昆明山海棠对中国仓鼠V_(79)细胞二酰基甘油含量的影响

本研究以昆明山海棠根部水抽提物(Tripterygium Hypoglaucum(Level)Hutch,THH)处理中国仓鼠V_(79)细胞,通过检测V_(79)细胞C-M细胞频率以及二酰基甘油(1,2-dia-cylgcerol,DAG)的含量测定,分析了THH诱发非整倍体与细胞醇磷酯信号通路的关系。结果 指出:THH能在1mg/ml、2mg/ml两个剂量上使V_(79)细胞的DAG含量显著升高(P<0.001),并明显的提高C-M细胞频率(P<0.05),提示肌醇酯信号通路是介导THH诱发非整倍体的途径之一。

中国仓鼠V79细胞对长波紫外辐射的应激反应

长波紫外线(UVA．320～400nm)在环境光生物学和光医学中具有重要意义,作者以指数生长期V79细胞为材料,用克隆形成和MTT分析法，实验证明：①UVA对V79细胞增殖有刺激作用,光源强度一定，在实验所用剂量范围内(5×10^3～2×10^5J／m^2),效应谱约在330～370nm波段之间，系单峰，效应峰值在350nm处．

地红霉素对中国仓鼠HGPRT位点突变V_(79)细胞基因突变试验

地红霉素113、225、450和900μg/ml浓度内,不论加或不加S（9mix）对V79细胞基因正向突变率均未超过自发突变率的3倍,并无量效关系。本试验说明地红霉素对中国仓鼠V79细胞未发现基因突变。

V79细胞基因突变试验的应用研究

哺乳动物细胞基因突变试验是近年来发展的检测化学物质致突变作用一较为成熟的方法．本文利用中国仓鼠肺V79细胞HGPRT基因位点突变试验对蜂胶的致突变性和有机锗Ge-132的抗突变性进行了初步研究．结果显示：①剂量为2μg／ml、10μg／ml,50μg／ml的蜂胶浸出液无诱变性．②剂量为100μg／ml的Ge-132可抑制丝裂霉素C诱导的V79细胞基因突变，

二甲基甲酰胺对V79细胞的毒性作用

[目的]了解二甲基甲酰胺(DMF)对中国仓鼠肺成纤维细胞(V79细胞)的细胞毒性及DNA损伤作用。[方法]以体外培养V79细胞为研究对象,采用四氮唑盐比色分析法(MTT法)和单细胞凝胶电泳技术(SCGE)分别检测5个浓度(0.5、2.0、8.0、32.0、128.0mmol/L)DMF在3个时间段(6、12、24h)染毒后对V79细胞的毒性作用和DNA损伤情况。[结果]同一时间组V79细胞存活率随染毒浓度的增加而下降,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),存在明显的剂量-效应关系(6h:b=-0.002,P<0.05;12h:b=-0.003,P<0.05;24h:b=-0.003,P<0.05)。各染毒浓度组的彗星拖尾率、尾长、Olive尾距、尾部DNA百分含量,与同一时间阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。[结论]本实验条件下,DMF能够明显抑制V79细胞增殖,存在正向的剂量-效应关系,并能引起DNA损伤。

纤蛇纹石石棉及代用纤维粉尘的光谱研究与噻唑蓝(MTT)比色法分析

以纤蛇纹石石棉、陶瓷纤维、玻璃纤维、岩棉、硅灰石为受试物,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测染毒72h后V79细胞的存活率,并通过吉姆萨染色观察细胞形态学上的变化。不同浓度ρ/(μg.ml-1)的矿物粉尘(100,200,400,600,800,1000)作用72h后,V79存活率下降,细胞增殖明显受到抑制并出现大量细胞衰亡,呈现出剂量效应关系,且细胞毒性大小为玻璃纤维>纤蛇纹石石棉>陶瓷纤维>硅灰石>岩棉;形态学观察发现染毒细胞出现空泡、肿胀、裸核、黑褐色颗粒以及胞浆胞核模糊、形态变化等现象,且不同的粉尘对V79细胞的影响不同。总体而言,岩棉是五种粉尘中毒性最低的石棉代用纤维。

2,4,4′-三氯联苯诱发微核和基因突变作用及其代谢酶依赖性

目的本课题组近年报道了非二噁英样多氯联苯化合物对哺乳动物细胞的致突变作用,且作用依赖于人细胞色素P450(CYP)2E1酶的代谢活化;本研究进一步探讨非二噁英样化合物2,4,4′-三氯联苯(PCB28)的致突变作用。方法采用CCK8法、微核实验和Hprt致突变实验检测PCB28对中国仓鼠V79和重组表达人和硫酸基转移酶(SULT)1A1的V79衍生细胞(V79-hCYP2E1-hSULT1A1)的细胞毒性和遗传毒性,并利用酶抑制剂观察重组表达的酶对于受试物毒效应的影响。结果PCB28(5~40μmol/L)经12h染毒、12h恢复,对V79-Mz和V79-hCYP2E1-hSULT1A1细胞均无细胞毒作用,1-氨基苯并三唑(60μmol/L,CYP抑制剂)和五氯苯酚(10μmol/L,SULT1抑制剂)的与受试物同时暴露于V79-hCYP2E1-hSULT1A1细胞对细胞活力影响甚微。PCB28在5~20μmol/L对V79-Mz细胞没有诱发微核的作用,但对V79-hCYP2E1-hSUT1A1细胞则明显增加其微核细胞率(P<0.05),且具有浓度依赖效应;此作用可被1-氨基苯并三唑明显降低,而被五氯苯酚明显增强。PCB28(10~40μmol/L)对V79-Mz细胞Hprt基因突变频率无影响,对V79-hCYP2E1-hSUT1A1细胞则诱发基因突变频率增加(P<0.05),其作用呈浓度相关性。结论PCB28可能经CYP2E1酶活化为致突变性代谢物,后者可由人SULT1A1酶代谢减毒;同其他非二噁英样多氯联苯类似,PCB28可能是一个由人CYP2E1酶活化的前致突变物。