苯并芘体外诱发中国仓鼠肺细胞（V＿（79））转化的研究

本文用苯并芘［Ｂ（ａ）Ｐ］在体外转化中国仓鼠肺细胞（Ｖ７９）在一定剂量范围内，转化灶数与苯并芘剂量呈正相关，在苯并芘０．５μｇ／ｍｌ时，达最高值２５．６７±４．５１灶／１０４细胞。在细胞发生形态转化的同时，细胞性质发生恶性变，能在软琼脂中生长。本模型方法简便、快速、条件易于控制，可作为体外肺癌研究的一个较理想模型。

阿托品对中国仓鼠V79细胞有丝分裂过程的影响

本研究以毒蕈碱型乙酰胆碱受体抑制剂阿托品在离体情况下作用于中国仓鼠Ｖ７９细胞，通过分析Ｖ７９细胞晚末期和早Ｇ１期细胞核与细胞质构型、双核细胞频率，探讨了阿托品对哺乳动物离体细胞正常有丝分裂过程的影响。结果发现，阿托品使Ｖ７９细胞的晚末期—早Ｇ１期细胞核和细胞质分裂构型发生显著变化、双核细胞的频率显著提高，提示阿托品可能通过Ｍ型胆碱受体阻断过程而对哺乳动物有丝分裂真实性产生影响。胆碱受体的功能异常可能为非整倍体发生的诱因之一。

昆明山海棠对中国仓鼠V_(79)细胞二酰基甘油含量的影响

本研究以昆明山海棠根部水抽提物(Tripterygium Hypoglaucum(Level)Hutch,THH)处理中国仓鼠V_(79)细胞,通过检测V_(79)细胞C-M细胞频率以及二酰基甘油(1,2-dia-cylgcerol,DAG)的含量测定,分析了THH诱发非整倍体与细胞醇磷酯信号通路的关系。结果 指出:THH能在1mg/ml、2mg/ml两个剂量上使V_(79)细胞的DAG含量显著升高(P<0.001),并明显的提高C-M细胞频率(P<0.05),提示肌醇酯信号通路是介导THH诱发非整倍体的途径之一。

中国仓鼠V79细胞对长波紫外辐射的应激反应

长波紫外线(UVA．320～400nm)在环境光生物学和光医学中具有重要意义,作者以指数生长期V79细胞为材料,用克隆形成和MTT分析法，实验证明：①UVA对V79细胞增殖有刺激作用,光源强度一定，在实验所用剂量范围内(5×10^3～2×10^5J／m^2),效应谱约在330～370nm波段之间，系单峰，效应峰值在350nm处．

地红霉素对中国仓鼠HGPRT位点突变V_(79)细胞基因突变试验

地红霉素113、225、450和900μg/ml浓度内,不论加或不加S（9mix）对V79细胞基因正向突变率均未超过自发突变率的3倍,并无量效关系。本试验说明地红霉素对中国仓鼠V79细胞未发现基因突变。

八氯二丙醚对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用

目的 研究八氯二丙醚 (S2 )对中国仓鼠肺细胞 (CHL)染色体畸变作用。方法 测定S2 对CHL细胞的半数抑制浓度 (IC50 ) ,根据IC50 设立不同剂量组 ,进行正式试验 ,分别观察 2 4h ,4 8h及加S9后的染色体畸变情况 ,根据标准进行结果判定。结果 染毒 2 4h为可疑阳性反应 ,染毒 4 8h以及加入活化系统染毒 6h为阳性反应。结论 S2 可引起CHL细胞染色体产生畸变作用。

葛根对中国仓鼠肺细胞的毒性作用

目的:观察葛根对中国仓鼠肺细胞(CHL)形态学、细胞增殖活性及细胞相对存活率的影响。方法:以葛根为受试物,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的葛根在不同作用时间对CHL相对存活率的影响。结果:不同浓度的葛根(12.50、50.00、100.00、200.00和400.00 mg.L-1)作用一定时间后,CHL存活率下降,细胞增殖明显受到抑制并出现细胞脱落,呈现出时间-剂量效应关系。接触受试物48 h后,细胞生长半数抑制浓度(IC50)为282.00 mg.L-1。结论:葛根可以抑制CHL生长,降低线粒体代谢活性。

纳米银对中国仓鼠肺成纤维细胞的细胞毒性和遗传毒性

目的:研究纳米银对中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)的细胞毒性和遗传毒性并探讨其作用机制。方法:以梯度浓度(2.5、5.0、10.0、20.0、40.0和80.0μg/m L)纳米银染毒CHL细胞,MTT比色法计算IC5 0以评估纳米银的细胞毒性水平。利用PI染色分析细胞周期变化并计算细胞增殖指数;Annexin V-FITC和PI双染检测细胞凋亡和坏死发生率,同时观察细胞染毒后的形态变化,记录前向角散射(FSC)和侧向角散射(SSC)信号;Giemsa染色中期分裂相涂片分析染色体畸变发生率。结果:纳米银毒性水平与纳米银浓度呈正相关(r=0.804,P<0.05),IC 50为21.68μg/m L。22.0μg/m L纳米银与CHL细胞接触24 h后,细胞形态发生明显改变;细胞群SSC信号显著增强,为细胞摄入纳米银提供间接证据;细胞周期在G2/M期被捕获,对G0/G1期、S期以及细胞增殖指数变化情况影响显著(P<0.01);22.0μg/m L纳米银染毒CHL 24 h后凋亡发生率与对照组差异明显(P<0.01);各浓度纳米银诱导染色体结构畸变率均大于5%(P<0.01),中高浓度四倍体发生率达到溶剂对照组的10倍以上(P<0.01)。结论:纳米银对CHL细胞有显著的细胞毒性和遗传毒性,线粒体功能受损、细胞凋亡在纳米银的细胞毒性和遗传毒性中起到重要作用。

彗星试验检测雄黄对中国仓鼠肺细胞DNA的损伤作用

目的检测含砷中药雄黄对中国仓鼠肺细胞(CHL细胞)DNA的损伤作用。方法测定雄黄对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行彗星试验,观察并比较不同组别不同损伤等级细胞数的差异。结果给药干预后,各剂量组及阳性对照组DNA损伤细胞数明显增加,且各剂量组随着给药浓度的增加,Ⅲ、Ⅳ级(中、重度)损伤细胞数增多。结论中药雄黄可引起CHL细胞DNA损伤。

镍冶炼烟尘对中国仓鼠肺细胞毒性作用的实验研究

目的 观察镍冶炼烟尘对中国仓鼠肺细胞 (CHL)的毒性作用。方法 以我国某镍冶炼厂电炉烟道尘为受试物 ,采用噻唑蓝 (MTT)比色法检测CHL细胞活性。结果 不同浓度下的镍冶炼烟尘 ( 6 2 5、 12 5 0、 2 5 0 0、 5 0 0 0、10 0 0 0 μg/ml)作用一定时间后 ,CHL细胞存活率下降 ,呈现出时间 剂量 反应关系。接触受试物 3 6h ,细胞生长半数抑制浓度IC50 为 2 1 3 6μg/ml。同时镜下观察细胞形态也发生改变。 结论 镍冶炼烟尘可以抑制CHL细胞生长 。

亚硝酸钠对中国仓鼠肺细胞染色体畸变率的影响

[目的]研究亚硝酸钠(NaNO2)致中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变的作用。[方法]测定NaNO2对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式实验,分别观察不加及加S9后的染色体畸变情况,根据标准进行结果判定。[结果]NaNO2染毒在不加S9时,128、12.8和1.28μg/ml3个剂量组的染色体畸变率均﹥5%而≤10%,为可疑阳性,而高剂量组(1.28mg/ml)畸变率﹥10%而﹤20%,为阳性反应。NaNO2染毒在加入活化系统S9后,各剂量组引起CHL细胞染色体畸变率在12.8和1.28μg/ml2个剂量组的染色体畸变率均﹥5%而≤10%,为可疑阳性,而中(128μg/ml)和高(1.28mg/ml)剂量组畸变率均﹥10%而﹤20%,为阳性反应。[结论]NaNO2在1.28mg/ml剂量下可引起CHL细胞染色体畸变率增高。

高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用

目的研究高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变作用。方法测定高纯度大豆卵磷脂对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式试验,分别观察高纯度大豆卵磷脂接触CHL 6 h,24 h及加S9后6 h染色体的畸变情况,根据标准进行结果判定。结果染毒6 h,24 h及加S9后染毒6h染色体畸变为阴性。结论高纯度大豆卵磷脂不能引起CHL细胞染色体产生畸变作用。

中国仓鼠肺细胞细胞周期阻滞微核试验与常规微核试验的对照研究

本研究测试了细胞松弛素B诱发中国仓鼠肺细胞(CHL)双核细胞的最佳时间的浓度；比较研究了丝裂霉素C，甲基磺酸甲酯，水合氯醛和秋水仙碱4种诱变剂在细胞周期阻滞法中诱发双核细胞微核率及常规微核试验中诱发单核细胞微核率的大小，结果表明：细胞松弛素B诱发CHL双核细胞的最佳时间为16h，

利用中国仓鼠肺细胞体外微核试验评价三七提取液的遗传毒性

目的:评价传统中药三七提取液的遗传毒性.方法:采用体外胞质分裂阻断微核法检测三七提取液在加与不加代谢活化系统S9的两种条件下对中国仓鼠肺细胞微核率的影响,三七提取液的制备采用乙醇反复浸提法.根据中性红摄取法细胞毒性测定试验的结果,微核试验设3个三七染毒浓度组(0.625、1.250、2.500 mg/mL)、阳性对照组(+S9条件下为20μg/mL环磷酰胺,-S9条件下为1μg/mL丝裂霉素C)和阴性对照组(MEM培养基).结果:三七提取液2.500 mg/mL浓度组,中性红摄取法细胞毒性测定试验中,吸光度值较阴性对照组显著降低(P<0.05),细胞存活率为80.3%;三七提取液0.625、1.250、2.500 mg/mL浓度组CHL细胞的微核率,在+S9条件下分别为17‰、16‰、16‰,在-S9条件下分别为17‰、15‰、16‰.与阴性对照组(+S916‰、-S915‰)比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:在本研究条件下,体外微核试验结果表明,三七提取液不具有遗传毒性.

富勒烯对中国仓鼠肺成纤维细胞的氧化损伤作用

目的探讨富勒烯(C60)对中国仓鼠肺成纤维(CHL)细胞的氧化损伤作用。方法用不同浓度的C60(0、1.25、2.5、5、10、20和40μg/mL)染毒24 h,四甲基偶氮唑盐实验检测C60对CHL细胞的增殖抑制作用,并检测细胞内LDH释放率及SOD、CAT活性和GSH、MDA、ROS含量。结果 C60染毒组细胞生存率下降,10、20、40μg/mL C60染毒组细胞存活率与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。CHL细胞中LDH释放量上升,且各染毒组与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01)。各染毒组随染毒浓度增加SOD、CAT活性降低,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01)。GSH含量降低,但仅C60 40μg/mL染毒组,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。MDA含量增加,10、20、40μg/mL剂量组,与对照组比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。ROS含量有不同程度的升高,与对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论 C60可引起中国仓鼠肺成纤维细胞损伤,可能是通过氧化应激介导。

地红霉素对中国仓鼠肺细胞体外染色体畸变的影响

目的:检测地红霉素对中国仓鼠肺细胞(CHL细胞)染色体致畸变的影响。方法:用体外方法检测地红霉素在12.50～50.0μg·mL^(-1)浓度范围内,代谢活化组(含S_9mix)及非活化组(不含S_9mix)CHL细胞的染色体畸变率。结果:地红霉素的代谢活化组(含S_9mix)及非活化组(不含S_9mix)的染色体畸变率均低于3%。结论:地红霉素对CHL细胞染色体畸变实验结果为阴性。

有丝分裂关卡功能下降在中国仓鼠肺细胞恶性转化过程中的作用

目的 观察中国仓鼠肺细胞 (CHL)在经化学致癌物恶性转化后的染色体不稳定性、有丝分裂关卡功能和对秋水仙素细胞毒性的抗性。方法 CHL细胞在经甲基硝基亚硝基胍 (MNNG)恶性转化后 ,进行核型分析 ,以秋水仙素诱导细胞停滞于有丝分裂中期的比例反映有丝分裂关卡功能 ,MTT法检测秋水仙素的细胞毒性。结果 细胞经 2 μg mlMNNG处理 2 4h ,3周后出现明显的形态转化 ,而且软琼脂集落形成率 ( 5 4 2 %)明显高于对照细胞 ( 10 %) ,表明处理细胞已恶性转化 ;核型分析显示转化细胞的染色体数目在 14～ 48之间 ,只有 7%的细胞有 2 5条染色体 ;而对照细胞 81%有 2 5条染色体 ,表明转化细胞染色体 (数目 )不稳定性 ;以 0 5 μg ml秋水仙素处理转化和对照CHL细胞不同时间 ,计数细胞有丝分裂中期相细胞比例 ,可见在各时间点 ,转化细胞的中期相细胞比例都低于相应的对照细胞 ,这表明转化细胞的有丝分裂关卡功能下降 ;以不同浓度秋山仙素处理转化和对照细胞 2 4h ,可见各浓度组转化细胞生存率明显高于对照细胞 ,这显示恶性转化细胞具有明显的秋水仙素毒性抗性。结论 有丝分裂关卡功能下降可能在细胞的恶性转化过程中有重要作用。

瓜蒌子饮片对中国仓鼠肺成纤维细胞体外遗传毒性研究

目的研究瓜蒌子体外遗传毒性,对瓜蒌子饮片安全使用提供借鉴。方法采用细胞活力试验、细菌回复突变试验和中国仓鼠肺细胞染色体畸变试验、微核试验对瓜蒌子水溶性浸出物进行体外遗传毒性安全性评估。结果细胞活力试验、细菌回复突变试验和中国仓鼠肺细胞染色体畸变试验、微核试验中各加药组细胞生长未受到显著影响,瓜蒌子水溶性浸出物遗传毒性与阴性对照组相比不具有显著差异。结论在测试条件下,瓜蒌子水溶性浸出物不具有显著的体外遗传毒性。

尼美舒利对中国仓鼠肺细胞染色体畸变的诱导研究

通过对新药尼美舒利的致突变Ames试验得知,该药对细菌无明显诱变效应。为进一步测试其致畸性,我们采用中国仓鼠肺细胞系(Chinese hamster fibroblast cell line,CHL)细胞在体外作该药致畸变效应分析。结果显示,在有或无肝微粒体酶活化系统(S _9)激活条件下,尼美舒利对CHL细胞染色体畸变率无明显影响。结合Ames试验表明,该药对细菌和哺乳动物细胞无明显致突变和致畸变效应。