中国对虾“黄海5号”大规格苗种池塘混养技术试验

中国对虾与三疣梭子蟹池塘混养是河北省沿海地区对虾池塘主要的养殖模式之一。本试验在培育了中国对虾“黄海5号”大规格苗种的基础上,与三疣梭子蟹“黄选2号”混养,不仅模拟了生态环境,合理利用了养殖空间,而且取得了良好的经济效益和社会效益。

“黄海1号”中国对虾体长遗传力的估计

应用数量遗传学原理和全同胞组内相关法估计了“黄海1号”中国对虾（Fenneropennes chinensis）孵化后3月龄和4月龄体长的遗传力。实验中的36尾亲虾均来自人工养殖的“黄海1号”第9代选育群体。通过人工授精技术，构建了9个半同胞家系和21个全同胞家系，分别测定了，3月龄和4月龄时30尾后代个体的体长。利用SPSS软件的一般线性模型（GI-M）过程，计算表型变量的方差组分，估计体长性状的遗传力。分析结果表明，“黄海1号”中国对虾3月龄和4月龄体长的狭义遗传力估计值分别在0．46～0．53和0．44～0．48之间。雌性遗传方差组分均显著大于雄性遗传方差组分（P〈0．05），说明雌性遗传方差组分存在非加性效应或受环境影响较大。另外，雌性方差组分估计的遗传力由3月龄的0．53下降到4月龄的0．48，下降程度最大，说明雌性方差组分可能存在显著的母体效应。

高pH胁迫对“黄海1号”中国对虾免疫相关酶的影响

对高pH养殖水体中"黄海1号"中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)群体和野生群体的存活率,血清中的溶菌酶(LSZ)、酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)及酸性磷酸酶(ACP)活力变化进行了测定。经高pH胁迫72h后检测发现,在pH8.2～8.6,"黄海1号"和野生群体存活率均高于90%,两群体机体表现出一定的应激能力;在pH8.8～9.0时,"黄海1号"及野生群体死亡率都急剧增加,几种免疫相关酶类较在pH8.6时都有较高幅度的变化,"黄海1号"的死亡率及酶突变程度均小于野生群体;在pH9.2时,2群体的死亡率及体内的几种免疫相关酶活性变化幅度继续增大,但2群体间差异减弱;在pH9.4时,两群体中国对虾全部死亡。比较发现,当海水pH在一定的范围内升高时,"黄海1号"免疫能力要高于野生群体。

中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)“黄海3号”新品种的培育

2006年收集中国对虾"黄海1号"保种群以及海州湾、莱州湾2个野生群体为基础群体构建核心育种群,采用群体选育技术以仔虾Ⅰ期耐氨氮胁迫成活率和收获时对虾体重为选育指标,经过连续5代选育,培育出中国对虾"黄海3号"新品种。新品种耐氨氮胁迫能力强,仔虾Ⅰ期成活率较商品苗种提高21.2%,养殖成活率提高15.2%;生长速度快,收获对虾平均体重较商品苗种提高11.8%。AFLP技术分析获得5代选育群体的平均多态位点比例分别为42.28%、40.64%、40.32%、39.95%和38.05%。研究结果显示,随着选育世代的增加,选育群体的遗传多样性呈现下降趋势,但随着选育时间的延长,世代之间的分化逐渐降低,群体的遗传结构开始趋于稳定。

氯化铵对“黄海1号”中国对虾免疫相关酶类的影响

在不同浓度氯化铵作用条件下对中国对虾"黄海1号"群体和中国对虾野生群体的存活率,血清中的溶菌酶(LSZ)、酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)及酸性磷酸酶(ACP)活力变化进行了测定。发现"黄海1号"的24、48和72h的半数致死浓度(LC50)及安全浓度均高于野生群体;氯化铵浓度为8mg/L时,"黄海1号"体内的碱性磷酸酶、酸性磷酸酶活力极显著低于野生群体(P<0.01);氯化铵浓度为16mg/L时,"黄海1号"体内的溶菌酶活力显著高于野生群体(P<0.05),酸性磷酸酶活力显著低于野生群体(P<0.05);氯化铵浓度为32mg/L时,"黄海1号"体内的溶菌酶、酚氧化酶活力极显著高于野生群体(P<0.01),超氧化物歧化酶活力显著高于野生群体(P<0.05),酸性磷酸酶活力显著低于野生群体(P<0.05);氯化铵浓度为64mg/L时,选育群体"黄海1号"体内的超氧化物歧化酶活力显著高于野生群体(P<0.05);氯化铵浓度为128mg/L时,两群体的各项免疫指标都未出现明显差异。比较发现,随着氯化铵浓度的上升,选育群体中国对虾"黄海1号"几种与抗病力相关的生理指标都表现出了其比野生群体优良的特性。

野生和“黄海1号”中国明对虾不同组织基因组DNA的MSAP分析

为了从表观遗传学角度讨论中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)野生群体和人工选育新品种"黄海1号"不同组织间甲基化水平和多态性差异,应用甲基化敏感扩增多态性(mehylation sensitive amplified polymorphism,MSAP)分别对野生群体组中国明对虾和"黄海1号"肌肉、鳃、血液3种组织样品基因组DNA的CCGG甲基化水平进行对比分析,试图从表观遗传学角度探讨影响中国明对虾生长性状的分子机制。采用30对引物进行选择性扩增,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(Polyacrylamide Gel Electrophoresis,PAGE)带型结果显示,野生群体组中国明对虾肌肉、鳃和血液的甲基化比例分别为23.1%,22.3%和19.7%;而"黄海1号"肌肉、鳃和血液的甲基化比例分别为21.4%、19.6%和18.9%。野生群体组中国明对虾和"黄海1号"同一组织间的甲基化水平和甲基化多态性水平不同,肌肉、鳃和血液不同组织间的甲基化水平和甲基化多态性水平亦不同。DNA甲基化多态性带型分析显示,鳃组织的甲基化水平和多态性水平在野生群体组中国明对虾和"黄海1号"间变化趋势最大,肌肉最稳定。本研究旨为甲基化修饰与中国明对虾生长性状间的相关性研究提供依据。

中国对虾“黄海1号”与野生群体F1代生长发育规律比较

采用4种生长曲线模型对中国对虾“黄海1号”和野生群体F1，代15项形态性状的生长规律进行了拟合，以三次函数模型的拟合优度（R0）最高；采用三次函数模型拟合的2个群体各形态性状的生长曲线、拐点月龄以及拐点体重（各形态性状长度）结果表明，中国对虾“黄海1号”的拐点月龄为2．87（拐点体重14．98g），野生群体F1代的拐点月龄为4．05（拐点体重26．26g）；中国对虾“黄海1号”各形态性状的拐点月龄分布在0．51～3．07之间，达到最大生长速度的顺序分别为：头胸甲长〉第1腹节宽〉头胸甲高〉腹1高〉头胸甲宽〉体长〉全长〉腹节5长〉腹节3和4长〉尾节长〉腹节2长〉腹节1长〉腹节6长；野生群体F1代除第2腹节长的拐点月龄为0．45之外，其它性状的拐点月龄分布在2．38～3．08之间，达到最大生长速度的顺序分别为：腹节2长〉腹节1长〉腹节3长〉腹节4长〉头胸甲高〉腹节5长〉头胸甲宽〉全长〉腹1高〉腹1宽〉尾节长=头胸甲长=体长〉腹节6长，除第1和第2腹节长2个性状外，野生群体F，代的其它性状均比中国对虾“黄海1号”发育迟缓了1个月左右。

三疣梭子蟹“黄选2号”与中国对虾“黄海系列”池塘高效养殖试验

为提高海水对虾池塘养殖综合效益,探索生态混养高效养殖模式,2021年引进了三疣梭子蟹新品种“黄选2号”,开展了虾蟹生态混养试验示范,与海捕梭子蟹混养相比,新品种“黄选2号”养成规格明显提高,成活率提高1%,单位产量提高229.5 kg/hm^(2),平均售价提高10元/kg,单位效益提高1.5万元/hm^(2),取得了良好的经济效益、社会效益和生态效益。

“黄海1号”中国对虾套养彩虹鲷试验

彩虹鲷是利用现代生物工程技术培育出来的一种体色为红色的罗非鱼，杂食性，生长速度快，耐低氧，适应能力强，海淡水均可养殖，是虾池中一个理想的套养品种。与“黄海1号”中国对虾套养，不仅可以充分利用养殖空间，而且还能清除虾池中的残饵、代谢物，改善底质，降低成本，可以明显提高综合效益。更重要的是，彩虹鲷还可以清除池塘中的病虾、死虾，防止对健康虾的污染。2013年我们在丰南区黑沿子镇涧河村进行了套养试验。试验面积1．73 hm2。放养“黄海1号”中国对虾13万尾、彩虹鲷1300尾，共收获对虾2030 kg、彩虹鲷780 kg ，纯效益80771元。

投喂配合饵料与蓝蛤养殖“黄海1号”中国对虾对比试验

试验在前期纳足海水,后期添加淡水,全程不换水的条件下,对比全部投喂配合饵料和中后期改投蓝蛤鲜活饵料两种不同投喂方式养殖"黄海1号"中国对虾的效果,发现前者明显好于后者,平均单产、成活率、收获规格分别达到765kg/hm2、47.2%、27g/尾,分别比后者的667.5kg/hm2、44.5%、25g/尾,高14.6%、6%、8%。

温岭地区“黄海2号”中国对虾示范养殖试验

为探究在温岭地区养殖"黄海2号"中国对虾的混养模式,进行了"虾—鱼"、"虾—蟹"、"虾—鱼—贝"、"虾—贝"等多种养殖模式的混养试验。试验结果表明:"黄海2号"中国对虾在7月中旬高温季节来临之前生长速度快,但进入高温季节,当水温达到30℃以上时,生长速度明显减缓。放养密度在每亩1.10万～1.55万尾时,中国对虾单产为34.2～61.0 kg/亩(15亩=1 hm2,下同)。除了采用"虾—鱼"混养模式的一口池塘外,其它均获得了较好的收益。

中国对虾“黄海2号”健康养殖技术

中国对虾主要分布在我国黄渤海,1990年曾占我国对虾养殖产量的70％,但由于病害、体质、环境、养殖模式等原因,养殖产量急剧下降,对虾养殖行业亏损严重.＂黄海2号＂中国对虾是黄海研究所采用群体家系与多性复合育种技术,经过10年连续选育获得的继＂黄海1号＂又一个人工培育海水养殖新品种,优良性能体现在：生长快,个体大,抗病能力强,成活率高等.

RAPD和SSR两种标记构建的中国对虾遗传连锁图谱

利用RAPD和SSR分子标记结合拟测交策略,对中国对虾(Fenneropenaeuschinensis)“黄海1号”雌虾与野生雄虾作为亲本进行单对杂交产生的F1代,采用RAPD和SSR两种分子标记技术初步构建了中国对虾雌、雄遗传连锁图谱。对460个RAPD引物和44对SSR引物进行筛选,共选出61个RAPD引物和20对SSR引物,用于对父母本和82个F1个体进行遗传分析。共得到母本分离标记146个(RAPD标记128个,微卫星标记18个)和父本分离标记127个(RAPD标记109个,微卫星标记18个)。雌性图谱包括8个连锁群、9个三联体和14个连锁对,标记间平均间隔为11·28cM,图谱共覆盖1173cM,覆盖率为59·36%;雄性图谱包括10个连锁群、12个三联体和7个连锁对,标记间平均间隔为12·05cM,图谱共覆盖1144·6cM,覆盖率为62·01%。中国对虾遗传图谱的构建为其分子标记辅助育种、比较基因组作图及数量性状位点的定位与克隆奠定了基础。

中国明对虾人工选育群体与野生群体遗传多样性的SSR分析

利用微卫星标记技术分析了中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)野生群体(Wild Population,WP)和"黄海2号"第10代选育群体(Breeding Population,BP)的遗传多样性,以检测累代人工选育对中国明对虾群体遗传结构的影响。结果显示,15个微卫星位点共检测到462个等位基因,微卫星位点等位基因数(N_a)和有效等位基因数(N_e)分别为3~44个和2~29个,多态信息含量(PIC)为0.518~0.964。野生群体和选育群体的平均观测杂合度分别为0.852和0.810,15个微卫星位点的等位基因频率在2个群体发生了显著的变化。通过计算P值确定位点Hardy-Weinberg平衡偏离情况,Fis结果显示,共有11个群体位点表现为杂合子过剩,Shannon指数(H)分别为2.786和2.399。2个群体的N_ei′s无偏遗传距离(u D)和无偏遗传相似度(u I)分别为0.177和0.838,遗传分化指数为0.017(P=0.001),表明群体发生了弱遗传分化。遗传变异来源分析显示,只有7.50%的变异来自于群体间,其余遗传变异均来自于个体间。结果表明,人工选育的中国明对虾"黄海2号"第10代群体具有较高的遗传多样性,仍具有很大的选育潜力,可以继续作为选育材料。

中国对虾苦咸水养殖技术通过验收

最近，河北省水产技术推广站组织专家组，对在该省沧州南大港产业园区开展的“黄海1号”中国对虾苦成水集约化健康养殖技术实验项目进行了验收。专家表示，把中国对虾“黄海1号”新品种及其健康养殖技术成果转化应用于苦咸水养殖，为沿海盐碱地开发、丰富水产品市场、增加农民收入奠定了基础，将产生重要的经济、社会和生态效益。

中国对虾“黄海2号”在南方地区示范养殖试验

为探究南方地区养殖中国对虾“黄海2号”的适宜模式，开展了“虾-鱼”、“虾-蟹”、“虾-鱼-贝”、“虾-贝”等多种养殖模式试验。结果表明：中国对虾．“黄海2号”在南方地区养殖，7月中旬高温来临之前，生长速度快，但进入高温季节（水温30℃以上）时，生长速度明显减缓。放养密度每667m2 1．1万．1．55万尾时，对虾单产为34．2～61kg。除“虾一鱼”试养模式的1个池塘外，其余均获得了较好的收益。

中国对虾和三疣梭子蟹新品种培育

近年来，由于种质、病害和环境因素的影响，尤其是人工养殖的虾、蟹基本上使用未经选育的野生种，经过累代养殖，出现了生长速度慢、抗逆性差、性状退化严重等问题，已成为制约产业可持续发展的“瓶颈”。本研究采用群体选育技术，经过连续5代的群体选育，培育出我国第一个水产抗逆新品种——中国对虾“黄海5号”和我国第一个海产蟹类新品种——三疣梭子蟹“黄选1号”。中国对虾“黄海5号”收获对虾体重较商品苗种提高11．8％，仔虾1期成活率提高21．2％，养殖成活率提高15．2％；三疣梭子蟹“黄选1号”生长速度提高20．12％，成活率提高52％，通过养殖示范与推广，经济效益和社会效益显著。

科技·推广

由中国水产科学研究院黄海水产研究所承担的国家高技术研究发展计划（863计划）“中国明对虾抗病新品种培育技术（中国对虾遗传改良技术）”课题，和山东省日照市水产研究所共同开展中国明对虾选育研究，采用传统选择育种技术与分子遗传标记辅助育种技术相结合，研究分析了不同选育世代中国明对虾的遗传变异情况，经过连续7代选育，成功选育出生长速度快、抗逆能力强的优良新品种——“黄海1号”，成为我国第一个人工选育成功的海水养殖动物新品种，并通过了国家原良种审定委员会的审查。