Western blot分析。结果显示：中和表位S1D片段在p ET-28a（＋）中高效表达;Western blot证明重组蛋白可以与PEDV阳性血清产生特异性反应;用纯化的蛋白免疫新西兰白兔,抗体水平升高,表明重组蛋白具有良好的免疫原性。